脊髓性肌萎缩症的预防剂或治疗剂

摘要

根据本发明的脊髓性肌萎缩症的预防剂或治疗剂包括由式(I)表示的化合物或其盐：[化学式1]其中：W1、W2和W3各自独立地选自由以下组成的组：C‑R2、C‑R3、C‑Rc和C‑Rd，并且由以下(i)至(iv)之一限定：(i)当W3为C‑R2时，则W1为C‑R3，W2为C‑Rc或N，并且R1为氢原子；(ii)当W3为C‑R3时，则W1为C‑R2，W2为C‑Rc或N，并且R1为氢原子、C1–8烷基或C1–8烷氧基；(iii)当W1为C‑R2时，则W2为C‑Rc或N，W3为C‑Rd，并且R1为含有一个或多个氮原子的脂肪族杂环，所述脂肪族杂环任选地被非芳族取代基取代；以及(iv)当W2为C‑R2时，W1为C‑Rc，W3为C‑Rd，并且R1为含有一个或多个氮原子的脂肪族杂环，所述脂肪族杂环任选地被非芳族取代基取代；R2为任选地被非芳族取代基取代的6元或更多元芳环；R3为含有一个或多个氮原子的脂肪族杂环，所述脂肪族杂环任选地被非芳族取代基取代；Q1选自C‑Ra和N；Q2选自C‑Rb和N；以及Ra、Rb、Rc和Rd各自独立地选自由以下组成的组：氢原子、卤素、C1–8烷基、C1–8烷氧基和氰基。

说明书

技术领域

本发明涉及脊髓性肌萎缩症的预防剂或治疗剂。

背景技术

脊髓性肌萎缩症(SMA)是由脊髓前角细胞退化引起的神经肌肉萎缩。其为常染色体隐性遗传病症，其致病基因位于5号染色体上。

已知SMA的致病基因是存活运动神经元1(SMN1)基因，其位于染色体5q13d上。SMA在对于使该基因失活的突变(诸如无效突变或缺失突变)为纯合的个体中发展。

染色体5q13d还包含SMN2基因，其为SMN1基因的倒转复制，在外显子7中的核苷酸位置6处具有C至T的突变。虽然这种突变是不涉及任何氨基酸取代的核苷酸变化，但其更容易引起除外显子7外的选择性剪接事件。结果，约90％的由SMN2基因产生的蛋白质功能较差，而约10％是与由SMN1基因产生的蛋白质相同的具有其正常功能的蛋白质。因此，即使在SMN2基因存在的情况下，SMN1基因功能的丧失也会导致具有其正常功能的蛋白质的量显著减少，从而导致SMA的发作。

SMN2基因的拷贝数因SMA患者而异；已知那些拷贝数较高的患者呈现轻微的症状。因此，认为增加具有其正常功能的蛋白质的量将引起对SMA的治疗。

最近开发了调节SMN2 mRNA的剪接的反义化合物(参见，例如，WO2010/148249)。该反义化合物调节SMN2剪接，使得其正常进行，从而增加具有其正常功能的蛋白质的量，以改善SMA症状。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：未经审查的专利申请公布第WO2010/148249号

发明内容

本发明要解决的问题

本发明的目的是提供脊髓性肌萎缩症的预防剂或治疗剂。

解决问题的方式

本发明的方面是化合物或其盐，所述化合物由式(I)表示：

[化学式1]

其中：

W

(i)当W

(ii)当W

(iii)当W

(iv)当W

R

R

Q

Q

R

在式(I)中，R

(I)卤素；

(II)氰基；

(III)硝基；

(IV)任选地被C

(a)卤素；

(b)氰基；

(c)硝基；

(d)C

(e)C

(f)C

(V)任选地被C1–6烷基或C1–10环烷基取代的氨基，所述C1–6烷基或C1–10环烷基任选地被1至5个选自由以下组成的组的取代基取代：

(a)卤素；

(b)氰基；

(c)硝基；

(d)C

(e)C

(f)C

(VI)任选地被1至5个选自由以下组成的组的取代基取代的C1–6烷基或C1–10环烷基：

(a)卤素；

(b)氰基；

(c)硝基；

(d)C

(e)C

(f)C

由式(I)表示的化合物可以是2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮。

本发明的另一方面是一种药剂，其包含上述化合中物中的任一种或其盐作为活性成分。该药剂可以是剪接调节剂，可以是增强正常SMN mRNA和/或正常SMN蛋白的表达的表达增强剂，或者可以是脊髓性肌萎缩症的预防剂或治疗剂。

本发明的又一方面是剪接调节剂、增强正常SMN mRNA和/或正常SMN蛋白的表达的表达增强剂、或脊髓性肌萎缩症的预防剂或治疗剂，其包含上述化合物中的任一种或其盐作为活性成分。

本发明的又一另外方面是脊髓性肌萎缩症的预防性或治疗性治疗方法，所述方法包括：向患有脊髓性肌萎缩症的哺乳动物(人类除外)施用有效量的上述化合物中的任一种或其盐。

本发明的又一另外方面是用于脊髓性肌萎缩症的预防性或治疗性治疗的上述化合物中的任一种或其盐。

本发明的又一另外方面是上述化合物中的任一种或其盐用于制造脊髓性肌萎缩症的预防剂或治疗剂的用途。

本发明的又一方面是检查化合物或其盐是否增强正常SMN mRNA和/或正常SMN蛋白的表达的方法，所述化合物由式(I)表示：

[化学式1]

其中：

W

(i)当W

(ii)当W

(iii)当W

(iv)当W

R

R

Q

Q

R

与相关文献的交叉引用

本申请根据2008年6月27日提交的日本专利申请第2018-122551号要求优先权，所述基础申请在此通过引用并入本说明书。

附图说明

图1是本发明的工作实施例中使用的寡DNA标准物的核苷酸序列的图示。

图2是用于在本发明的工作实施例中使用的PCR的引物和探针的核苷酸序列的图示。(A)用于检测包含连续的SMN的外显子7和外显子8的FL-SMN的PCR的引物和探针；和(B)用于检测跳过外显子7的SMN的Δ7的PCR的引物和探针。

图3是显示在本发明的工作实施例中，特异性检测具有外显子7的FL-SMN和不具外显子7的Δ7的cDNA的qPCR系统的原理的示意图。(A)基因组上SMN2基因的结构；(B)检测FL-SMN cDNA的机制；(C)使用FL-SMN寡DNA标准物生成的校准曲线；(D)检测Δ7cDNA的机制，和(E)使用Δ7寡DNA标准物生成的校准曲线。

图4显示了本发明的工作实施例中的使用GAPDH寡DNA标准物生成的校准曲线。

图5-1是显示本发明工作实施例中的针对代表性化合物的FL-SMN mRNA和Δ7mRNA的量的剂量依赖性变化和SMN蛋白的增加的图示。y轴代表相对于它们各自对照(加入了DMSO)的针对GAPDH标准化的FL-SMN mRNA和Δ7mRNA的表达水平或针对GAPDH标准化的SMN蛋白的表达水平的百分比，将所述对照的表达水平设定为100％，x轴代表化合物的浓度；

图5-2是图5-1的接续。

图5-3是图5-2的接续。

图5-4是图5-3的接续。

具体实施方式

根据本说明书的描述，本发明的目的、特征、有利方面和思想对于本领域技术人员来说是显而易见的，并且本领域技术人员可以容易地根据本说明书的描述再现本发明。下面描述的本发明的实施方案、其具体实例等表示本发明的优选实施方案，并且被描述来用于示例或解释。本发明不限于此。对于本领域的技术人员来说显而易见的是，在本说明书公开的本发明精神的意图和范围内，可基于本说明书的描述进行各种改变和修改。

[化合物]

根据本发明的实施方案的化合物是由式(I)表示的化合物或其盐：

[化学式1]

其中：

W

(i)当W

(ii)当W

(iii)当W

(iv)当W

R

R

Q

Q

R

在式(I)中，R

(I)卤素；

(II)氰基；

(III)硝基；

(IV)任选地被C

(a)卤素；

(b)氰基；

(c)硝基；

(d)C

(e)C

(f)C

(V)任选地被C1–6烷基或C1–10环烷基取代的氨基，所述C1–6烷基或C1–10环烷基任选地被1-5个选自由以下组成的组的取代基取代：

(a)卤素；

(b)氰基；

(c)硝基；

(d)C

(e)C

(f)C

(VI)任选地被1至5个选自由以下组成的组的取代基取代的C1–6烷基或C1–10环烷基：

(a)卤素；

(b)氰基；

(c)硝基；

(d)C

(e)C

(f)C

通式(I)表示的各化合物的盐可以是任何类型，并且实例包括酸式盐、金属盐和铵盐。酸式盐可以是多种类型中的任一种，并且实例包括无机酸盐诸如盐酸盐、硫酸盐和磷酸盐；以及有机酸盐诸如乙酸盐、马来酸盐、富马酸盐、酒石酸盐和柠檬酸盐。金属盐可以是多种类型中的任一种，并且实例包括碱金属盐诸如钠盐和钾盐；碱土金属盐诸如钙盐和镁盐、铝盐以及锌盐。当具有通式(I)的分子是异构体诸如光学异构体、立体异构体、构造异构体或旋光异构体时，它们各自及其混合物也涵盖于通式(I)表示的化合物中。

例如，当通式(I)表示的化合物作为对映异构体存在时，从外消旋混合物/外消旋化合物中分离的它们中的每一种对映异构体也涵盖于通式(I)表示的化合物中。可使用已知的合成方法或分离方法(例如，浓缩、溶剂萃取、柱色谱或重结晶)将这些异构体中的每一种作为单一化合物来产生。

通式(I)表示的化合物可呈晶体形式；呈单晶或混合晶体形式的两种化合物也涵盖于通式(I)表示的化合物中。晶体可通过使用已知的结晶技术将化合物结晶来制备。

通式(I)表示的化合物可呈药学上可接受的共晶或盐共晶的形式。共晶和盐共晶可以使用已知的共结晶技术来制备。用于共晶或盐共晶的通式(I)表示的化合物的共形成物(Coformer)可以是例如酸(例如，羧酸、磷酸、糖酸和磺酸)、酰胺、尿素、碱、麦芽醇和氨基酸。羧酸的合适实例包括富马酸、柠檬酸、戊二酸、丙二酸、琥珀酸、马来酸、苹果酸、酒石酸、扁桃酸、乳酸、葡萄糖酸、乙酸、苯甲酸、龙胆酸、水杨酸和马尿酸。糖酸的合适实例包括抗坏血酸。磺酸的合适实例包括2-萘磺酸、10-樟脑磺酸和甲磺酸。酰胺的合适实例包括烟酰胺、苯甲酰胺、乳酰胺、羟基乙酰胺和糖精。碱的合适实例包括氨丁三醇和葡甲胺。麦芽醇的合适实例包括乙基麦芽醇。氨基酸的合适实例包括酪氨酸、丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、精氨酸、赖氨酸、脯氨酸、色氨酸、缬氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、甘氨酸、天冬酰胺、甲硫氨酸、半胱氨酸、苯丙氨酸、谷氨酰胺和组氨酸。

通式(I)表示的化合物可呈水合物、脱水物、溶剂合物或非溶剂合物的形式。

通式(I)表示的化合物可用同位素(例如，

通式(I)表示的化合物可以是前药。如本文中所用，术语“前药”是指在体内生理条件下，由于例如酶或胃酸的作用，通过体内反应(诸如氧化、还原或水解)而转化为通式(I)表示的相应化合物的化合物。通式(I)表示的化合物的前药的实例包括作为通式(I)表示的化合物的对应物的化合物，它们的氨基通过酰化、烷基化或磷酸化进行了修饰(例如，作为通式(I)表示的化合物的对应物的化合物，它们的氨基通过二十碳酰化、丙氨酰化(alanylation)、戊基氨基羰基化、(5-甲基-2-氧代-1,3-二氧杂环戊烯-4-基)甲氧基羰基化、四氢呋喃基化、吡咯烷基甲基化、新戊酰氧基甲基化或叔丁基化进行了修饰)；作为通式(I)表示的化合物的对应物的化合物，它们的羟基通过酰化、烷基化、磷酸化或硼基化进行了修饰(例如，作为化合物(I)的对应物的化合物，它们的羟基通过乙酰化、棕榈酰化、丙酰化、新戊酰化、琥珀酰化、富马酰化(fumarylation)、丙氨酰化或二甲基氨基甲基羰基化进行了修饰)；作为通式(I)表示的化合物的对应物的化合物，它们的羧基通过酯化或酰胺化进行了修饰(例如，作为化合物(I)的对应物的化合物，它们的羧基通过乙基酯化、苯基酯化、羧甲基酯化、二甲氨基甲基酯化、新戊酰氧基甲基酯化、乙氧基羰基氧基乙基酯化、邻苯二甲酰酯化、(5-甲基-2-氧代-1,3-二氧杂环戊烯-4-基)甲基酯化、环己酰氧基羰基乙基酯化或甲基酰胺化进行了修饰)。这些化合物中的每一种都可使用已知的方法从通式(I)表示的化合物制备。

通式(I)表示的化合物的前药可以是在生理条件下转化为通式(I)表示的相应化合物的类型，如"Pharmaceutical research and development,”第7卷，MolecularDesign，第163–198页，Hirokawa Publishing Co.(1990)中所描述的。

[用于产生化合物的方法]

下面描述用于产生上述化合物的方法。

以下生产方法的每个阶段中的起始材料、试剂和所得化合物可呈它们的盐的形式。这种盐的实例包括上文针对根据本发明的化合物所列举的那些实例。

当在某一阶段获得的化合物以其游离状态存在时，可使用已知的方法将其转化为所需的盐。相反，当在某一阶段获得的化合物为盐时，可使用已知的方法将其转化成其相应的游离形式或另一种类型的所需的盐。

在每个阶段中获得的一种或多种化合物可在随后的一个或多个反应中作为反应溶液本身使用，或者在部分或完全纯化后使用。可使用任何纯化技术，并且实例包括浓缩、结晶、重结晶、蒸馏、溶剂萃取、分馏、色谱及其组合。

除非另有说明，否则下列反应方案中使用的符号表示与上述化合物中的基团相同的基团。起始化合物在商业产品中很容易获得，或者当未提到具体的产生方法时，可使用已知的方法来产生。

每个阶段的反应时间可取决于所用的一种或多种试剂和/或一种或多种溶剂；然而，除非另有说明，否则其通常为1分钟至48小时，并且优选10分钟至8小时。

每个阶段的反应温度可取决于所用的一种或多种试剂和/或一种或多种溶剂；然而，除非另有说明，否则其通常为-78℃至300℃，并且优选为-78℃至150℃。

每个阶段的压力可取决于所用的一种或多种试剂和/或一种或多种溶剂；然而，除非另有说明，否则其通常为1个大气压至20个大气压，并且优选为1个大气压至3个大气压。

可在一个或多个阶段中使用微波合成仪，诸如由Biotage制造的引发器合成仪(Initiator synthesizer)。反应温度可取决于所用的一种或多种试剂和/或一种或多种溶剂；然而，除非另有说明，否则其通常为室温至300℃，并且优选为50℃至250℃。反应时间可取决于所用的一种或多种试剂和/或一种或多种溶剂；然而，除非另有说明，否则其通常为1分钟至48小时，并且优选为1分钟至8小时。

在所有阶段的反应中，除非另有说明，否则所用试剂的量相对于底物为0.5至20当量，并且优选为0.8至5当量。当试剂为催化剂时，相对于底物，所用试剂的量为0.001至1当量，并且优选为0.01至0.2当量。当试剂也用作反应溶剂时，试剂的量与溶剂的量相同。

在每个阶段中，除非另有说明，否则化合物在溶剂不存在的情况下进行反应或者在其中溶解或悬浮有一种或多种化合物的合适溶剂中进行反应。除了实施例中描述的那些实例之外，溶剂的具体实例包括下列化合物。

醇类：例如，甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、1-丁醇、1-丁醇、2-甲基-1-丙醇、2-甲基-2-丙醇、1-戊醇、3-甲基-1-丁醇、2-甲基-2-丁醇和2-甲氧基乙醇。

醚类：例如，二乙醚、二苯醚、四氢呋喃、1,2-二甲氧基乙烷和环戊基甲醚。

芳香烃：例如，苯、氯苯、甲苯和二甲苯。

饱和烃：例如，环己烷和己烷。

酰胺类：例如，N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺和N-甲基吡咯烷酮。

卤代烃：例如，二氯甲烷和四氯化碳。

腈类：例如，乙腈。

亚砜：例如，二甲基亚砜。

芳香族有机碱：例如，吡啶。

酸酐：例如，乙酸酐。

有机酸：例如，甲酸、乙酸和三氟乙酸。

无机酸：例如，盐酸和硫酸。

酯类：例如，乙酸乙酯。

酮类：例如，丙酮和甲基乙基酮。

水。

可以以适当的比例混合上述溶剂中的两种或更多种。

在某一阶段的化学反应中使用碱的情况下，除了实施例中描述的那些实例以外，所使用的碱的实例还包括下列化合物。

无机碱：例如，氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、氢氧化镁和氢氧化铯。

碱性碱：例如，碳酸锂、碳酸钠、碳酸钾、碳酸钙、碳酸铯、碳酸氢钠和碳酸氢钾。

有机碱：例如，三乙胺、二乙胺、吡啶、4-二甲基氨基吡啶、N,N-二甲基苯胺、1,4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷、1,8-二氮杂双环[5.4.0]-7-十一碳烯、咪唑和哌啶。

