技术领域
本发明属于中药检测技术领域,尤其涉及一种中成药中化学成分添加的检测方法。
背景技术
中成药是以中药材为原料,在中医药理论指导下,为了预防及治疗疾病的需要,按规定的处方和制剂工艺将其加工制成一定剂型的中药制品,是经国家药品监督管理部门批准的商品化的一类中药制剂。由于方中各味药又含有多种化学成分,同时为了提高药效添加部分化学药品,这些化学成分是复方发挥药效作用的物质基础,但方中任一活性成分又不能全面反映中医用药所体现的整体疗效,所以宏观的综合分析检测成为中成药发展的必然趋势。随着中药现代化、国际化的深入发展,迫切需要建立一种对中药产品中添加的复杂成分检测的方法。
由于中成药中基质复杂,含有的例如黄酮、生物碱、多糖等成分容易干扰检测,使用传统的中医检测方法如薄层色谱法、高效液相法等其灵敏度和准确性达不到理想状态,因此需要提供一种适用于各类化学复杂成分的检测方法。
发明内容
本发明目的就是为了弥补已有技术的缺陷,提供一种中成药中化学成分添加的检测方法。
为了实现上述的目的,本发明提供以下技术方案:
一种中成药中化学成分添加的检测方法,将需要检测的化学成分配制成标准溶液,绘制标准曲线,再将待检测的中成药样品制成样品液,通过液相色谱串联质谱法进行测定,与标准溶液作对照进行定性定量分析。
进一步的,所述需要检测的化学成分为中成药或保健品中添加的功能化学成分。
更进一步的,所述功能化学成分包括地萘丁美酮、塞米松、对乙酰氨基酚、泼尼松、磺胺甲噁唑、氨基比林、非那西丁、吡罗昔康、马来酸氯苯那敏、舒林酸、酮洛芬、甲氧苄啶、枸橼酸喷托维林、磷酸苯丙哌林、醋酸地塞米松。
进一步的,所述标准溶液的配制方法如下:于市售购买各类化学成分的标准物质,烘干后分别准确称取10mg于10mL的容量瓶中,加入甲醇-乙腈(1:1,v/v)溶解后定容,配制成每种化学成分浓度均为1mg/mL的标准液,再将每种标准液取1mL至100mL的容量瓶中,配制成10μg/mL的混合标准溶液。
进一步的,所述样品液的配制方法如下:将待测中成药样品和30mL甲醇-乙腈(1:1)加入到50mL容量瓶中,超声溶解均匀后定容即可。
进一步的,所述测定方法具体如下:准确吸取样品液5-10mL于容量瓶中,流动相B定容摇匀,0.22μm滤膜滤过后上机,按如下梯度进行洗脱:
完成后再利用质谱进行正离子扫描,通过标准曲线外标法定量分析即可。
优选的,所述流动相B为0.02mol/L的乙酸铵溶液,pH值为4.2。
优选的,色谱条件具体为:使用WatersAtlanticT3柱(2mm×100mm,3μm),柱温32℃,进样量10μL。
优选的,质谱条件具体为:
(1)离子源:电离子喷雾正离子模式(ESI+);
(2)检测方式:多反应监测(MRM);
(3)电离电压:5500V;
(4)雾化气(GS1):高纯氮气50psi;辅助气(GS2):高纯氮气50psi;
(5)离子源:500℃。
本发明的优点是:
本发明检测方法在稀释样品时,采用类极性质子溶剂和级性非质子溶剂乙腈-甲醇,针对检测目标的多种化学成分极性和机构差异大的特点,能够大大减少干扰,提高回收率,同时简化了处理的过程和耗材,较常规薄层色谱法、高效液相法等检测周期更短、经济便捷。
本发明在梯度洗脱过程中使用pH为4.2的0.02mol/L乙酸铵溶液作为流动相B,能够改善目标成分峰的分叉及拖尾状况,配合乙腈的使用能够在短时间内完成目标成分理想的分离,较常规甲酸水、乙酸水等流动相峰形更为优化,缩短了检测时间。
本发明通过优化样品和标准品的处理过程,精确色谱质谱条件,实现了对中成药中多种添加的功能化学成分的检测,其样品仅需稀释过滤处理即可上机定性定量,大大简化了常规分散固相萃取等的繁琐步骤,同时其检测用时较短,耗材使用量较少,为中成药的质量检测提供有力的技术支持。
具体实施方式
以下结合具体的实例对本发明的技术方案做进一步说明:
实施例1
对中成药样品中萘丁美酮进行检测:
标准溶液的配制方法如下:于市售购买萘丁美酮的标准物质,烘干后准确称取10mg于10mL的容量瓶中,加入甲醇-乙腈(1:1,v/v)溶解后定容,配制成化学成分浓度为1mg/mL的标准液,再将标准液取1mL至100mL的容量瓶中,配制成10μg/mL的标准溶液。
样品液的配制方法如下:将待测中成药样品和30mL甲醇-乙腈(1:1)加入到50mL容量瓶中,超声溶解均匀后定容即可。