金属醇盐：例如，甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠和叔丁醇钾。

碱金属氢化物：例如，氢化钠和氢化钾。

金属酰胺化物：例如，酰胺化锂、二异丙基酰胺化锂、六甲基二硅氮烷基化锂(lithium hexamethyldisilazide)、酰胺化钠、二异丙基酰胺化锂、六甲基二硅氮烷基化钠、酰胺化钾、二异丙基酰胺化钾和六甲基二硅氮烷基化钾。

有机锂化合物：例如，正丁基锂、仲丁基锂和叔丁基锂。

在于某一阶段的化学反应中使用酸或酸性催化剂的情况下，除了工作实施例中描述的那些实例以外，可使用的酸和酸性催化剂的实例还包括下列化合物。

无机酸：例如，盐酸、硫酸、硝酸、氢溴酸和磷酸。

有机酸：例如，乙酸、三氟乙酸、柠檬酸、对甲苯磺酸和10-樟脑磺酸。

路易斯酸：例如,三氟化硼二乙基醚络合物(boron trifluoride diethyl ethercomplex)、碘化锌、无水氯化铝、无水氯化锌和无水氯化铁。

除非另有说明，否则每个阶段的一个或多个化学反应都是根据已知的方法进行的，所述方法为诸如例如以下文献中描述的方法："The Fifth Series of ExperimentalChemistry,"第13–19卷(The Chemical Society of Japan编辑)；"Shin Jikken KagakuKoza,"第14–15卷(The Chemical Society of Japan编辑)；"Seimitsu Yuki Kagaku(Reactions and Syntheses:In the Organic Chemistry Laboratory),”第2次修订，(L.F.Tietze&Th.Eicher,Nankodo Co.,Ltd.)；"Organic Name Reactions；The ReactionMechanism and Essence"(Hideo Togo,KODANSHA LTD.)；ORGANIC SYNTHESES.Collective第I–VII卷(John Wiley&Sons Inc.)；Modern Organic Synthesis in the Laboratory:ACollection of Standard Experimental Procedures(Li,Jie Jack,OXFORD UNIVERSITYPRESS)；Comprehensive Heterocyclic Chemistry III，第1–14卷(Elsevier Japan)；Strategic Applications of Named Reactions in Organic Synthesis(由KiyoshiTomioka等人翻译,Kagaku-Dojin Publishing Company,INC.)；或Comprehensive OrganicTransformations(VCH Publishers Inc.),1989，或者本说明书中的工作实施例中描述的方法。

在相应阶段中，用官能团保护和/或去保护根据已知方法进行，所述方法为诸如例如"Protective Groups in Organic Synthesis，第4版",Wiley-Interscience,2007(Theodora W.Greene,Peter G.M.Wuts)和"Protecting Groups第3版"Thieme,2004(P.J.Kocienski)中描述的方法，或者本说明书的工作实施例中描述的方法。

醇或其它化合物中的羟基和酚羟基的保护基团的实例包括醚保护基团，诸如甲氧基甲基醚、苄基醚、叔丁基二甲基甲硅烷基醚和四氢吡喃基醚；羧酸酯保护基团，诸如乙酸酯；磺酸酯保护基团，诸如甲磺酸酯；和碳酸酯保护基团，诸如碳酸叔丁酯。醛中羰基的保护基团的实例包括缩醛保护基团，诸如二甲基缩醛；和环状缩醛保护基团，诸如环状1,3-二噁烷。酮中羰基的保护基团的实例包括缩酮保护基团，诸如二甲基缩酮；环状缩酮保护基团，诸如环状1,3-二噁烷；肟保护基团，诸如邻甲基肟；和腙保护基团，诸如N,N-二甲基腙。羧基保护基团的实例包括酯保护基团，诸如甲酯；和酰胺保护基团，诸如N,N-二甲基酰胺。硫醇保护基团的实例包括醚保护基团，诸如苄基硫醚；和酯保护基团，诸如硫代乙酸酯、硫代羧酸和硫代氨基甲酸酯。氨基和芳香族杂环(诸如咪唑、吡咯和吲哚)的保护基团的实例包括氨基甲酸酯保护基团，诸如氨基甲酸苄酯；酰胺保护基团，诸如乙酰胺；烷基胺保护基团，诸如N-三苯基甲胺；和磺酰胺保护基团，诸如甲磺酰胺。

保护基团可根据已知的方法除去，所述方法为诸如涉及使用酸、碱、紫外线辐射、肼、苯肼、N-甲基二硫代氨基甲酸钠、氟化四丁基铵、乙酸钯、三烷基甲硅烷基卤化物(例如，三甲基甲硅烷基碘化物和三甲基甲硅烷基溴化物)的方法或还原方法。

在化合物在某一阶段经历还原的情况下，所用还原剂的实例包括金属氢化物，诸如氢化铝锂、三乙酰氧基硼氢化钠、氰基三氢硼酸钠、氢化二异丁基铝(DIBAL-H)、硼氢化钠和三乙酰氧基硼氢化四甲铵；硼烷，诸如硼烷四氢呋喃络合物；雷尼镍(Raney nickel)；雷尼钴；氢；和甲酸。当碳-碳双键或三键被还原时，可使用涉及使用催化剂诸如钯碳(palladium on carbon)或Lindlar催化剂的方法。

在化合物在某一阶段经历氧化的情况下，所用氧化剂的实例包括过氧化物，诸如间氯过苯甲酸(mCPBA)、过氧化氢和叔丁基过氧化氢；高氯酸盐，诸如高氯酸四丁基铵；氯酸盐，诸如氯酸钠；亚氯酸盐，诸如亚氯酸钠；高碘酸，诸如高碘酸钠；高价碘试剂，诸如亚碘酰苯(iodosylbenzene)；含锰试剂，诸如二氧化锰和高锰酸钾；铅化合物，诸如四乙酸铅；含铬试剂，诸如氯铬酸吡啶鎓(PCC)、重铬酸吡啶鎓(PDC)和琼斯试剂(Jones reagent)；卤素化合物，诸如N-溴琥珀酰亚胺(NBS)；氧；臭氧；三氧化硫-吡啶络合物；四氧化锇；二氧化硒；和2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌(DDQ)。

在化合物在某一阶段经历芳族亲核取代(S

在化合物在某一阶段使用碳负离子经历亲核加成、使用碳负离子经历亲核1,4-加成(Michael加成)或使用碳负离子经历亲核取代的情况下，用于生成碳负离子的碱的实例包括有机锂化合物、金属醇盐、无机碱和有机碱。

在化合物在某一阶段经历还原胺化的情况下，所用还原剂的实例包括三乙酰氧基硼氢化钠、氰基三氢硼酸钠、硼烷-2-甲基吡啶络合物、氢和甲酸。当底物是胺化合物时，所用羰基化合物或其等同物的实例包括多聚甲醛和甲醛溶液，以及醛等同物诸如(1-乙氧基环丙氧基)三甲基硅烷，醛类诸如乙醛，和酮类诸如环己酮。当底物是羰基化合物时，所用胺的实例包括氨、伯胺诸如甲胺和仲胺诸如二甲胺。

在化合物在某一阶段经历酯化、酰胺化或脲化(ureation)的情况下，所用试剂的实例包括酰基卤，诸如酰氯和酰溴；和活化羧酸，诸如酸酐、活化酯和硫酸酯。羧酸活化剂的实例包括碳二亚胺缩合剂，诸如1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(WSCD)；三嗪缩合剂，诸如4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)-4-甲基吗啉氯化物n-水合物(DMT-MM)；碳酸酯缩合剂，诸如1,1-羰基二咪唑(CDI)；二苯基磷酰基叠氮化物(DPPA)；苯并三唑-1-基氧基-三二甲基氨基鏻盐(BOP试剂)；2-氯-1-甲基-碘化吡啶鎓(Mukaiyama试剂)；亚硫酰氯；低级烷基卤代甲酸酯，诸如氯甲酸乙酯；六氟磷酸O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲(HATU)；丙基膦酸酐(T3P)；硫酸；及其组合。当使用碳二亚胺缩合剂时，可向反应中进一步加入添加剂，诸如1-羟基苯并三唑(HOBt)、N-羟基琥珀酰亚胺(HOSu)或二甲基氨基吡啶(DMAP)。

在化合物在某一阶段经历偶联(例如，Suzuki-Miyaura偶联、Still偶联、Buchwald-Hartwing交叉偶联、Negishi偶联或Heck反应)的情况下，所用金属催化剂的实例包括钯化合物，诸如乙酸钯(II)、四(三苯基膦)钯(0)、二氯双(三苯基膦)钯(II)、二氯双(三乙基膦)钯(II)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)和氯化[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁)氯化钯(II)；镍化合物，诸如四(三苯基膦)镍(0)；铑化合物，诸如三(三苯基膦)氯化铑(III)；钴化合物；铜化合物，诸如氧化铜和碘化铜(I)；和铂化合物。可进一步向反应中加入碱，并且这种碱的实例包括无机碱和碱性盐。

在芳环在某一阶段被卤化的情况下，所用卤化剂的实例包括N-碘代琥珀酰亚胺、N-溴代琥珀酰亚胺(ΝBS)、N-氯代琥珀酰亚胺(ΝCS)、溴和磺酰氯。另外，可通过加热或光照或向反应中加入自由基引发剂诸如过氧化苯甲酰或偶氮二异丁腈来加速反应。

在化合物在某一阶段经历水解的情况下，使用酸或碱作为试剂。对于叔丁基酯的酸水解，可加入甲酸或三乙基硅烷来还原捕获作为副产物产生的叔丁基阳离子。

在化合物在某一阶段经历脱水的情况下，所用脱水剂的实例包括硫酸、五氧化二磷、三氯氧磷、N,N'-二环己基碳二亚胺、氧化铝和多磷酸。

在相应阶段中使用的离去基团的实例包括羟基、卤素原子(例如，氟原子、氯原子、溴原子和碘原子)、C

下面描述用于产生通式(I)表示的化合物的方法。通式(I)表示的化合物的终产物可被制备为单一化合物或混合化合物。

除非另有说明，否则下列反应方案中使用的符号表示与上述化合物中的基团相同的基团。起始化合物在商业产品中很容易获得，或者当未提及具体的产生方法时，可使用已知方法或其改进形式来产生。

取决于起始化合物的取代基的类型，根据以下产生方法之一产生的化合物可用作起始材料，以通过应用已知的方法产生具有不同取代基的起始化合物。

[产生方法1]

通式(Ia)表示的化合物，对应于其中W

[化学式2]

在式中，Y

P

R

Q

通式(Ia)表示的化合物可通过在氧化剂(例如，碘、氧、二氧化锰、高锰酸钾、过氧化氢、氢过氧化物、N-溴琥珀酰亚胺、N-碘琥珀酰亚胺、2,3-二氯-5,6-二氰基-对苯醌、亚硫酸氢钠、氯化铜(II)、氯化铁(III)、钯)存在的情况下，使用通式(IVa)表示的化合物和通式(Va)表示的化合物或通式(Va)表示的另一种含有醛等同物(例如，二甲氧基缩醛或二乙氧基缩醛)作为替代醛的官能团的化合物进行氧化环化来产生。氧化环化可以在酸(例如，对甲苯磺酸)存在的情况下进行。

通式(Va)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(Ia)表示的化合物也可通过用通式(VIIIa)表示的化合物使通式(IVa)表示的化合物酰胺化，然后使用碱(例如，氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、甲醇钠或乙醇钠)进行环化来产生。

通式(VIIIa)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(IVa)表示的化合物可通过通式(IIa)表示的化合物与通式(IIIa)表示的化合物的已知偶联反应以及随后的去保护来合成。偶联反应可以是例如Suzuki偶联、Stille偶联、Buchwald-Hartwig偶联、Negishi偶联或Heck反应。可根据已知的方法(例如，Copper-Mediated Cross-Coupling Reactions,G.Evano,N,Blanchard,编辑,John Wiley&Sons,Inc.(2014)中；Metal-Catalyzed Cross-Coupling Reactions and More,A.de Meijere,S.Brase,M.Oestreich,编辑,Wiley-VCH Verlag GmbH&Co.KGaA(2014)中；Palladium-Catalyzed Coupling Reactions:Practical Aspects and Future Developments,A.Molnar，编辑，Wiley-VCH Verlag GmbH&Co.KGaA(2013)中；The Chemistry ofAnilines,Z.Rappoport，编辑，John Wiley&Sons,Ltd(2007)中；Metal-Catalyzed Cross-Coupling Reactions，第2版，A.de Meijere,F.Diederich，编辑，Wiley-VCH Verlag GmbH&Co.KGaA(2004)中；Handbook of Organopalladium Chemistry for Organic Synthesis,E.Negishi,A.de Meijere，编辑，John Wiley&Sons,Inc.(2002)中；Modern AminationMethods,A.Ricci，编辑，Wiley-VCH Verlag GmbH(2000)中；Metal-Catalyzed Cross-Coupling Reactions,F.Diederich,P.J.Stang，编辑，Wiley-VCH Verlag GmbH(1998)(具有或不具有适当的修改)中描述的方法)使用诸如金属催化剂、膦配体和碱等试剂。

通式(IVa)表示的化合物还可通过从通式(IIa)表示的化合物中除去保护基团，然后与通式(IIIa)表示的化合物偶联来合成。

通式(IIa)表示的化合物和通式(IIIa)表示的化合物可使用已知方法产生。

通式(Ia)表示的化合物还可通过在氧化剂以及氨或氨等同物(例如，乙酸铵或氯化铵)存在的情况下，使用通式(VIIa)表示的化合物和通式(Va)表示的化合物或通式(Va)表示的另一种含有醛等同物(例如二甲氧基缩醛或二乙氧基缩醛)作为替代醛的官能团的化合物进行氧化环化来产生。

通式(Ia)表示的化合物还可通过用通式(VIIIa)表示的化合物使通式(VIIa)表示的化合物酰胺化，然后在氨或氨等同物(例如，乙酸铵或氯化铵)存在的情况下，使用碱进行环化来产生。

通式(VIIa)表示的化合物可通过将通式(VIa)表示的化合物与通式(IIIa)表示的化合物偶联并随后去保护来合成。

通式(VIIa)表示的化合物还可通过从通式(VIa)表示的化合物中除去保护基团，然后与通式(IIIa)表示的化合物偶联来合成。

通式(Ia)表示的化合物还可由通式(Ia)表示的另一种化合物产生。

通式(IVa)表示的化合物还可通过已知的转化反应由通式(IVa)表示的另一种化合物产生。

通式(VIIa)表示的化合物还可通过已知的转化反应由通式(VIIa)表示的另一种化合物产生。

通式(IVa)表示的化合物和通式(VIIa)表示的那些化合物还可根据以下产生方案或其改进方案由通式(IX)或(XI)表示的化合物产生。

[化学式3]

(在式中，X为离去基团，并且所有符号表示与上述的基团相同的基团。)

通式(IVa)表示的化合物还可通过还原(例如，使用金属催化剂的氢化)通式(Xa)表示的化合物来产生。

通式(Xa)表示的化合物可通过通式(IX)表示的化合物与具有亲核官能团的R

通式(IX)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(VIIa)表示的化合物还可通过还原(例如，使用金属催化剂氢化)通式(XIIa)表示的化合物来产生。

通式(XIIa)表示的化合物可通过通式(XI)表示的化合物与具有亲核官能团的R

通式(XI)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(Xa)表示的化合物还可通过已知的转化反应由通式(Xa)表示的另一种化合物产生。

通式(XIIa)表示的化合物还可通过已知的转化反应由通式(XIIa)表示的另一种化合物产生。

通式(Xa)表示的化合物还可通过已知的转化反应由通式(XIIa)表示的化合物产生。

[产生方法2]

通式(Ia)表示的化合物，对应于其中W

[化学式4]

(式中的符号表示与上述基团相同的基团。)

通式(Ia)表示的化合物还可通过将通式(XIVa)表示的化合物与通式(IIIa)表示的化合物偶联来产生。

通式(IIIa)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(XIVa)表示的化合物可通过在氧化剂存在的情况下，使用通式(XIIIa)表示的化合物和通式(Va)表示的化合物进行氧化环化来产生。氧化环化可以在酸(例如，对甲苯磺酸)存在的情况下进行。

通式(XIIIa)表示的化合物和通式(Va)表示的化合物可使用已知方法来产生。

通式(XIVa)表示的化合物也可通过用通式(VIIIa)表示的化合物使通式(XIIIa)表示的化合物酰胺化，然后用碱进行环化来制备。

通式(VIIIa)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(XIVa)表示的化合物也可通过在氧化剂以及氨或氨等同物(例如，乙酸铵或氯化铵)存在的情况下，使用通式(XVa)表示的化合物和通式(Va)表示的化合物或通式(Va)表示的另一种含有醛等同物(例如，二甲氧基缩醛或二乙氧基缩醛)作为替代醛的官能团的化合物，进行氧化环化来产生。

通式(XIVa)表示的化合物还可通过用通式(VIIIa)表示的化合物使通式(XVa)表示的化合物酰胺化，然后在氨等同物(例如，乙酸铵或氯化铵)存在的情况下使用碱进行环化来产生。

通式(XVa)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(XIVa)表示的化合物还可通过已知的转化反应由通式(XIVa)表示的另一种化合物产生。

通式(Ia)表示的化合物还可通过已知的转化反应由通式(Ia)表示的另一种化合物产生。

[产生方法3]

通式(Ib)表示的化合物，对应于其中W

[化学式5]

(式中的符号表示与上述基团相同的基团。)

通式(Ib)表示的化合物可通过在氧化剂存在的情况下，使用通式(IVb)表示的化合物和通式(Vb)表示的化合物或通式(Vb)表示的另一种含有醛等同物(例如，二甲氧基缩醛或二乙氧基缩醛)作为替代醛的官能团的化合物进行氧化环化来产生。氧化环化可以在酸(例如，对甲苯磺酸)存在的情况下进行。

通式(Vb)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(Ib)表示的化合物还可通过用通式(VIIIb)表示的化合物使通式(IVb)表示的化合物酰胺化，随后使用碱进行环化来产生。

通式(VIIIb)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(IVb)表示的化合物可通过将通式(IIb)表示的化合物与通式(IIIb)表示的化合物偶联并随后去保护来合成。

通式(IVb)表示的化合物还可通过从通式(IIb)表示的化合物中除去保护基团，然后与通式(IxIIb)表示的化合物偶联来合成。

通式(IIb)表示的化合物和通式(IIIb)表示的化合物可以使用已知方法来产生。

通式(Ib)表示的化合物还可通过在氧化剂和R

通式(Ib)表示的化合物还可通过用通式(VIIIb)表示的化合物使通式(VIIb)表示的化合物酰胺化，然后在R

通式(VIIb)表示的化合物可通过将通式(VIb)表示的化合物与通式(IIIb)表示的化合物偶联并随后去保护来合成。

通式(VIIb)表示的化合物还可通过从通式(VIb)表示的化合物中除去保护基团，然后与通式(IIIb)表示的化合物偶联来合成。

通式(VIb)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(Ib)表示的化合物还可通过已知的转化反应由通式(Ib)表示的另一种化合物产生。

通式(IVb)表示的化合物还可通过已知的转化反应由通式(IVb)表示的另一种化合物产生。

通式(VIIb)表示的化合物还可通过已知的转化反应由通式(VIIb)表示的另一种化合物产生。

[产生方法4]

通式(Ib)表示的化合物，对应于其中W

[化学式6]

(式中的符号表示与上述基团相同的基团。)

通式(Ib)表示的化合物还可通过将通式(XIVb)表示的化合物与通式(IIIb)表示的化合物偶联来产生。

通式(IIIb)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(XIVb)表示的化合物可通过在氧化剂存在的情况下，使用通式(XIIIb)表示的化合物和通式(Vb)表示的化合物进行氧化环化来产生。氧化环化可以在酸(例如，对甲苯磺酸)存在的情况下进行。

通式(XIIIb)表示的化合物和通式(Vb)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(XIVb)表示的化合物还可通过用通式(VIIIb)表示的化合物使通式(XIIIb)表示的化合物酰胺化，然后用碱进行环化来产生。

通式(VIIIb)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(XIVb)表示的化合物还可通过在氧化剂和R

通式(XIVb)表示的化合物还可通过用通式(VIIIb)表示的化合物使通式(XVb)表示的化合物酰胺化，然后在R

通式(XVb)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(XIVb)表示的化合物还可通过已知的转化反应由通式(XIVb)表示的另一种化合物产生。

通式(Ib)表示的化合物还可通过已知的转化反应由通式(Ib)表示的另一种化合物产生。

[产生方法5]

通式(Ic)表示的化合物，对应于其中W

[化学式7]

(式中的符号表示与上述基团相同的基团。)

通式(Ic)表示的化合物可通过在氧化剂存在的情况下，使用通式(IVc)表示的化合物和通式(Vc)表示的化合物或通式(Vc)表示的另一种含有醛等同物(例如，二甲氧基缩醛或二乙氧基缩醛)作为替代醛的官能团的化合物进行氧化环化来产生。氧化环化可以在酸(例如，对甲苯磺酸)存在的情况下进行。

通式(Vc)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(Ic)表示的化合物还可通过用通式(VIIIc)表示的化合物使通式(IVc)表示的化合物酰胺化，然后使用碱进行环化来产生。

通式(VIIIc)表示的化合物可使用已知的方法来容易地产生。

通式(IVc)表示的化合物可通过将通式(IIc)表示的化合物与通式(IIIc)表示的化合物偶联并随后去保护来合成。

通式(IVc)表示的化合物还可通过从通式(IIc)表示的化合物中除去保护基团，然后与通式(IIIc)表示的化合物偶联来合成。

通式(IIc)表示的化合物和通式(IIIc)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(Ic)表示的化合物还可通过在氧化剂和R

通式(Ic)表示的化合物还可通过用通式(VIIIc)表示的化合物使通式(VIIc)表示的化合物酰胺化，然后在R

通式(VIIc)表示的化合物可通过将通式(VIc)表示的化合物与通式(IIIc)表示的化合物偶联并随后去保护来合成。

通式(VIIc)表示的化合物还可通过从通式(VIc)表示的化合物中除去保护基团，然后与通式(IIIc)表示的化合物偶联来合成。

通式(VIc)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(Ic)表示的化合物还可通过已知的转化反应由通式(Ic)表示的另一种化合物产生。

通式(IVc)表示的化合物还可通过已知的转化反应由通式(IVc)表示的另一种化合物产生。

通式(VIIc)表示的化合物还可通过已知的转化反应由通式(VIIc)表示的另一种化合物来产生。

通式(Ic')(其中W

[化学式8]

(式中的符号表示与上述基团相同的基团。)

通式(Ic')表示的化合物还可通过使用通式(VIIc)表示的化合物和通式(XVIc)表示的化合物进行环化来产生。环化可以在酸或碱存在的情况下进行。

通式(XVIc)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(Ic')表示的化合物还可通过已知的转化反应由通式(Ic')表示的另一种化合物产生。

[产生方法6]

通式(Ic)表示的化合物，对应于其中W

[化学式9]

(式中的符号表示与上述基团相同的基团。)

通式(Ic)表示的化合物还可通过将通式(XIVc)表示的化合物与通式(IIIc)表示的化合物偶联来产生。

通式(IIIc)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(XIVc)表示的化合物可通过在氧化剂存在的情况下，使用通式(XIIIc)表示的化合物和通式(Vc)表示的化合物或通式(Vc)表示的另一种含有醛等同物(例如，二甲氧基缩醛或二乙氧基缩醛)作为替代醛的官能团的化合物进行氧化环化来产生。氧化环化可以在酸(例如，对甲苯磺酸)存在的情况下进行。

通式(XIIIc)表示的化合物和通式(Vc)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(XIVc)表示的化合物还可通过用通式(VIIIc)表示的化合物使通式(XIIIc)表示的化合物酰胺化，然后用碱进行环化来产生。

通式(VIIIc)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(XIVc)表示的化合物可通过在氧化剂和R

通式(XIVc)表示的化合物还可通过用通式(VIIIc)表示的化合物使通式(XVc)表示的化合物酰胺化，然后在R

通式(XVc)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(XIVc)表示的化合物还可通过已知的转化反应由通式(XIVc)表示的另一种化合物产生。

通式(Ic)表示的化合物还可通过已知的转化反应由通式(Ic)表示的另一种化合物产生。

通式(Ic')(其中W

[化学式10]

(式中的符号表示与上述基团相同的基团。)

通式(Ic')表示的化合物还可通过将通式(XIVc’)表示的化合物与通式(IIIc)表示的化合物偶联来产生。

通式(XIVc')表示的化合物还可通过使用通式(VIIc)表示的化合物和通式(XVIc)表示的化合物进行环化来产生。环化可以在酸或碱存在的情况下进行。

通式(XVIc)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(Ic')表示的化合物还可通过已知的转化反应由通式(Ic')表示的另一种化合物产生。

通式(XIVc')表示的化合物还可通过已知的转化反应由通式(XIVc')表示的另一种化合物产生。

[产生方法7]

通式(Id)表示的化合物，对应于其中W

[化学式11]

(式中的符号表示与上述基团相同的基团。)

通式(Id)表示的化合物可通过在氧化剂存在的情况下，使用通式(IVd)表示的化合物和通式(Vd)表示的化合物或通式(Vd)表示的另一种含有醛等同物(例如，二甲氧基缩醛或二乙氧基缩醛)作为替代醛的官能团的化合物进行氧化环化来产生。氧化环化可以在酸(例如，对甲苯磺酸)存在的情况下进行。

通式(Vd)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(Id)表示的化合物还可通过用通式(VIIId)表示的化合物使通式(IVd)表示的化合物酰胺化，然后使用碱进行环化来产生。

通式(VIIId)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(IVd)表示的化合物可通过将通式(IId)表示的化合物与通式(IIId)表示的化合物偶联并随后去保护来合成。

通式(IVd)表示的化合物还可通过从通式(IId)表示的化合物中除去保护基团，然后与通式(IIId)表示的化合物偶联来合成。

通式(IId)表示的化合物和通式(IIId)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(Id)表示的化合物还可通过在氧化剂和R

通式(Id)表示的化合物还可通过用通式(VIIId)表示的化合物使通式(VIId)表示的化合物酰胺化，然后在R

通式(VIId)表示的化合物可通过将通式(VId)表示的化合物与通式(IIId)表示的化合物偶联并随后去保护来合成。

通式(VIId)表示的化合物还可通过从通式(VId)表示的化合物中除去保护基团，然后与通式(IIId)表示的化合物偶联来合成。

通式(VId)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(Id)表示的化合物还可通过已知的转化反应由通式(Id)表示的另一种化合物产生。

通式(IVd)表示的化合物还可通过已知的转化反应由通式(IVd)表示的另一种化合物产生。

通式(VIId)表示的化合物还可通过已知的转化反应由通式(VIId)表示的另一种化合物产生。

通式(Id')(其中W

[化学式12]

(式中的符号表示与上述基团相同的基团。)

通式(Id')表示的化合物还可通过使用通式(VIId)表示的化合物和通式(XVId)表示的化合物进行环化来生产。环化可以在酸或碱存在的情况下进行。

通式(XVId)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(Id')表示的化合物还可通过已知的转化反应由通式(Id')表示的另一种化合物产生。

[产生方法8]

通式(Id)表示的化合物，对应于其中W

[化学式13]

(式中的符号表示与上述基团相同的基团。)

通式(Id)表示的化合物还可通过将通式(XIVd)表示的化合物与通式(IIId)表示的化合物偶联来产生。

通式(IIId)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(XIVd)表示的化合物可通过在氧化剂存在的情况下，使用通式(XIIId)表示的化合物和通式(Vd)表示的化合物进行氧化环化来产生。氧化环化可以在酸(例如，对甲苯磺酸)存在的情况下进行。

通式(XIIId)表示的化合物和通式(Vd)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(XIVd)表示的化合物还可通过用通式(VIIId)表示的化合物使通式(XIIId)表示的化合物酰胺化，然后使用碱进行环化来产生。

通式(VIIId)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(XIVd)表示的化合物可通过在氧化剂和R

通式(XIVd)表示的化合物还可通过用通式(VIIId)表示的化合物使通式(XVd)表示的化合物酰胺化，然后在R

通式(XVd)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(XIVd)表示的化合物还可通过已知的转化反应由通式(XIVd)表示的另一种化合物产生。

通式(Id)表示的化合物还可通过已知的转化反应由通式(Id)表示的另一种化合物产生。

通式(Id')(其中W

[化学式14]

(式中的符号表示与上述基团相同的基团。)

通式(Id')表示的化合物还可通过将通式(XIVd')表示的化合物与通式(IIId)表示的化合物偶联来产生。

通式(XIVd')表示的化合物还可通过使用通式(VIId)表示的化合物和通式(XVId)表示的化合物进行环化来产生。环化可以在酸或碱存在的情况下进行。

通式(XVId)表示的化合物可使用已知的方法来产生。

通式(Id')表示的化合物还可通过已知的转化反应由通式(Id')表示的另一种化合物产生。

通式(XIVd')表示的化合物还可通过已知的转化反应由通式(XIVd')表示的另一种化合物产生。

[药剂的使用]

上述化合物或它们的盐可从在外显子7中的核苷酸位置6处具有胸腺嘧啶的突变SMN基因，增强包含对应于外显子7的核苷酸序列的正常SMN mRNA的表达或包含对应于外显子7的氨基酸序列的正常SMN蛋白的表达。因此，所述化合物或其盐可用作表达增强剂，其增强含有对应于外显子7的核苷酸序列的SMN mRNA或含有对应于外显子7的氨基酸序列的SMN蛋白的表达。

通过增强含有对应于外显子7的核苷酸序列的SMN mRNA或含有对应于外显子7的氨基酸序列的SMN蛋白的表达，有可能向患有SMA的患者提供对SMA的预防性或治疗性治疗，所述患者具有在外显子7的核苷酸位置6处有胸腺嘧啶的突变SMN基因，因此具有较少或者没有正常SMN蛋白的功能。因此，所述化合物或其盐可用作药剂，特别是SMA的预防剂或治疗剂。

如本文所用，术语“正常SMN mRNA”是指来自正常SMN基因的转录物，其包含对应于外显子7的核苷酸序列，并具有通过增加其翻译产物的量来抑制SMA的症状的功能。如本文中所用，术语“正常SMN蛋白”是指正常SMN基因的表达产物，其包含对应于外显子7的氨基酸序列，并具有通过增加其量来抑制SMA症状的功能。

“对SMA的预防”是指通过向个体施用剂来抑制SMA的发展、改善SMA的症状或延迟SMA的发展，所述个体具有在外显子7中的核苷酸位置6处具有胸腺嘧啶的突变SMN基因，并且由于正常SMN蛋白功能的降低或丧失而具有发展SMA的可能性。

如本文中所用，术语“正常SMN基因”是指在外显子7中的核苷酸位置6处具有胞嘧啶的基因，其主要(例如，80％或更多，优选95％或更多)表达包含对应于外显子7的核苷酸序列的SMN mRNA。术语“突变SMN基因”是指在外显子7中的核苷酸位置6处具有胸腺嘧啶的基因，其主要(例如，80％或更多，优选95％或更多)表达不含对应于外显子7的核苷酸序列的SMN mRNA。通常，正常SMN基因是SMN1基因(基因ID：6606)，其在外显子7中的核苷酸位置6处具有胞嘧啶，而突变SMN基因是SMN2基因(基因ID:6607)，其在外显子7中的核苷酸位置6处具有胸腺嘧啶。因此，在本说明书中，SMN基因可以是SMN1基因或SMN2基因。然而，在自然界中，大多数人个体的外显子7中位置6处的核苷酸在SMN1和SMN2基因中分别为胞嘧啶和胸腺嘧啶，因此在许多情况下天然存在的SMN1基因是正常SMN基因，而在许多情况下天然存在的SMN2基因是突变SMN基因；然而，在外显子7中的位置6处的核苷酸突变为胸腺嘧啶的SMN1基因是突变SMN基因，而在外显子7中的位置6处的核苷酸转换突变(conversion mutation)为胞嘧啶的SMN2基因是正常SMN基因。应该注意的是，正常SMN基因可以是任何基因，所述基因能够表达含有对应于外显子7的核苷酸序列的SMN mRNA，并且可具有不同于在野生型SMN1基因中发现的突变的突变，只要其具有野生型基因的功能即可。此外，正常SMN基因以及突变SMN基因可具有任何SNP，只要满足上述定义即可。

[药剂的配制和施用]