测定方法具体如下:准确吸取样品液5-10mL于容量瓶中,流动相B定容摇匀,0.22μm滤膜滤过后上机,按如下梯度进行洗脱:
完成后再利用质谱进行正离子扫描,通过标准曲线外标法定量分析。
其中,流动相B为0.02mol/L的乙酸铵溶液,pH值为4.2。
色谱条件具体为:使用WatersAtlanticT3柱(2mm×100mm,3μm),柱温32℃,进样量10μL。
质谱条件具体为:
(1)离子源:电离子喷雾正离子模式(ESI+);
(2)检测方式:多反应监测(MRM);
(3)电离电压:5500V;
(4)雾化气(GS1):高纯氮气50psi;辅助气(GS2):高纯氮气50psi;
(5)离子源:500℃。
所得萘丁美酮的线性方程为y=1.8e
实施例2
对中成药样品中磺胺甲噁唑、甲氧苄啶进行检测:
标准溶液的配制方法如下:于市售购买磺胺甲噁唑、甲氧苄啶的标准物质,烘干后分别准确称取10mg于10mL的容量瓶中,加入甲醇-乙腈(1:1,v/v)溶解后定容,配制成每种化学成分浓度为1mg/mL的标准液,再将每种标准液取1mL至100mL的容量瓶中,配制成10μg/mL的混合标准溶液。
样品液的配制方法如下:将待测中成药样品和30mL甲醇-乙腈(1:1)加入到50mL容量瓶中,超声溶解均匀后定容即可。
测定方法具体如下:准确吸取样品液5-10mL于容量瓶中,流动相B定容摇匀,0.22μm滤膜滤过后上机,按如下梯度进行洗脱:
完成后再利用质谱进行正离子扫描,通过标准曲线外标法定量分析。
其中,流动相B为0.02mol/L的乙酸铵溶液,pH值为4.2。
色谱条件具体为:使用WatersAtlanticT3柱(2mm×100mm,3μm),柱温32℃,进样量10μL。
质谱条件具体为:
(1)离子源:电离子喷雾正离子模式(ESI+);
(2)检测方式:多反应监测(MRM);
(3)电离电压:5500V;
(4)雾化气(GS1):高纯氮气50psi;辅助气(GS2):高纯氮气50psi;
(5)离子源:500℃。
所得磺胺甲噁唑的线性方程为y=374x+4.44e
所得甲氧苄啶的线性方程为y=446x+5.55e
实施例3
对中成药样品中对乙酰氨基酚、酮洛芬、磷酸苯丙哌林进行检测:
标准溶液的配制方法如下:于市售购买对乙酰氨基酚、酮洛芬、磷酸苯丙哌林的标准物质,烘干后分别准确称取10mg于10mL的容量瓶中,加入甲醇-乙腈(1:1,v/v)溶解后定容,配制成每种化学成分浓度为1mg/mL的标准液,再将每种标准液取1mL至100mL的容量瓶中,配制成10μg/mL的混合标准溶液。
样品液的配制方法如下:将待测中成药样品和30mL甲醇-乙腈(1:1)加入到50mL容量瓶中,超声溶解均匀后定容即可。
测定方法具体如下:准确吸取样品液5-10mL于容量瓶中,流动相B定容摇匀,0.22μm滤膜滤过后上机,按如下梯度进行洗脱:
完成后再利用质谱进行正离子扫描,通过标准曲线外标法定量分析。
其中,流动相B为0.02mol/L的乙酸铵溶液,pH值为4.2。
色谱条件具体为:使用WatersAtlanticT3柱(2mm×100mm,3μm),柱温32℃,进样量10μL。
质谱条件具体为:
(1)离子源:电离子喷雾正离子模式(ESI+);
(2)检测方式:多反应监测(MRM);
(3)电离电压:5500V;
(4)雾化气(GS1):高纯氮气50psi;辅助气(GS2):高纯氮气50psi;
(5)离子源:500℃。
所得对乙酰氨基酚的线性方程为y=553x+3.81e
所得酮洛芬的线性方程为y=133x+810,相关系数(R
所得磷酸苯丙哌林的线性方程为y=3.75e
以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,对于本领域的技术人员来说,本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
机译: 速溶中成药成分速溶丸中没食子酸的检测方法
机译: 制备至少一种聚合物熔丝的添加剂的方法,该聚合物熔剂的合并点在当年大于1000 OC,并且任选地,一种或多种聚合物添加剂的合并点在水性介质中具有最高的分散性,将原始分散剂的成分封装在水性介质中一种将一种或多种添加剂分散到聚合物熔丝和聚苯胺树脂中的方法
机译: 一种治疗肾功能疾病和健康的外用中成药组合物及其在制备CATAPLASM中的应用