本发明实施方案中的药剂含有上述化合物之一或其盐作为活性成分；然而，出于各种目的，它们可含有除活性成分以外的物质，诸如一种或多种药学上可接受的媒介物、崩解剂、稀释剂、润滑剂、调味剂、着色剂、甜味剂、酸化剂、矫味剂、助悬剂、湿润剂、乳化剂、分散剂、助剂、防腐剂、缓冲剂、粘合剂、稳定剂、包衣剂、局部麻醉剂和等渗剂(isotonisant)。具体地，媒介物的实例包括乳糖、精制糖、氯化钠、葡萄糖、淀粉、碳酸钙、高岭土、微晶纤维素和硅酸；粘合剂的实例包括水、乙醇、丙醇、简单糖浆、葡萄糖溶液、淀粉溶液、明胶溶液、羧甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基淀粉、甲基纤维素、乙基纤维素、虫胶、磷酸钙和聚乙烯吡咯烷酮；崩解剂的实例包括干淀粉、海藻酸钠、琼脂粉、碳酸氢钠、碳酸钙、十二烷基硫酸钠、硬脂酸单甘油酯和乳糖；润滑剂的实例包括提纯的滑石、硬脂酸盐、硼砂和聚乙二醇；甜味剂、酸化剂和矫味剂的实例包括精制糖、须奈亚弥柑橘(Citrus aurantium Linne)皮、柠檬酸和酒石酸；缓冲剂的实例包括柠檬酸钠、乙酸钠和磷酸钠；稳定剂的实例包括黄蓍胶、阿拉伯树胶、明胶、焦亚硫酸钠、乙二胺四乙酸(EDTA)、巯基乙酸和硫代乳酸；局部麻醉剂的实例包括盐酸普鲁卡因和盐酸利多卡因；等渗剂的实例包括氯化钠和葡萄糖。

对于上述每种药剂，施用途径的选择可以是全身性的或局部的。在任一情况下，可以口服或肠胃外施用每种药剂。肠胃外施用可以是例如静脉内施用、动脉内施用、真皮施用、皮下施用、皮内施用、肌内施用、腹膜内施用和经粘膜施用。局部途径优选为对中枢神经系统的施用途径，并且实例包括蛛网膜下腔内注射、脑室内注射和脑脊液内注射。

可使用任何剂型，只要所用剂型适合选择的施用途径即可。例如，对于口服施用，可使用片剂、胶囊剂、粉剂、颗粒剂、丸剂、液体、乳剂、混悬剂、溶液、醑剂(spirits)、糖浆剂、浸膏剂(extracts)和酏剂。对于肠胃外药物，实例包括诸如皮下注射、静脉注射、肌内注射和腹膜内注射等的注射；透皮治疗系统或贴剂、软膏或洗液；用于口腔施用的舌下制剂和口腔贴剂；用于鼻腔施用的气雾剂；和栓剂。这些药物制剂可使用药物制剂工艺中常用的已知方法来制造。另外，根据本发明的药物可以是延长释放剂型或缓释剂型。

对于制备用于口服施用的液体制剂，口服液、糖浆剂和酏剂可使用普通方法通过向活性成分中加入例如矫味剂、缓冲剂、稳定剂和/或气味掩蔽剂来制备。矫味剂的适用实例包括上面提到的那些。柠檬酸钠是缓冲剂的实例，并且黄蓍胶、阿拉伯树胶和明胶是稳定剂的实例。

包含在上述药剂中的每一种中的活性成分的量可以根据例如活性成分的剂量范围和施用频率来适当地确定。剂量范围不受限制，并且可根据例如所含的一种或多种成分的功效、施用过程、施用途径、疾病类型、与受试者相关的信息(诸如体重、年龄、医疗状况和一种或多种其它药剂的使用)以及主治医生的决定来适当选择。通常，合适的剂量为例如约0.01μg至约100mg/kg受试者体重，优选约0.1μg至约1mg/kg受试者体重。上述剂量可以以每日一次或每日数次施用。

[配方示例]

含有上述化合物之一或其盐作为活性成分的药剂可使用例如以下配方来制造。

1.胶囊剂

将成分(1)、(2)和(3)以及一半的成分(4)捏合，然后制粒。将剩余的(4)加入到颗粒中，并将整个混合物封装到明胶胶囊中。

2.片剂

将成分(1)、(2)和(3)、三分之二的配料(4)和一半的成分(5)捏合，然后制粒。将剩余的(4)和(5)加入到颗粒中，并将颗粒压制成片剂。

3.注射剂

将上述化合物之一或其盐溶解于50mL日本药典中描述的注射用蒸馏水中，并加入将日本药典中描述的另一种注射用蒸馏水至100mL的最终体积。将该溶液在无菌条件下过滤。随后，将该溶液等分为1mL体积，在无菌条件下装入注射小瓶中，冻干，并密封。

[用于检查表达增强的方法]

可使用任何方法来检查上述化合物中的每一种或其盐是否能够增强正常SMNmRNA和/或正常SMN蛋白的表达。

具体而言，有可能将上述化合物之一或其盐与在外显子7中的核苷酸位置6处具有胸腺嘧啶的突变SMN基因的细胞接触，以检查细胞中正常SMN mRNA和/或正常SMN蛋白的量是否因该化合物或其盐而增加。例如，培养源自SMA患者的细胞(诸如成纤维细胞)，并将化合物或其盐加入至培养基中。随后，从细胞中分离出mRNA或蛋白质，并检查mRNA或蛋白质的量，与作为对照的在不含所述化合物或其盐的培养基中培养的细胞或在含所述化合物或其盐的培养基中培养之前的细胞相比，是否增加。任何方法都可用于这种类型的检查。对于mRNA，可使用Northern印迹和斑点印迹，但涉及通过逆转录产生cDNA和使用PCR测量正常SMN cDNA的量的方法是优选的，因为其方便。对于蛋白质，可使用Western印迹和斑点印迹，但使用ELISA测量正常蛋白质的量是优选的，因为其方便。

工作实施例

[实验实施例1]用于产生化合物的方法

以下实施例中的术语“室温”通常指约10℃至约35℃。除非另有说明，否则混合溶剂中所用的比例以体积比表示。除非另有说明，否则百分比以重量百分比表示。

除非另有说明，否则在进行实施例中的柱色谱的同时通过薄层色谱(TLC)分析洗脱物的级分。具体而言，使用60F

对于

通过LC/MS测量质谱。对于电离，使用ESI或APCI技术。数据显示为测量值(实测的(Found))。通常地，观察到分子离子峰；然而，在某些情况下可能会观察到片段离子峰。对于盐，游离离子的峰通常被观察为分子或片段离子峰。

具有比旋度([α]

元素分析(分析(Anal.))结果表示为计算的值(计算值(Calcd.))和测量的值(实测值)。

在实施例中，由x射线粉末衍射获得的峰是在室温下由Ultima IV仪(RigakuCorporation,Japan)使用Cu Kα辐射作为辐射源记录的那些峰。测量条件如下。

电压/电流：40kV/50mA

扫描速度：6度/分钟

2θ的扫描范围：2–35度

根据赫尔曼斯理论从实施例中的x射线粉末衍射图计算结晶度。

在以下实施例中，使用了以下缩写。

mp：熔点

MS：质谱

M：摩尔浓度

CDCl

CD

DMSO-d

J：J-耦合

s：单峰

d：双峰

t：三重峰

q：四重峰

quin：五重峰

brs：宽单峰

LC/MS：液相色谱-质谱联用仪

HPLC：高效液相色谱

ESI：电喷雾电离

APCI：大气压化学电离

DMA：N,N-二甲基乙酰胺

DMF：N,N-二甲基甲酰胺

THF：四氢呋喃

Ac：乙酰基

tert：叔

工作实施例1

2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-7-氟-6-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)2-氨基-4-氟-5-(1-甲基哌啶-4-基)苯甲酰胺

在100℃下搅拌2-氨基-5-溴-4-氟苯甲酰胺(820mg)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼烷-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶(942mg)、双[二叔丁基(4-二甲氨基苯基)膦]二氯化钯(II)(237mg)、2.0M碳酸钠水溶液(5.28mL)和甲苯(15mL)的混合物过夜。在室温下向所得混合物中加入水，并用乙酸乙酯萃取混合物。分离有机层，用饱和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，然后减压蒸馏除去挥发性组分。剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化。向所得固体中加入活性炭上的氢氧化钯(20％钯)(100mg)和甲醇，然后将获得的混合物在常压和氢气气氛下于室温下搅拌过夜。然后，通过过滤除去催化剂，并从滤液中减压蒸馏出挥发性组分，得到标题化合物(716mg)。

(B)1-(2-氧代丙基)-1H-吡唑-3,5-二羧酸二乙酯

在冰冷却下，向1H-吡唑-3,5-二羧酸二乙酯(300g)和丙酮(1.5L)的混合物中加入碳酸钾(216g)。将混合物在室温下搅拌30分钟，在室温下在10分钟内向其中滴加1-氯丙酮(140g)。将混合物在室温下搅拌13小时后，在室温下向混合物中加入水，用乙酸乙酯萃取混合物。分离有机层，用饱和盐水洗涤，并经无水硫酸镁干燥，然后减压蒸馏除去挥发性组分，得到标题化合物(367g)。

(C)4-羟基-6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-羧酸乙酯

室温下，向1-(2-氧代丙基)-1H-吡唑-3,5-二羧酸二乙酯(367g)和乙酸(2.0L)的混合物中加入乙酸铵(1.09kg)。将混合物在回流下加热24小时并用冰冷却，然后向其中滴加水(1.0L)。将混合物在室温下搅拌过夜后，通过过滤分离沉淀物，并用水洗涤。将所得固体和5％碳酸氢钠水溶液(1.0L)的混合溶液在室温下搅拌1小时后，通过过滤分离沉淀物，并用水洗涤，得到标题化合物(200g)。

(D)4-氯-6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-羧酸乙酯

将4-羟基-6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-羧酸乙酯(200g)和磷酰氯(1.0L)的混合物在回流下加热1小时。在将混合物冰冷却后，向其中加入二异丙基醚(2.5L)，并将混合物在室温下搅拌过夜。用二异丙基醚洗涤通过混合物过滤分离出的沉淀物，得到标题化合物(202g)。

(E)4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-羧酸乙酯

在将4-氯-6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-羧酸乙酯(202g)、碳酸钾(350g)和DMF(2.0L)的混合物加热至60℃后，向其中加入双(三苯基膦)二氯化钯(II)(18.4g)和甲基硼酸(104g)，然后将混合物在氮气气氛下于105-123℃搅拌7小时。将混合物冰冷却，并向其中加入5％盐水(1.5L)和乙酸乙酯(1.0L)。过滤混合物，并用THF洗涤残留物。然后，将生成的液体加入到滤液中。在用乙酸乙酯萃取所得滤液后，分离有机层，然后用5％氢氧化铵溶液和5％盐水洗涤。向获得的有机层中加入活性炭(20g)，并将混合物在室温下搅拌30分钟。将混合物过滤，并用乙酸乙酯洗涤活性炭。然后，将生成的液体加入到滤液中。从所得滤液中减压蒸馏出挥发性组分。向剩余的固体中加入二乙基醚(800mL)，将混合物在60℃搅拌1小时，冰冷却，然后在相同温度下再次搅拌30分钟。然后，通过过滤分离沉淀物，得到标题化合物(130g)。

(F)(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)甲醇

在将4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-羧酸乙酯(101g)和THF(1.7L)的混合物冰冷却后，在30分钟内向其中滴加1.5M二异丁基氢化铝/甲苯溶液(820mL)。将混合物在相同温度下搅拌30分钟。在30分钟内在冰冷却下向混合物中滴加2.0M酒石酸钾钠水溶液(1.38L)，并将混合物在室温下搅拌2小时。通过硅藻土过滤混合物，并用乙酸乙酯萃取滤液。用5％盐水洗涤含有乙酸乙酯的有机层，并减压蒸馏除去挥发性组分，得到固体A(57g)。向含有滤液的水层中再次加入乙酸乙酯(1.0L)，然后混合，并将混合物在室温下搅拌12小时。分离有机层，并减压蒸馏除去挥发性组分，得到固体B(8.0g)。向固体A(57g)和固体B(8.0g)中加入二异丙基醚(500mL)，并将所得混合物在70℃下搅拌1小时，并在冰冷却下搅拌30分钟。然后，通过过滤分离沉淀物，得到标题化合物(54.4g)。

(G)4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲醛

在室温下向(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)甲醇(54.5g)和THF(800mL)的混合物中加入二氧化锰(269g)，并将混合物在室温下搅拌3天。将混合物通过硅藻土过滤，并用THF洗涤残留物。然后，将生成的液体加入到滤液中，并从所得滤液中减压蒸馏出挥发性组分。向所得固体中加入二异丙基醚(500mL)，将混合物在70℃孵育1小时，然后在冰冷却下搅拌1小时。然后，过滤混合物，得到为固体的标题化合物(44.3g)。

(H)2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-7-氟-6-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

将2-氨基-4-氟-5-(1-甲基哌啶-4-基)苯甲酰胺(110mg)、4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲醛(77.0mg)、碘(222mg)和乙醇(10mL)的混合物在80℃搅拌过夜。减压蒸馏除去挥发性组分，所得固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化。用二乙基醚洗涤所得固体，得到标题化合物(56mg)。

工作实施例2

2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)2-氨基-5-(1-甲基哌啶-4-基)苯甲酰胺

将2-氨基-5-溴苯甲酰胺(2.7g)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼烷-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶(3.36g)、双[二叔丁基(4-二甲氨基苯基)膦]二氯钯(II)(845mg)、2.0M碳酸钠水溶液(18.8mL)和甲苯(50mL)的混合物在100℃搅拌过夜。在室温下向混合物中加入水，并用乙酸乙酯萃取混合物。分离有机层，用饱和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，然后减压蒸馏除去挥发性组分。剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷和NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化，然后向所得固体中加入氢氧化钯-活性炭(20％钯)(160mg)和甲醇。然后，将混合物在室温下于常压和氢气气氛下搅拌过夜。在将所得混合物过滤以除去催化剂，并从滤液中减压蒸馏出挥发性组分后，用二乙醚洗涤所得固体，得到标题化合物(1.40g)。

(B)2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

将2-氨基-5-(1-甲基哌啶-4-基)苯甲酰胺(110mg)、4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲醛(83mg)、碘(144mg)和乙醇(10mL)的混合物在80℃搅拌过夜。在从混合物中减压蒸馏除去挥发性组成分后，将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化。用二乙基醚洗涤所得固体，得到标题化合物(32.0mg)。

工作实施例3

2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-8-氟-6-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)2-氨基-5-氯-3-氟苯甲酰胺

在将2-氨基-5-氯-3-氟苯甲酸(2.00g)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(3.03g)、1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-油酸铵(1/1)(2.09g)、三乙胺(4.41mL)和DMF(30mL)的混合物在室温下搅拌过夜后，在室温下向其中加入水，并用乙酸乙酯萃取混合物。分离有机层，用饱和碳酸氢钠水溶液和饱和盐水洗涤，然后经无水硫酸镁干燥，并减压蒸馏除去挥发性组分。用二乙基醚洗涤所得固体，得到标题化合物(699mg)。

(B)2-氨基-3-氟-5-(1-甲基哌啶-4-基)苯甲酰胺

在将2-氨基-5-氯-3-氟苯甲酰胺(660mg)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼烷-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶(1.02g)、双[二叔丁基(4-二甲氨基苯基)膦]二氯化钯(II)(235mg)、2.0M碳酸钠水溶液(5.25mL)和甲苯(15mL)的混合物于100℃下搅拌之过夜后，在室温下向其中加入水并用乙酸乙酯萃取混合物。分离有机层，用饱和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，然后减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化，并将所得固体(800mg)、氢氧化钯-活性炭(20％钯)(70mg)和甲醇(20mL)的混合物在室温下于常压和氢气气氛下搅拌过夜。然后，通过过滤除去催化剂，并从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分，得到标题化合物(580mg)。

MS:[M+H]

(C)2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-8-氟-6-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

在将2-氨基-3-氟-5-(1-甲基哌啶-4-基)苯甲酰胺(120mg)、4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲醛(92.0mg)、碘(242mg)和乙醇(10mL)的混合物在80℃搅拌过夜后，减压蒸馏除去挥发性组分，将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化。用二乙基醚洗涤所得固体，得到标题化合物(50.0mg)。

工作实施例4

2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-5-氟-6-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)6-氨基-2-氟-3-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)苯甲酰胺

将6-氨基-3-溴-2-氟苯甲酰胺(640mg)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧戊环-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶(758mg)、4[二叔丁基膦-N,N-二甲基苯胺-二氯化钯(2:1)(II)(188mg)、2.0M碳酸钠水溶液(4.12mL)和甲苯(20mL)的混合物在氮气气氛下于100℃下搅拌过夜。在室温下向混合物中加入水，并用乙酸乙酯萃取混合物。分离有机层，经无水硫酸镁干燥，然后减压蒸馏除去挥发性组分。将所得固体通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(184mg)。

(B)6-氨基-2-氟-3-(1-甲基哌啶-4-基)苯甲酰胺

将6-氨基-2-氟-3-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)苯甲酰胺(180mg)、氢氧化钯-活性炭(20％钯)(101mg)和甲醇(20mL)的混合物在室温下于常压和氢气气氛下搅拌过夜。将所得混合物过滤以除去催化剂，减压蒸馏除去挥发性组分，得到标题化合物(63.1mg)。

(C)2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-5-氟-6-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

室温下，向6-氨基-2-氟-3-(1-甲基哌啶-4-基)苯甲酰胺(60.0mg)和乙醇(10mL)的混合物中加入4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲醛(46mg)和碘(121mg)。在将混合物在80℃下于氮气气氛下搅拌过夜后，减压蒸馏除去挥发性组成分。将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化，用乙酸乙酯洗涤所得固体，得到标题化合物(56.3mg)。

工作实施例5

2-(4-乙基-6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)4-乙基-6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-羧酸乙酯

在室温下向4-氯-6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-羧酸乙酯(500mg)和THF(10mL)的混合物中加入二氯[1,3-双(二苯基膦基)丙烷]镍(II)(56.5mg)。在将混合物冰冷却后，向其中滴加1.0M二乙基锌/甲苯溶液(4.17mL)，并将混合物在冰冷却下搅拌1小时，以及在室温下搅拌2小时。在将混合物再次冰冷却后，向其中滴加1.0M二乙基锌/甲苯溶液(4.17mL)，并将混合物在室温下搅拌1小时。然后，在室温下向其中加入水。在用乙酸乙酯萃取混合物后，用饱和盐水洗涤有机层，经无水硫酸镁干燥，然后减压蒸馏除去挥发性组分。将所得固体通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(335mg)。

(B)(4-乙基-6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)甲醇

在室温下，向4-乙基-6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-羧酸乙酯(330mg)和THF(10mL)的混合物中滴加1.0M氢化二异丁基铝/甲苯溶液(4.24mL)，并将混合物在室温下于氮气气氛下搅拌4小时。在室温下向所得混合物中滴加1.0M二异丁基氢化铝/甲苯溶液(4.24mL)，并将混合物在室温下于氮气气氛下搅拌30分钟。然后，在室温下向其中加入饱和Rochelle盐水溶液(10mL)和乙酸乙酯(20mL)，并将混合物在相同温度下搅拌过夜。在用乙酸乙酯萃取所得混合物后，用饱和盐水洗涤有机层，并用无水硫酸镁干燥，然后减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体通过硅胶柱色谱(乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(219mg)。

(C)4-乙基-6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲醛

在室温下向(4-乙基-6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)甲醇(210mg)和THF(5mL)的混合物中加入二氧化锰(955mg)，并将混合物在室温下搅拌过夜。在通过硅藻土过滤所得混合物后，从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分，得到标题化合物(199mg)。

(D)2-(4-乙基-6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮

在室温下，向2-氨基-5-(4-甲基哌嗪-1-基)苯甲酰胺(150mg)和乙醇(5mL)的混合物中加入4-乙基-6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲醛(133mg)和碘(325mg)，并将混合物在80℃下于氮气气氛下搅拌1小时。然后，减压蒸馏除去挥发性组分。将所得固体通过硅胶柱色谱纯化(NH，甲醇/乙酸乙酯)，得到标题化合物(16.5mg)。

实施例6

2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮二盐酸盐

在将2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮(500mg)在70℃下溶解在2.0M盐酸(4mL)中后，向其中滴加乙醇(4mL)。将混合物在60-70℃下搅拌30分钟，并在室温下搅拌过夜，然后用乙醇/水(1/1)洗涤通过过滤获得的固体，得到标题化合物(440mg)。

实施例7

2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-7-氟-6-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)4-氟-5-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-硝基苯甲酰胺

将4,5-二氟-2-硝基苯甲酰胺(2.0g)、1-甲基哌嗪(1.49g)、三乙胺(2.77mL)和THF(20mL)的混合物在室温下搅拌过夜，并在室温下向其中加入二异丙基醚(10mL)。然后，通过过滤分离沉淀物，得到标题化合物(3.50g)。

MS:[M+H]

(B)2-氨基-4-氟-5-(4-甲基哌嗪-1-基)苯甲酰胺

将4-氟-5-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-硝基苯甲酰胺(3.50g)、氢氧化钯-活性炭(20％钯)(348mg)和甲醇(70mL)的混合物在室温下于常压和氢气气氛下搅拌2小时。过滤所得混合物以除去催化剂，并从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。然后，将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化。用二异丙基醚洗涤所得固体，得到标题化合物(2.50g)。

MS:[M+H]

(C)2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-7-氟-6-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮

将2-氨基-4-氟-5-(4-甲基哌嗪-1-基)苯甲酰胺(165mg)、4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲醛(126mg)、碘(183mg)和乙醇(5mL)的混合物在70℃下搅拌3小时，然后通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化，得到标题化合物(38.0mg)。

实施例8

2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)5-氟-2-硝基苯甲酰胺

在室温下向5-氟-2-硝基苯甲酸(25.0g)、DMF(0.105mL)和THF(125mL)的混合物中滴加草酰氯(17.7mL)，并将混合物在室温下搅拌1小时。在从所得混合物中减压蒸馏除去挥发性组分后，将残留物与THF共沸以除去挥发性组分。向所得固体中加入THF(225mL)，然后混合，在冰冷却下向其中滴加7.0M氨/甲醇溶液(38.6mL)。然后，将混合物在相同温度下搅拌1小时。在相同温度下进一步向其中加入水，并用乙酸乙酯萃取混合物。分离有机层并用1.0M盐酸和水洗涤后，减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入二异丙基醚(150mL)，并将混合物在60℃搅拌30分钟。将混合物冷却至室温，然后通过过滤分离沉淀物，用二异丙基醚洗涤，得到标题化合物(20.0g)。

(B)5-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-硝基苯甲酰胺

在室温下，向5-氟-2-硝基苯甲酰胺(20.0g)、1-甲基哌嗪(11.4g)和THF(100mL)的混合物中加入三乙胺(18.2mL)，并将混合物在60℃搅拌过夜。减压蒸馏除去挥发性组分，用二异丙基醚/乙酸乙酯洗涤剩余的固体，得到标题化合物(30.5g)。

(C)2-氨基-5-(4-甲基哌嗪-1-基)苯甲酰胺

将5-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-硝基苯甲酰胺(30.0g)、氢氧化钯-活性炭(20％钯)(3.0g)和甲醇(600mL)的混合物在室温下于常压和氢气气氛下搅拌过夜。在将所得混合物过滤除去催化剂，并从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分后，用乙酸乙酯/二异丙基醚洗涤剩余的固体，得到标题化合物(18.0g)。

(D)2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮

在室温下，向2-氨基-5-(4-甲基哌嗪-1-基)苯甲酰胺(3.00g)和2,2,2-三氟乙醇(30mL)的混合物中加入4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲醛(2.24g)，并将混合物在80℃下搅拌16小时。减压蒸馏除去挥发性组分，并将1-丁醇(30mL)加入剩余的固体中。然后，将混合物在130℃下搅拌59小时。在将混合物冷却至室温后，向其中加入乙醇(30mL)，通过过滤分离沉淀物，得到固体(2.91g)。向所得固体中加入1-丁醇(60mL)，并将混合物在130℃下搅拌。然后，在相同温度下向其中滴加乙酸乙酯(60mL)。将混合物冷却至室温，通过过滤分离沉淀物，得到标题化合物(2.05g)。

实施例9

6-(2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)N-(4-溴-2-氨基甲酰基苯基)-1-甲基哌啶-4-甲酰胺

在室温下，向1-甲基哌啶-4-羧酸(519mg)、草酰氯(0.977mL)和THF(10mL)的混合物中加入DMF(0.216mL)。将混合物在室温下搅拌1小时，并减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入DMA(5mL)，然后在室温下进一步向其中加入2-氨基-5-溴苯甲酰胺(600mg)。在将混合物在室温下搅拌1小时后，向其中加入水，用乙酸乙酯萃取混合物。将有机层用饱和盐水洗涤，经硫酸镁干燥，然后减压蒸馏除去挥发性组分。用乙醚洗涤剩余的固体，得到标题化合物(430mg)。

MS:[M+H]

(B)6-溴-2-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

在室温下，向N-(4-溴-2-氨基甲酰基苯基)-1-甲基哌啶-4-甲酰胺(430mg)和乙醇(2mL)的混合物中加入4.0M氢氧化钠水溶液(0.632mL)，并将混合物在室温下搅拌30分钟，然后用2.0M盐酸中和。然后，通过过滤分离沉淀物，得到标题化合物(270mg)。

(C)6-(2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

向6-溴-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶(100mg)和二噁烷(10mL)的混合物中加入双(频那醇合)二硼(144mg)，然后混合，并将混合物用氮气脱气10分钟。向混合物中进一步加入二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(19.4mg)和乙酸钾(140mg)，然后将化合物在100℃下搅拌过夜。将所得混合物冷却至室温，并向其中加入THF(15mL)。然后，过滤混合物，并从所得滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入6-溴-2-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮(150mg)、乙腈(12mL)和水(0.5mL)，然后混合，然后进一步向其中加入碳酸钾(130mg)。混合物用氩气脱气20分钟，并进一步向其中加入四(三苯基膦)钯(0)(53.8mg)。然后，将混合物在90℃搅拌16小时，冷却至室温，并通过硅藻土过滤。从所得滤液中减压蒸馏除去挥发性组分，将剩余的固体通过硅胶柱色谱(甲醇/二氯甲烷)纯化，得到标题化合物(50.0mg)。

实施例10

6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

向6-溴-8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶(300mg)和二噁烷(20mL)的混合物中加入双(频那醇合)二硼(665mg)，然后混合，并将混合物用氩气脱气10分钟。向混合物中加入二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(53.5mg)和乙酸钾(386mg)，然后混合，然后将混合物在100℃下搅拌过夜。在将所得混合物冷却至室温后，向其中加入THF(15mL)，过滤混合物。然后，从所得滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体、6-溴-2-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮(100mg)、乙腈(12mL)和水(0.5mL)的混合物中加入碳酸钾(86.3mg)，并将混合物用氩气脱气20分钟。然后，向其中加入四(三苯基膦)钯(0)(35.9mg)。在将所得混合物在90℃搅拌16小时后，冷却至室温并通过硅藻土过滤，从所得滤液中减压蒸馏除去挥发性组分，然后将所得固体通过硅胶柱色谱(甲醇/二氯甲烷)纯化，得到标题化合物(50.0mg)。

实施例11

2-(4,6-二甲基呋喃并[3,2-c]吡啶-2-基)-6-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)3-碘-2,6-4-羟基吡啶

向2,6-二甲基-4-羟基吡啶(6.5g)、碳酸钠(11.2g)和水(100mL)的混合物中加入碘(13.4g)，并将反应混合物在室温下搅拌16小时。然后，向其中加入浓盐酸以将pH值调节至4-5。向通过过滤获得的固体中加入甲醇(60mL)，然后混合，并将混合物加热。将混合物过滤，并从所得滤液中减压蒸馏除去挥发性组分，得到标题化合物(4.5g)。

(B)(4,6-二甲基呋喃并[3,2-c]吡啶-2-基)甲醇

在将3-碘-2,6-4-羟基吡啶(4.5g)和吡咯烷(50mL)的混合物用氩气脱气10分钟后，向混合物中加入四(三苯基膦)钯(0)(1.05g)和碘化铜(0.35g)，并将混合物在室温下搅拌20分钟。进一步向其中加入炔丙醇(1.52g)，并将混合物在室温下搅拌48小时。然后，减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入THF(100mL)，然后混合，并将混合物在回流下加热2小时。在减压蒸馏除去挥发性组分后，向剩余的固体中加入乙酸乙酯和饱和碳酸氢钾溶液。分离有机层，用饱和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，然后减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体通过硅胶柱色谱(乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(2.2g)。

(C)4,6-二甲基呋喃并[3,2-c]吡啶-2-甲醛

在室温下向(4,6-二甲基呋喃并[3,2-c]吡啶-2-基)甲醇(2.2g)和二氯甲烷(100mL)中加入二氧化锰(16.2g)，并将混合物在室温下搅拌32小时。在将所得混合物通过硅藻土过滤后，从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体通过硅胶柱色谱(乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(1.2g)。

(D)6-溴-2-(4,6-二甲基呋喃并[3,2-c]吡啶-2-基)喹唑啉-4(3H)-酮

在室温下向2-氨基-5-溴苯甲酰胺(1.5g)、4,6-二甲基呋喃并[3,2-c]吡啶-2-甲醛(1.22g)和乙醇(50mL)中加入碘(1.86g)，并将混合物在回流下加热40小时。将在将所得混合物冷却至室温后通过过滤获得的固体用乙酸乙酯、10％硫代硫酸钠水溶液、水和甲醇洗涤，得到标题化合物(1.5g)。

(E)2-(4,6-二甲基呋喃并[3,2-c]吡啶-2-基)-6-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮

向密封管中加入6-溴-2-(4,6-二甲基呋喃并[3,2-c]吡啶-2-基)喹唑啉-4(3H)-酮(150mg)、1-甲基哌嗪(81.9mg)和二噁烷(10mL)，然后向混合物中加入叔丁醇钾(136mg)。然后，将混合物用氩气脱气10分钟。进一步向其中加入2-二环己基膦基-2’，4’，6’-三异丙基联苯(23.4mg)和三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(18.5mg)，然后将混合物密封在密封管中，并在110℃下搅拌18小时。冷却至室温后，将混合物通过硅藻土过滤，并从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体通过硅胶柱色谱(甲醇/二氯甲烷)纯化，得到标题化合物(70.0mg)。

实施例12

2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(4-乙基哌嗪-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮

在室温下向2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(哌嗪-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮二盐酸盐(100mg)和乙醇(5mL)的混合物中加入5.0M乙醛/THF溶液(0.466mL)和三乙酰氧基硼氢化钠(284mg)，然后将混合物在室温下于氮气气氛下搅拌2小时。在减压蒸馏除去挥发性组分后，将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯纯化)。将所得固体用乙醇洗涤，从1-丁醇/乙酸乙酯中重结晶，得到标题化合物(18.1mg)。

实施例13

6-(2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

在将6-溴-2-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮(180mg)、2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼烷-2-基)苯并[d]噁唑(184mg)、双(三叔丁基膦)钯(0)(14.3mg)、碳酸铯(364mg)、THF(2mL)和水(0.40mL)的混合物在70℃下于氮气气氛下搅拌1小时后，在室温下向其中加入水，并用乙酸乙酯/THF萃取混合物。分离有机层，经无水硫酸镁干燥，然后减压蒸馏除去挥发性组分。在将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化后，用乙酸乙酯洗涤所得固体。此外，向固体中加入二甲基亚砜(2.0mL)和乙醇(2.0mL)，并将它们混合，并将混合物在70℃下搅拌1小时。用二甲基亚砜/乙醇(1/1)和乙醇洗涤将混合物冷却至室温后通过过滤获得的固体，得到标题化合物(81mg)。

实施例14

6-(2-甲基-1,3-苯并噻唑-6-基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

在将6-溴-2-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮(170mg)、2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼烷-2-基)苯并[d]噁唑(182mg)、双(三叔丁基膦)钯(0)(13.5mg)、碳酸铯(344mg)、THF(10mL)和水(2.0mL)的混合物在70℃下于氮气气氛下搅拌1小时后，在室温下向其中加入水，并用乙酸乙酯/THF萃取混合物。分离有机层，经无水硫酸镁干燥，然后减压蒸馏除去挥发性组分。在将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化后，用乙酸乙酯洗涤所得固体，得到标题化合物(11.8mg)。

实施例15

2-(1-甲基哌啶-4-基)-6-(3-甲基吡咯并[1,2-a]吡嗪-7-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)7-溴-3-甲基吡咯并[1,2-a]吡嗪

在室温下向6-溴-1H-吡咯-2-甲醛(810mg)、碳酸钾(965mg)和乙腈(20mL)的混合物中加入1-溴丙-2-酮(0.469mL)，并将混合物在室温下于氮气气氛下搅拌6小时，同时避光。然后，进一步向其中加入水，并用乙酸乙酯萃取混合物。将有机层用饱和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，然后减压蒸馏除去挥发性组分。在室温下向剩余的固体和乙酸(20mL)的混合物中加入乙酸铵(7.18g)，并将混合物在120℃下搅拌3小时。在减压蒸馏除去挥发性组分后，向剩余的固体中加入饱和碳酸氢钠水溶液，并用乙酸乙酯萃取混合物。将有机层用饱和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，然后减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体通过硅胶柱色谱(乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(470mg)。

MS:[M+H]

(B)2-(1-甲基哌啶-4-基)-6-(3-甲基吡咯并[1,2-a]吡嗪-7-基)喹唑啉-4(3H)-酮

将7-溴-3-甲基吡咯并[1,2-a]吡嗪(200mg)、双(频那醇合)二硼(265mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(38.7mg)、乙酸钾(279mg)和二甲基亚砜(3.0mL)的混合物在90℃下于氮气气氛下搅拌过夜。在室温下向所得混合物中加入水，将混合物过滤。然后，用乙酸乙酯萃取滤液，用水和饱和盐水洗涤有机层，然后经无水硫酸镁干燥。然后，减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入6-溴-2-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮(120mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(15.2mg)、碳酸铯(243mg)、1,2-二甲氧基乙烷(1.5mL)和水(0.30mL)，然后混合，然后将混合物在100℃下于微波辐射条件下搅拌混合物1小时。在室温下向其中加入水，通过过滤除去残渣。然后，用乙酸乙酯/THF萃取滤液。分离有机层，用水洗涤，经无水硫酸镁干燥，然后减压蒸馏除去挥发性组分。在将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化后，用乙酸乙酯洗涤如此获得的纯化产物。向所得固体中加入二甲基亚砜(1.0mL)和乙醇(1.0mL)，然后混合，然后将混合物在70℃搅拌1小时并冷却至室温。用二甲基亚砜/乙醇(1/1)和乙醇洗涤通过过滤获得的固体，得到标题化合物(47.8mg)。

实施例16

2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(哌嗪-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮二盐酸盐

(A)4-(3-氨基甲酰基-4-硝基苯基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯

将5-氟-2-硝基苯甲酰胺(3.00g)、碳酸钾(4.50g)、哌嗪-1-羧酸叔丁酯(3.34g)和DMF(15mL)的混合物在50℃搅拌过夜，并在室温下向其中加入水。然后，用乙酸乙酯萃取混合物。分离有机层，用饱和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，然后减压蒸馏除去挥发性组分。用二异丙基醚洗涤剩余的固体，得到标题化合物(4.55g)。

(B)4-(4-氨基-3-氨基甲酰基苯基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯

在将4-(3-氨基甲酰基-4-硝基苯基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(4.5g)、氢氧化钯-活性炭(20％钯)(450mg)和甲醇(90mL)的混合物在室温下于常压和氢气气氛下搅拌过夜后，通过过滤除去催化剂，并从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分，得到标题化合物(3.27g)。

MS:[M+H]

(C)4-[2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-6-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯

在室温下向4-(4-氨基-3-氨基甲酰基苯基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.00g)和2,2,2-三氟乙醇(20mL)的混合物中加入4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲醛(547mg)，并将混合物在80℃下搅拌过夜。然后，减压蒸馏除去挥发性组分。然后，向剩余的固体中加入1-丁醇(20mL)，并混合它们，向其中加入钯-活性炭(10％钯)(100mg)。然后，将混合物在130℃下搅拌4小时。将所得混合物通过硅藻土过滤以除去催化剂，并用THF洗涤，然后从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。然后，用乙醇洗涤剩余的固体，得到标题化合物(839mg)。

(D)2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(哌嗪-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮二盐酸盐

在将4-[2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-6-基]哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(300mg)和10％氯化氢/甲醇(10mL)的混合物在室温下搅拌6小时后，在60℃下搅拌3小时。然后，减压蒸馏除去挥发性组分，用乙醇洗涤剩余的固体，得到标题化合物(175mg)。

实施例17

6-(8-氯-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)6-溴-8-氯-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶

在将5-溴-3-氯吡啶-2-胺(1.5g)、1-溴-2,2-二甲氧基丙烷(2.15mL)、对甲苯磺酸吡啶鎓(363mg)和2-丙醇(20mL)的混合物在回流下加热过夜并在室温下向其中加入饱和碳酸氢钾水溶液后，用乙酸乙酯萃取混合物。将有机层用饱和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，然后减压蒸馏除去挥发性组分。在将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化后，用二异丙基醚洗涤所得固体，得到标题化合物(1.23g)。

(B)4-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

在室温下向1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-羧酸(25.6g)、草酰氯(24.4mL)和THF(200mL)的混合物中加入DMF(0.072mL)，并将混合物在室温下搅拌2小时。然后，减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入DMA(60mL)，并向其中加入2-氨基-5-溴苯甲酰胺(20.0g)和DMA(60mL)的混合物。然后，将混合物在室温下搅拌1小时。在室温下进一步向其中加入饱和碳酸氢钠水溶液(200mL)，并用乙酸乙酯萃取混合物。将有机层用饱和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，然后减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入乙醇(300mL)，然后混合，并在室温下进一步向其中加入2.0M氢氧化钠水溶液(93mL)。然后，将混合物搅拌1小时，并用2.0M盐酸(90mL)中和。通过过滤分离沉淀物，并用乙醇/水(1/1，120mL)洗涤，得到标题化合物(32.9g)。

(C)4-[4-氧代-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼烷-2-基)-3,4-二氢喹唑啉-2-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将4-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(10.0g)、双(频那醇合)二硼(6.84g)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(1.00g)、乙酸钾(4.81g)和环戊基甲基醚(200mL)的混合物在120℃下于氮气气氛下搅拌过夜并冷却至室温，然后将混合物通过硅胶柱色谱(乙酸乙酯)纯化。用水洗涤所得固体，得到标题化合物(5.4g)。

(D)4-[6-(8-氯-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将4-[4-氧代-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼烷-2-基)-3,4-二氢喹唑啉-2-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(400mg)、6-溴-8-氯-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶(216mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(35.9mg)、碳酸铯(572mg)和1,2-二甲氧基乙烷(4mL)的混合物在130℃下于微波辐射条件下搅拌30分钟，并通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化。用乙酸乙酯洗涤所得固体，得到标题化合物(152mg)。

(E)6-(8-氯-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

在将4-[6-(8-氯-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(150mg)和甲酸(2mL)的混合物在60℃下搅拌10分钟后，减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余固体、甲醇(1mL)和乙酸(0.5mL)的混合物中加入37％甲醛水溶液(0.099mL)和硼烷-2-甲基吡啶络合物(81mg)，并将混合物在室温下搅拌1小时。然后，减压蒸馏除去挥发性组分。在将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化后，用二异丙基醚洗涤所得固体，得到标题化合物(94mg)。

实施例18

6-(4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)6-溴-4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑

将2-氨基-5-溴-3-氟苯酚(6.8g)、1,1,1-三甲氧基乙烷(13.9g)和乙醇(60mL)的混合物在回流下加热过夜。在从混合物中减压蒸馏除去挥发性组分后，将剩余的固体通过硅胶柱色谱(乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(5.9g)。

(B)4-[6-(4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将4-[4-氧代-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼烷-2-基)-3,4-二氢喹唑啉-2-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(400mg)、6-溴-4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑(202mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(35.9mg)、碳酸铯(572mg)和1,2-二甲氧基乙烷(4mL)在130℃下于微波辐射条件下搅拌30分钟，并通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯)纯化。用二异丙基醚洗涤所得固体，得到标题化合物(180mg)。

(C)6-(4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

在将4-[6-(4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(180mg)和甲酸(2mL)的混合物在60℃下搅拌10分钟后，减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体、甲醇(1mL)和乙酸(0.5mL)的混合物中加入37％甲醛水溶液(0.122mL)和硼烷-2-甲基吡啶络合物(101mg)。然后，将混合物在室温下搅拌1小时，减压蒸馏除去挥发性组分。在将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化后，用二异丙基醚洗涤所得固体，得到标题化合物(70mg)。

工作实施例19

8-甲基-6-(2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)4-(6-溴-8-甲基-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

向1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-羧酸(270mg)、草酰氯(0.258mL)和THF(2mL)的混合物中加入DMF(催化量)，并将混合物在室温下搅拌1小时。然后，减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中依次加入DMA(2mL)和2-氨基-5-溴-3-甲基苯甲酰胺(225mg)，然后将混合物在室温下搅拌10分钟。然后，进一步向其中加入饱和碳酸氢钠水溶液，并将它们混合，并用乙酸乙酯萃取混合物。将有机层用饱和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，然后减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中依次加入乙醇(10mL)和2.0M氢氧化钠水溶液(0.982mL)，然后将混合物在室温下搅拌1小时，并用2.0M盐酸(0.98mL)和水(5mL)中和。通过过滤分离沉淀物，用乙醇/水(1:1，30mL)洗涤，得到标题化合物(341mg)。

(B)4-[8-甲基-6-(2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

在将4-(6-溴-8-甲基-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(341mg)、双(频那醇合)二硼(225mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(32.9mg)、乙酸钾(158mg)和二甲基亚砜(4mL)的混合物在微波辐射条件下于130℃搅拌30分钟并冷却至室温后，向其中加入水和乙酸乙酯并过滤除去残渣。用乙酸乙酯萃取滤液，并用水和饱和盐水洗涤有机层，然后通过硅胶柱色谱(乙酸乙酯)纯化，得到粗产物(480mg)。向所得粗产物(380mg)中加入6-碘-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶(251mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(33.1mg)、碳酸铯(528mg)、1,2-二甲氧基乙烷(10mL)和水(2mL)，然后将混合物在微波辐射条件下于130℃搅拌30分钟，通过硅胶柱色谱(NH、甲醇/乙酸乙酯)纯化。然后，将所得固体从乙酸乙酯/二异丙基醚(2/1)中重结晶，得到标题化合物(233mg)。

MS:[M+H]

(C)8-甲基-6-(2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

在将4-[8-甲基-6-(2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(233mg)和甲酸(2mL)的混合物在70℃下搅拌10分钟后，减压蒸馏出挥发性组分。向剩余的固体中加入甲醇(1.5mL)和乙酸(0.1mL)，然后在室温下向其中进一步加入37％甲醛水溶液(0.120mL)和硼烷-2-甲基吡啶络合物(79mg)。然后，将混合物在室温下搅拌30分钟，并减压蒸馏出挥发性组分。在将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化后，将所得固体从乙酸乙酯中重结晶，得到标题化合物(137mg)。

实施例20

6-(1,3-二甲基吡咯并[1,2-a]吡嗪-7-基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)7-溴-1,3-二甲基吡咯并[1,2-a]吡嗪

在室温下，向1-(4-溴-1H-吡咯-2-基)乙酮(2.90g)、碳酸钾(3.20g)和乙腈(50mL)的混合物中加入1-氯丙烷-2-酮(1.84mL)，并将混合物在氮气气氛下室温搅拌过夜，同时避光。然后，减压蒸馏除去挥发性组分。向所得固体中加入水，混合物用乙酸乙酯萃取。然后，用饱和盐水洗涤有机层，并通过硅胶柱色谱(乙酸乙酯)纯化，得到粗产物。在室温下向所得粗产物中加入乙酸(50mL)和乙酸铵(23.8g)，并将混合物在120℃下搅拌4小时。在减压蒸馏出挥发性组分后，向剩余的固体中加入1.0M氢氧化钠水溶液和乙酸乙酯，过滤除去残渣。用乙酸乙酯萃取滤液，用饱和盐水洗涤有机层，然后经无水硫酸镁干燥。然后，减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体通过硅胶柱色谱(乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(2.29g)。

(B)4-[6-(1,3-二甲基吡咯并[1,2-a]吡嗪-7-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

在将4-[4-氧代-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼烷-2-基)-3,4-二氢喹唑啉-2-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(346mg)、7-溴-1,3-二甲基吡咯并[1,2-a]吡嗪(205mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(31.1mg)、2.0M碳酸铯水溶液(0.761mL)和1,2-二甲氧基乙烷(4mL)的混合物在微波辐射条件下于130℃搅拌30分钟并通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/甲醇)纯化后，用乙酸乙酯/二异丙基醚(1/1)洗涤所得固体，得到标题化合物(168mg)。

MS:[M+H]

(C)6-(1,3-二甲基吡咯并[1,2-a]吡嗪-7-基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

在将4-[6-(1,3-二甲基吡咯并[1,2-a]吡嗪-7-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(168mg)和甲酸(3mL)的混合物在70℃下搅拌10分钟后，减压蒸馏出挥发性组分。向剩余的固体中加入甲醇(3mL)和乙酸(0.2mL)，然后混合，然后向其中加入37％甲醛水溶液(0.086mL)和硼烷-2-甲基吡啶络合物(56.8mg)。然后，将混合物在室温下搅拌30分钟，并减压蒸馏出挥发性组分。在将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化后，将所得固体从乙酸乙酯中重结晶，得到标题化合物(42.6mg)。

工作实施例21

2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-8-甲基-6-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)5-氟-3-甲基-2-硝基苯甲酰胺

在室温下向5-氟-3-甲基-2-硝基苯甲酸(2.0g)和THF(50mL)的混合物中滴加草酰氯(1.38mL)和DMF(0.078mL)，然后将反应混合物在氮气气氛下于室温下搅拌1小时。然后，减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入THF(50mL)，然后混合，在冰冷却下向其中滴加7.0M氨/甲醇溶液(2.87mL)。然后，将所得混合物在氮气气氛下于室温下搅拌2小时。减压蒸馏除去挥发性组分，将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，己烷/乙酸乙酯)纯化，得到标题化合物(1.18g)。

(B)3-甲基-5-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-硝基苯甲酰胺

在室温下向5-氟-3-甲基-2-硝基苯甲酰胺(1.18g)和THF(50mL)的混合物中加入1-甲基哌嗪(0.701mL)和三乙胺(1.00mL)，然后将混合物在80℃搅拌过夜。然后，将所得混合物通过硅胶柱色谱(NH，己烷/乙酸乙酯)纯化，得到标题化合物(740mg)。

(C)2-氨基-3-甲基-5-(4-甲基哌嗪-1-基)苯甲酰胺

在将3-甲基-5-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-硝基苯甲酰胺(740mg)、氢氧化钯-活性炭(20％钯)(74mg)和甲醇(20mL)的混合物在室温下于常压和氢气气氛下搅拌过夜后，通过过滤除去催化剂，并从滤液中减压蒸馏出挥发性组分。然后，用二异丙基醚洗涤剩余的固体，得到标题化合物(570mg)。

(D)2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-8-甲基-6-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮

在室温下向2-氨基-3-甲基-5-(4-甲基哌嗪-1-基)苯甲酰胺(200mg)和2,2,2-三氟乙醇(5mL)的混合物中加入4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲醛(141mg)，将混合物在80℃下搅拌过夜。然后，减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入1-丁醇(5mL)，然后混合，并进一步向其中加入钯-活性炭(10％钯)(40mg)。然后，将所得混合物在130℃搅拌过夜，并过滤除去催化剂。然后，从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体用乙醇洗涤，并从1-丁醇/乙酸乙酯中重结晶，得到标题化合物(18.8mg)。

工作实施例22

6-(8-甲氧基-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)6-溴-8-甲氧基-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶

将4-溴-2-甲氧基-2-氨基吡啶(2.0g)、氯丙酮(2.37ml)和乙醇(15ml)的混合物加热至回流48小时，然后减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入乙酸乙酯和饱和碳酸氢钠水溶液。在分离有机层后，用无水硫酸钠将其脱水，并减压蒸馏除去挥发性组分，将剩余的固体通过硅胶柱色谱(乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(1.3g)。

(B)6-(8-甲氧基-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4-(3H)-酮

在向6-溴-2-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮(200mg)和DMF(8ml)的混合物中加入双(频那醇合)二硼(316mg)后，用氮气脱气10分钟，加入[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)二氯甲烷加合物(25.3mg)和乙酸钾(183mg)，并将混合物在90℃下搅拌3小时。在将所得混合物冷却至室温后，加入THF(15ml)并混合，通过过滤除去固体物质，并从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入6-溴-8-甲氧基-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶(183mg)和乙腈/水(12.5ml)并混合。另外，加入碳酸钾(148mg)，在用氩气脱气20分钟后，进一步加入四(三苯基膦)钯(0)(62mg)并混合。在100℃下搅拌所得混合物16小时后，将其冷却至室温，并通过硅藻土过滤除去固体。从所得滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体通过制备型HPLC(C18，流动相：20mM碳酸铵水溶液/乙腈)纯化，得到标题化合物(25mg)。

工作实施例23

6-(2,8-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

向6-溴-2,8-二甲基咪唑[1,2-a]吡啶(150mg)和1,4-二噁烷(5mL)的混合物中加入双(频那醇合)二硼(339mg)；在用氮气脱气10分钟后，进一步加入[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)二氯甲烷加合物(27.2mg)和乙酸钾(197mg)，并将混合物在100℃搅拌过夜。在将所得混合物冷却至室温后，加入THF(15ml)，通过过滤除去固体，并从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入6-溴-2-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4-(3H)-酮(183mg)、乙腈(12ml)和水(0.5ml)并混合。在加入碳酸钾(155mg)并用氩气脱气20分钟后，进一步加入四(三苯基膦)钯(0)(65mg)。将所得混合物在90℃搅拌16小时，冷却至室温，并通过硅藻土过滤除去固体。从所得滤液中减压蒸馏除去挥发性组分，并将剩余的固体通过制备型HPLC(C18，流动相：20mM碳酸铵水溶液/乙腈)纯化，得到标题化合物(40mg)。

工作实施例24

8-氟-6-(4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4-(3H)-酮

(A)2-氨基-5-溴-3-氟苯甲酰胺

将N-溴琥珀酰亚胺(4.9g)加入到2-氨基-3-氟苯甲酰胺(4.0g)和DMF(24mL)的混合物中。在室温下搅拌1小时后，加入水，并用乙酸乙酯萃取混合物。将有机层用硫代硫酸钠水溶液洗涤，然后用饱和盐水洗涤，然后用无水硫酸镁对产物进行脱水，并减压蒸馏除去挥发性组分。用二异丙基醚洗涤剩余的固体，得到标题化合物(4.24g)。

(B)4-(6-溴-8-氟-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

将DMF(9.97μL)加入到1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-羧酸(3.54g)、草酰氯(3.3 8ml)和THF(30ml)的混合物中。在室温下搅拌2小时后，减压蒸馏除去挥发性组分。将2-氨基-5-溴-3-氟苯甲酰胺(3.0g)加入到剩余的固体和DMA(30ml)的混合物中，将混合物在室温下搅拌1小时，在室温下加入饱和碳酸氢钠水溶液，并用乙酸乙酯/THF(2/1)萃取混合物。将有机层用饱和盐水洗涤，用无水硫酸镁脱水，并减压蒸馏除去挥发性组分。用二异丙基醚洗涤剩余的固体，向所得固体中加入乙醇(60mL)，将混合物混合，在室温下加入2.0M氢氧化钠水溶液(12.9ml)，并将混合物在室温下搅拌1小时。通过加入2.0M盐酸(10ml)进行中和，通过过滤分离沉淀物，并用乙醇/水(1/1,10ml)洗涤，得到标题化合物(4.80g)。

(C)4-(8-氟-6-(4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

将4-(6-溴-8-氟-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(800mg)、双(频那醇合)二硼(572mg)、[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)二氯甲烷加合物(77mg)、乙酸钾(368mg)和环丙基甲基醚(5mL)的混合物在130℃下于微波辐射下搅拌40分钟。在冷却至室温后，加入THF，并将混合物通过硅藻土过滤除去固体，然后从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入6-溴-4-氟-2-甲基苯并[d]噁唑(432mg)、[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)二氯甲烷加合物(77mg)，2.0M碳酸铯水溶液(1.88ml)和1,2-二甲氧基乙烷(18ml)，并混合。然后在微波辐射下，将混合物在130℃下搅拌30分钟。在通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化混合物后，用二异丙基醚洗涤所得固体，得到标题化合物(690mg)。

(D)8-甲基-6-(4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)-2-(哌啶-4-基)喹唑啉-4-(3H)-酮甲酸酯

将4-(8-氟-6-(4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(690mg)和甲酸(3mL)的混合物在70℃搅拌10分钟，然后减压蒸馏除去挥发性组分。用乙酸乙酯洗涤剩余的固体，得到标题化合物(615mg)。

(E)8-氟-6-(4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4-(3H)-酮

将硼烷-2-甲吡啶络合物(121mg)加入到8-甲基-6-(4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)-2-(哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮甲酸酯(200mg)、37％甲醛水溶液(0.147mL)、甲醇(1.0ml)和乙酸(0.5ml)的混合物中；在室温下搅拌1小时后，减压蒸馏除去挥发性组分。在用硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化剩余的固体后，用乙酸乙酯/二异丙基醚洗涤所得固体，得到标题化合物(100mg)。

工作实施例25

2-(1-乙基哌啶-4-基)-6-(4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)喹唑啉-4(3H)-酮

将4-(6-(4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(149mg)和甲酸(2mL)的混合物在70℃搅拌20分钟，然后减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入甲醇(1.5ml)和乙酸(0.1ml)，并混合；另外，加入2-甲吡啶硼烷络合物(50mg)和5.0M乙醛/THF溶液(0.19ml)，并将混合物在室温下搅拌过夜。减压蒸馏除去挥发性组分，并将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化。用乙醇/二异丙基醚(1/1)洗涤所得固体，得到标题化合物(17.5mg)。

工作实施例26

7-(2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-3-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)7-溴-3-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉4-(3H)-酮

将2-氨基-4-溴甲基苯甲酸酯(2.0g)、1,1-二甲氧基-N,N-二甲基甲胺(3.2ml)和DMF(10ml)的混合物在110℃搅拌2小时；然后在室温下加入水，并用乙酸乙酯萃取混合物。分离有机层，用饱和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，减压蒸发挥发性组分。向剩余的固体中加入乙酸(15ml)和1-甲基哌啶-4-胺(1.2g)，将混合物在回流下加热2小时，然后减压蒸馏除去挥发性组分。在冰冷却下向剩余的固体中加入碳酸氢钠饱和水溶液，并用10％甲醇/二氯甲烷萃取混合物。分离有机层，用饱和盐水洗涤，用无水硫酸钠脱水，减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体通过硅胶柱色谱(二氯甲烷/甲醇)纯化，得到标题化合物(1.0g)。

(B)7-(2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-3-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

将乙酸钾(274mg)加入到7-溴-3-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4-(3H)-酮(300mg)、双(频那醇合)二硼(473mg)和DMF(10ml)的混合物中，并将混合物用氩气脱气15分钟。另外，加入二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯二氯甲烷加合物(38mg)，将混合物在90℃下搅拌3小时，通过硅藻土过滤除去固体，然后将滤液减压蒸发得到粗产物。向所得粗产物中加入6-溴-2-甲基咪唑[1,2-a]吡啶(296mg)、乙腈(12ml)和水(0.5ml)并混合。另外，加入碳酸钾(260mg)，并将混合物用氩气脱气20分钟。向所得混合物中加入四(三苯基膦)钯(0)(108mg)，并将混合物在90℃下搅拌16小时。在用硅藻土过滤除去固体后，从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体通过硅胶柱色谱(二氯甲烷/甲醇)纯化，得到标题化合物(70mg)。

工作实施例27

2-(1-环丙基哌啶-4-基)-6-(4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)喹唑啉-4-(3H)-酮

(A)4-氟-2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼烷-2-基)-1,3-苯并噁唑

将6-溴-4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑(3.00g)、双(频那醇合)二硼(3.97g)、乙酸钾(2.56g)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯二氯甲烷加合物(0.533g)和环戊基甲基醚(30ml)的混合物在120℃下于氮气气氛下搅拌3小时，加入水，过滤混合物以除去固体，然后用乙酸乙酯萃取滤液。分离有机层，用饱和盐水洗涤，用无水硫酸镁脱水，减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体通过硅胶柱色谱(乙酸乙酯/己烷)纯化，用乙醇/水(1/1)洗涤所得固体，得到标题化合物(3.60g)。

(B)6-溴-2-(1-环丙基哌啶-4-基)喹唑啉-4-(3H)-酮

将1.7M丙基膦酸酐/乙酸乙酯溶液(3.56mL)加入到2-氨基-5-溴苯甲酰胺(1.00g)、1-环丙基哌啶-4-羧酸酯(1.15g)和吡啶(8mL)的混合物中；在室温下搅拌5小时后，减压蒸馏除去挥发性组分，并将乙酸乙酯和饱和碳酸氢钠水溶液加入剩余的固体中。在分离有机层后，用饱和盐水洗涤，用无水硫酸镁脱水，并减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入乙醇(20ml)并混合；然后进一步加入2.0M氢氧化钠水溶液(4.65ml)，并将混合物在室温下搅拌1小时，然后用2.0M盐酸中和，过滤分离沉淀物，得到标题化合物(1.14g)。

(C)2-(1-环丙基哌啶-4-基)-6-(4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)喹唑啉-4-(3H)-酮

将6-溴-2-(1-环丙基哌啶-4-基)-喹唑啉-4-(3H)-酮(100mg)、4-氟-2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼烷-2-基)-1,3-苯并噁唑(95mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯二氯甲烷加合物(12mg)、2.0M碳酸铯水溶液(0.29ml)、DME(3mL)和DMF(3ml)的混合物在130℃下于微波辐射下搅拌90分钟；在冷却至室温后，通过过滤分离沉淀物，并用水洗涤。将所得固体溶解在乙酸/甲醇中，通过硅藻土过滤除去固体，并从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。用甲醇洗涤剩余的固体，得到标题化合物(50mg)。

工作实施例28

2-(1-环丙基哌啶-4-基)-8-氟-6-(4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)喹唑啉-4-(3H)-酮

(A)N-(4-溴-2-氨基甲酰基-6-氟苯基)-1-环丙基哌啶-4-甲酰胺

将2-氨基-5-溴-3-氟苯甲酰胺(2.3g)、1-环丙基哌啶-4-羧酸盐酸盐(3.05g)、1.7M丙基膦酸酐/乙酸乙酯溶液(23.2ml)和吡啶(48ml)的混合物在室温下搅拌5小时；在减压蒸馏除去挥发性组分后，向剩余的固体中加入乙酸乙酯和饱和碳酸氢钠水溶液。在分离有机层后，用水洗涤混合物，减压蒸馏除去挥发性组分，并用乙酸乙酯洗涤剩余的固体，得到标题化合物(1.84g)。

(B)6-溴-2-(1-环丙基哌啶-4-基)-喹唑啉-4-(3H)-酮

在室温下将2.0M氢氧化钠水溶液(4.79mL)加入到N-(4-溴-2-氨基甲酰基-6-氟苯基)-1-环丙基哌啶-4-甲酰胺(1.84g)和乙醇(20ml)的混合物中；在室温下搅拌1小时后，将混合物用1.0M盐酸中和。通过过滤分离沉淀物，得到标题化合物(1.50g)。

MS:[M+H]

(C)2-(1-环丙基哌啶-4-基)-8-氟-6-(4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)喹唑啉-4-(3H)-酮

将6-溴-2-(1-环丙基哌啶-4-基)-8-氟喹唑啉-4(3H)-酮(100mg)、4-氟-2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼烷-2-基)-1,3-苯并噁唑(91mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯二氯甲烷加合物(11mg)、2.0M碳酸铯水溶液(0.27mL)、DME(3ml)和DMF(3ml)的混合物在130℃下于微波辐射下搅拌50分钟；在冷却至室温后，通过过滤分离沉淀物，并用水洗涤。将所得固体溶解在乙酸/甲醇中，通过硅藻土过滤除去固体，并从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。用甲醇洗涤剩余的固体，得到标题化合物(50mg)。

工作实施例29

7-(4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)-3-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

将7-溴-3-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮(150mg)、4-氟-2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼烷-2-基)-1,3-苯并噁唑(155mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯二氯甲烷加合物(19mg)、2.0M碳酸铯水溶液(0.466ml)和DME(4mL)的混合物在130℃下于微波辐射下搅拌50分钟，并将混合物通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化。用二异丙基醚洗涤所得固体，得到标题化合物(87mg)。

工作实施例30

8-氟-6-(2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)4-(6-溴-8-氟-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

在室温下将DMF(9.97μL)加入到1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-羧酸(3.54g)、草酰氯(3.38ml)和THF(30ml)的混合物中；搅拌2小时后，减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入DMA(30ml)并混合；另外，在室温下加入2-氨基-5-溴-3-氟苯甲酰胺(3.0g)，并将混合物搅拌1小时。向所得混合物中加入碳酸氢钠饱和水溶液，并用乙酸乙酯/THF萃取混合物。分离有机层，用饱和盐水洗涤，用无水硫酸镁脱水，并减压蒸馏除去挥发性组分。用二异丙基醚洗涤剩余的固体，加入乙醇(60mL)并混合。加入2.0M氢氧化钠水溶液(12.9ml)，并将混合物在室温下搅拌1小时。另外，加入2.0M盐酸(10ml)中和混合物，并过滤混合物以分离沉淀物。用乙醇/水(1/1)洗涤所得固体，得到标题化合物(4.8g)。

(B)4-(8-氟-6-(2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

在将4-(6-溴-8-氟-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(400mg)、2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼烷-2-基)-1,3-苯并噁唑(292mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯二氯甲烷加合物(38mg)、2.0M碳酸铯水溶液(0.94ml),DME(3ml)和DMF(3ml)的混合物在130℃下于微波辐射下搅拌50分钟后，加入水并过滤分离沉淀物。在将所得固体溶解在乙酸/甲醇中并用硅藻土过滤除去固体后，从所得滤液中减压蒸馏除去挥发性组分，并用乙酸乙酯洗涤剩余的固体，得到标题化合物(122mg)。

(C)8-氟-6-(2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

将4-(8-氟-6-(2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(120mg)和甲酸(2mL)的混合物在60℃下搅拌10分钟，然后减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入甲醇(1.0ml)、乙酸(0.5ml)和37％甲醛水溶液(0.081ml)并混合。另外，加入双-甲吡啶硼烷络合物(67mg)，并将混合物在室温下搅拌过夜。减压蒸馏除去挥发性组分，并将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化。用二异丙基醚洗涤所得固体，得到标题化合物(70mg)。

工作实施例31

2-(1-环丙基哌啶-4-基)-8-氟-6-(2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)喹唑啉-4(3H)-酮

将6-溴-2-(1-环丙基哌啶-4-基)-8-氟喹唑啉-4-(3H)-酮(200mg)、2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼烷-2-基)-1,3-苯并噁唑(156mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯二氯甲烷加合物(22mg)、2.0M碳酸铯水溶液(0.55ml)、DME(2mL)和DMF(2ml)的混合物在130℃下于微波辐射下搅拌30分钟；在冷却至室温后，加入水(1.5ml)，通过过滤分离沉淀物，并用乙醇/水(1/1)洗涤。将所得固体溶解在乙酸(1mL)中，加入活性炭(90mg)，过滤固体以除去固体。用乙酸/甲醇(1/1)提取所得滤液，并从所得有机层中减压蒸馏除去挥发性组分。用乙醇洗涤剩余的固体，得到标题化合物(144mg)。

工作实施例32

2-(1-环丙基哌啶-4-基)-6-(3-甲基吡咯并[1,2-a]吡嗪-7-基)喹唑啉-4-(3H)-酮乙酸酯

将6-溴-2-(1-环丙基哌啶-4-基)-喹唑啉-4-(3H)-酮(200mg)、双(频那醇合)二硼(175mg)、乙酸钾(113mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯二氯甲烷加合物(23mg)、环戊基甲基醚(3mL)和DMF(2ml)的混合物在130℃下于微波辐射下搅拌1小时。用乙酸乙酯洗涤用硅藻土过滤获得的固体，将洗涤液与滤液混合，并减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入7-溴-3-甲基吡咯并[1,2-a]吡嗪(120mg)、二氯[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]钯二氯甲烷加合物(23mg)、2.0M碳酸铯水溶液(0.57ml)、DME(3mL)和DMF(3ml)并混合。将混合物在130℃下于微波辐射下搅拌50分钟，在室温下向混合物中加入水，将所得沉淀物过滤以分离并溶解在乙酸/甲醇中。通过硅藻土过滤除去固体，从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分，并用乙酸乙酯洗涤剩余的固体，得到标题化合物(2mg)。

MS:[M-CH

工作实施例33

2-(1-环丙基哌啶-4-基)-8-氟-6-(3-甲基吡咯并[1,2-a]吡嗪-7-基)喹唑啉-4(3H)-酮乙酸酯

将6-溴-2-(1-环丙基哌啶-4-基)-8-氟喹唑啉-4-(3H)-酮(250mg)、双(频那醇合)二硼(208mg)、乙酸钾(134mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯二氯甲烷加合物(28mg)、环戊基甲基醚(3mL)和DMF(2ml)的混合物在130℃下于微波辐射下搅拌1小时。用乙酸乙酯洗涤用硅藻土过滤获得的固体，将洗涤液与滤液混合，并减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入7-溴-3-甲基吡咯并[1,2-a]吡嗪(144mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯二氯甲烷加合物(28mg)、2.0M碳酸铯水溶液(0.68ml)、DME(3ml)和DMF(3ml)并混合，并将混合物在130℃下于微波辐射下搅拌50分钟。在室温下向所得混合物中加入水，过滤混合物以分离沉淀物。将所得固体溶解在乙酸/甲醇中，通过硅藻土过滤除去固体，并从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化。用二异丙基醚洗涤所得固体，得到标题化合物(21mg)。

工作实施例34

3-(1-环丙基哌啶-4-基)-7-(4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)喹唑啉-4-(3H)-酮

(A)7-溴-3-(1-环丙基哌啶-4-基)喹唑啉-4-(3H)-酮

将2-氨基-4-溴苯甲酸酯(530mg)、1,1-二甲氧基-N,N-二甲基甲烷胺(755mg)和DMF(5ml)的混合物在100℃搅拌2小时，在室温下加入水，并用乙酸乙酯萃取混合物。分离有机层，用饱和盐水洗涤，用无水硫酸镁脱水，并减压蒸发挥发性组分。向剩余的固体中加入乙酸(10ml)和1-环丙基哌啶-4-胺(485mg)，并将混合物在120℃下搅拌1小时，然后减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体通过硅胶柱色谱(乙酸乙酯/己烷)纯化。用二异丙基醚洗涤所得固体，得到标题化合物(360mg)。

(B)3-(1-环丙基哌啶-4-基)-7-(4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)喹唑啉-14(3H)-酮

将(7-溴-3-(1-环丙基哌啶-4-基)喹唑啉-4-(3H)-酮(200mg)、4-氟-2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼烷-2-基)-1,3-苯并噁唑(191mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯二氯甲烷(23.45mg)、2.0M碳酸铯水溶液(0.574ml)和DME(5ml)的混合物在130℃下于微波辐射下搅拌30分钟；然后在冷却至室温后，通过过滤分离沉淀物，并用水洗涤。将所得固体溶解在乙酸/甲醇中，并通过硅藻土过滤除去固体。从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分，并用乙酸乙酯洗涤剩余的固体，得到标题化合物(123mg)。

工作实施例35

2-(1-环丙基哌啶-4-基)-8-氟-6-(3-氟-4-甲氧基苯基)喹唑啉-4-(3H)-酮

将6-溴-2-(1-环丙基哌啶-4-基)-8-氟喹唑啉-4(3H)-酮(100mg)、(3-氟-4-甲氧基苯基)硼酸(56mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯二氯甲烷加合物(11mg)、2.0M碳酸铯水溶液(0.27ml)和DME(4mL)的混合物在130℃下于微波辐射下搅拌30分钟；然后在冷却至室温后，通过过滤分离沉淀物，并用水洗涤。将所得固体溶解在乙酸/甲醇中，通过硅藻土过滤除去固体，并从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。用乙酸乙酯洗涤剩余的固体，得到标题化合物(54mg)。

工作实施例36

6-(4-环丙基哌嗪-1-基)-2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]哌嗪-2-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)5-(4-环丙基哌嗪-1-基)-2-硝基苯甲酰胺

将5-氟-2-硝基苯甲酰胺(2.00g)、1-环丙基哌嗪(1.44g)、三乙胺(5.00ml)和THF(10ml)的混合物在60℃搅拌过夜；然后在减压蒸馏除去挥发性组分并用乙酸乙酯洗涤剩余的固体后，将所得固体通过硅胶柱色谱(NH，己烷/乙酸乙酯)纯化，得到标题化合物(2.96g)。

(B)2-氨基-5-(4-环丙基哌嗪-1-基)苯甲酰胺

将5-(4-环丙基哌嗪-1-基)-2-硝基苯甲酰胺(2.96g)、氢氧化钯-活性炭(20％钯)(300mg)和甲醇(100mL)的混合物在室温下于常压和氢气气氛下搅拌过夜，然后通过过滤除去催化剂。然后，从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分，并用二异丙基醚洗涤剩余的固体，得到标题化合物(2.03g)

(C)6-(4-环丙基哌嗪-1-基)-2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)喹唑啉-4(3H)-酮

在室温下向2-氨基-5-(4-环丙基哌嗪-1-基)苯甲酰胺(200mg)和2,2,2-三氟乙醇(5mL)的混合物中加入4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲醛(135mg)，并将混合物在80℃下搅拌过夜。减压蒸馏除去挥发性组分，并向剩余的固体中加入1-丁醇(5mL)，然后混合。然后，进一步向其中加入钯-活性炭(10％钯)(40mg)，并将混合物在130℃搅拌1天。通过硅藻土过滤从所得混合物中除去催化剂，并从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。然后，用乙醇洗涤剩余的固体。将所得固体从1-丁醇/乙酸乙酯中重结晶，得到标题化合物(16.4mg)。

工作实施例37

2-(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)-6-(2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)4-[(4-溴-2-氨基甲酰基苯基)氨基甲酰基]-4-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯

向1-(叔丁氧基羰基)-4-氟哌啶-4-羧酸(2.0g)和THF(40mL)的混合物中加入草酰氯(2.1mL)和DMF(0.57mL)，然后将混合物在室温下搅拌1小时。然后，减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入DMA(25mL)，然后混合，并在室温下进一步向其中加入2-氨基-5-溴苯甲酰胺(1.56g)。将所得混合物在室温下搅拌2小时，并进一步向其中加入乙酸乙酯(50mL)。通过过滤分离沉淀物，并用二乙基醚洗涤，然后将所得固体通过硅胶柱色谱(甲醇/二氯甲烷)纯化，得到标题化合物(2.25g)。

(B)4-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-4-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯

在室温下，向4-((4-溴-2-氨基甲酰基苯基)氨基甲酰基)-4-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.25g)和乙醇(40ml)的混合物中滴加4.0M氢氧化钠水溶液(3.2ml)。将所得混合物在室温下搅拌3小时，然后用2.0M盐酸中和；通过过滤分离沉淀物，并用水洗涤。将所得固体通过硅胶柱色谱(甲醇/二氯甲烷)纯化，得到标题化合物(1.8g)。

(C)6-溴-2-(4-氟哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

在冰冷却下，将三氟乙酸(2.5ml)加入4-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-4-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.8g)和二氯甲烷(15ml)的混合物中，并将混合物在室温下搅拌2小时。减压蒸馏除去挥发性组分，向剩余的固体中加入饱和碳酸氢钠水溶液，并用二氯甲烷萃取混合物。在用无水硫酸钠将有机层脱水后，减压蒸馏除去挥发性组分，得到标题化合物(1.2g)。

(D)6-溴-2-(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4-(3H)-酮

将多聚甲醛(1.38g)加入6-溴-2-(4-氟哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮(1.0g)和THF(20ml)的混合物中；将混合物在室温下搅拌2小时，加入硼氢化钠(975mg),并将混合物在室温下搅拌过夜。将其中分离的固体用10％甲醇/二氯甲烷溶液洗涤的清洗溶液加入到通过用硅藻土过滤所得混合物获得的滤液中。将所得滤液用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，用无水硫酸钠脱水，并减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体通过硅胶柱色谱(甲醇/二氯甲烷)纯化，得到标题化合物(400mg)。

(E)2-(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)-6-(2-甲基咪唑[1,2-a]吡啶-6-基)喹唑啉-4-(3H)-酮

将乙酸钾(173mg)加入到6-溴-2-(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4-(3H)-酮(200mg)、双(频那醇合)二硼(299mg)和DMF(8ml)的混合物中；在用氩气脱气15分钟后，进一步加入含有二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯二氯甲烷(24.0mg)的添加剂，并将混合物在90℃下搅拌3小时。在室温下向所得混合物中加入THF(15ml)后，通过过滤除去固体，并从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入6-溴-2-甲基咪唑[1,2-a]吡啶(150mg)、乙腈(10ml)和水(0.5ml)并混合，并进一步加入碳酸钾(198mg)。将所得混合物用氩气脱气20分钟，然后加入四(三苯基膦)钯(0)(82.2mg)。将混合物在90℃下搅拌16小时，冷却至室温，然后通过硅藻土过滤除去固体。从所得滤液中减压蒸馏除去挥发性组分，并将剩余的固体通过硅胶柱色谱(二氯甲烷/甲醇)纯化，得到标题化合物(27.0mg)。

工作实施例38

6-(4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)-2-(1-异丙基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

将6-(4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)-2-(哌啶-4-基)喹唑啉-4-(3H)-酮甲酸盐(150mg)、2-碘丙烷(0.106ml)、碳酸钾(122mg)和DMF(5ml)的混合物在60℃下搅拌3小时，进一步加入水(2.5ml)，将混合物在室温下搅拌30分钟，然后过滤分离沉淀物。用乙醇/水(1/1)和二甲基亚砜/乙醇(1/1)洗涤所得固体，得到标题化合物(74.5mg)。

工作实施例39

3-(1-环丙基哌啶-4-基)-7(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)喹唑啉-4-(3H)-酮

将3-(1-环丙基哌啶-4-基)-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼烷-2-基)喹唑啉-4(3H)-酮(170mg)、6-溴-8-氟-2-甲氧基咪唑并[1,2-a]吡啶(108mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯二氯甲烷(17.6mg)、2.0M碳酸铯水溶液(0.43ml)和DME(4ml)的混合物在130℃下于微波辐射下搅拌30分钟，然后通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯和硅胶，甲醇/乙酸乙酯)纯化，得到标题化合物(27.9mg)。

工作实施例40

2-(1-环丙基哌啶-4-基)-6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-8-甲基喹唑啉-4-(3H)-酮

(A)4-(6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-8-甲基-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

将4-(6-溴-8-甲基-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(629mg)、双(频那醇合)二硼(416mg)、[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)二氯甲烷加合物(61mg)、乙酸钾(292mg)和环丙基甲基醚(5mL)的混合物在130℃下于微波辐射下搅拌30分钟；在冷却至室温后，进一步加入THF，将混合物通过硅藻土过滤除去固体，并从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分，得到粗产物(1.02g)。向所得粗产物(699mg)中加入2.0M碳酸铯水溶液(1.49ml)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯二氯甲烷加合物(61mg)和DME(10ml)，并将混合物在氮气气氛下在回流下加热8小时。在室温下向混合物中加入水、乙酸乙酯和THF，并在过滤除去不溶物后，用乙酸乙酯萃取所得滤液。分离有机层并通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯)纯化，并用二异丙基醚洗涤所得固体，得到标题化合物(632mg)。

(B)6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-8-甲基-2-(哌啶-4-基)喹唑啉-4-(3H)-酮

将4-(6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-8-甲基-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(632mg)和甲酸(5mL)的混合物在70℃下搅拌20分钟，并减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化，得到标题化合物(432mg)。

(C)2-(1-环丙基哌啶-4-基)-6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-8-甲基喹唑啉-4-(3H)-酮

将氰基硼氢化钠(128mg)加入到6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-8-甲基-2-(哌啶-4-基)喹唑啉-4-(3H)-酮(200mg)、((1-乙氧基环丙基)氧基)(三甲基)硅烷(514ml)、乙酸(0.29ml)和甲醇(4mL)的混合物中，并将混合物在60℃搅拌5小时。在过滤分离沉淀物并用甲醇洗涤后，将所得固体通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化。另外，用乙醇/水(1/1)的混合溶液洗涤所得固体，得到标题化合物(21mg)。

工作实施例85

2-(4-氟-1-环丙基哌啶-4-基)-6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)喹唑啉-4-(3H)-酮

(A)4-氟-4-(6-(8-氟-2-甲基咪唑[1,2-a]吡啶-6-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

将4-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-4-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.77g)、双(频那醇合)二硼(1.82g)、乙酸钾(1.28g)、[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)二氯甲烷加合物(0.265g)和环戊基甲基醚(50ml)的混合物在120℃下于氮气气氛下搅拌过夜，并通过硅胶柱色谱(二醇，乙酸乙酯)纯化，得到粗产物(4.28g)。向所得粗产物(3.08g)中加入6-溴-8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶(1.79g)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯二氯甲烷加合物(0.27g)、2.0M碳酸铯水溶液(6.5ml)和DME(60ml)，将混合物混合，然后在氮气气氛中在回流下加热4.5小时。在室温下向所得混合物中加入水、乙酸乙酯和THF，并将混合物过滤除去不溶性物质。用乙酸乙酯萃取所得滤液，分离有机层，通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化，并用乙醇/水(1/1)洗涤所得固体，得到标题化合物(2.59g)。

(B)6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(4-氟哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

将4-氟-4-(6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.25g)和甲酸(12ml)的混合物在70℃下搅拌20分钟，并减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化，并将所得固体从乙酸乙酯中重结晶，得到标题化合物(820mg)。

(C)2-(4-氟-1-环丙基哌啶-4-基)-6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)喹唑啉-4-(3H)-酮

将6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(4-氟哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮(820mg)、((1-乙氧基环丙基)氧基)(三甲基)硅烷(2.09ml)、氰基硼氢化钠(530mg)、乙酸(1.2ml)和甲醇(20ml)的混合物在60℃搅拌2小时。另外，在室温下加入THF(50ml)和碳酸氢钠水溶液，并用乙酸乙酯萃取混合物。分离有机层，用饱和盐水洗涤，用无水硫酸镁脱水，并减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化。用乙醇/水(1/1)洗涤所得固体，得到标题化合物(497mg)。

工作实施例86

2-(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)-6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)喹唑啉-4(3H)-酮

将4-氟-4-(6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.2g)和甲酸(6mL)的混合物在60℃下搅拌10分钟，然后减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入甲醇(10ml)、乙酸(2mL)和37％甲醛水溶液(0.79ml)并混合。另外，加入硼烷-2-甲吡啶络合物(648mg)，并将混合物在室温下搅拌过夜。减压蒸馏除去挥发性组分，向剩余的固体中加入THF、乙酸乙酯和饱和碳酸氢钠水溶液以溶解固体。用THF和乙基醋的混合溶液萃取水层。将所得有机层用饱和盐水洗涤，用无水硫酸镁脱水，并减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体用硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化，并用二异丙基醚和乙醇/水(4/1)洗涤所得固体，得到标题化合物(400mg)。

工作实施例87

8-氟-6-(3-氟-4-甲氧基苯基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4-(3H)-酮

(A)4-(8-氟-6-(3-氟-4-甲氧基苯基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

将4-(6-溴-8-氟-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.5g)、(3-氟-4-甲氧基苯基)硼酸(718mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]镭二氯甲烷加合物(144mg)、2.0M碳酸铯水溶液(3.52ml)和DME(15ml)的混合物在130℃下于微波辐射下搅拌30分钟。在于室温下进一步加入乙酸乙酯、THF和水并混合后，通过硅藻土过滤除去固体。分离所得滤液的有机层，用饱和盐水洗涤，并用无水硫酸镁脱水。减压蒸馏除去挥发性组分，并用甲醇洗涤剩余的固体，得到标题化合物(1.5g)。

(B)8-氟-6-(3-氟-4-甲氧基苯基)-2-(哌啶-4-基)喹唑啉-4-(3H)-酮乙酸酯

将4-(8-氟-6-(3-氟-4-甲氧基苯基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.5g)和甲酸(6mL)的混合物在70℃搅拌20分钟，然后减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体溶解在乙酸中，并通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化。用乙酸乙酯洗涤所得固体，得到标题化合物(1.28g)。

(C)8-氟-6-(3-氟-4-甲氧基苯基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

向8-氟-6-(3-氟-4-甲氧基苯基)-2-(哌啶-4-基)喹唑啉-4-(3H)-酮乙酸酯(1.15g)、甲醇(20ml)、乙酸(2mL)和37％甲醛水溶液(0.67ml)的混合物中加入硼烷-2-甲吡啶络合物(428mg)，将混合物在室温下搅拌过夜，并减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化，并用乙醇/水(1/1)洗涤所得固体，得到标题化合物(510mg)。

工作实施例85

2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮琥珀酸酯

(A)4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-羧酸

将2.0M氢氧化钠水溶液(135ml)加入到4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-羧酸乙酯(29.69)与乙醇(150ml)和THF(300mL)的混合物中；在室温下搅拌3小时后，在室温下加入水(300ml)和2.0M盐酸(135mL)进行中和。将所得混合物在冰冷却下搅拌1小时，然后用水(100ml)洗涤通过过滤获得的固体，得到标题化合物(23.6g)。

(B)N-(2-氨基甲酰基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲酰胺

将4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-羧酸(10.0g)、1.7M丙基膦酸酐/乙酸乙酯溶液(46.1mL)和吡啶(200ml)的混合物在室温下搅拌1小时；另外，加入2-氨基-5-(4-甲基哌啶-1-基)苯甲酰胺(14.7g)和吡啶(100ml)的混合物，并将混合物在室温下搅拌2小时。在减压蒸馏除去挥发性组分后，向剩余的固体中加入水(300ml)和10％碳酸钾水溶液(300ml)，并将混合物在室温下搅拌1小时。用水(300ml)、乙酸乙酯(100mL)和二异丙基醚(100ml)洗涤通过过滤获得的固体，得到标题化合物(20.0g)。

(C)2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮

将N-(2-氨基甲酰基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲酰胺(35.5g)和1-丁醇(1065ml)的混合物在120℃下搅拌过夜，并且在减压蒸馏除去挥发性组分后，用二异丙基醚洗涤剩余的固体，得到标题化合物(31.2g)。

(D)2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮琥珀酸酯

将2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4-(3H)-酮(40g)、1-丁醇(100ml)、琥珀酸(12.6g)在100℃下加入到混合物中，将混合物在相同温度下搅拌1小时，将通过过滤获得的滤液与通过用1-丁醇(100ml)洗涤分离的固体获得的洗涤液混合。在将所得滤液在100℃搅拌30分钟后，将其冷却至室温，并加入二异丙基醚(200ml)。将所得混合物在室温下搅拌过夜，并用二异丙基醚洗涤通过过滤获得的固体，得到固体(45.2g)。在将所得固体(45.2g)和乙酸乙酯(900ml)的混合物在60℃搅拌1小时以及在室温下搅拌1小时后，用乙酸乙酯(200ml)洗涤通过过滤获得的固体，减压干燥，得到标题化合物(44.0g)。

工作实施例89

6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)-8-甲基喹唑啉-4-(3H)-酮

(A)4-(6-溴-8-甲基-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-4-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯

在将1-(叔丁氧基羰基)-4-氟哌啶-4-羧酸(3.60g)、1.7M丙基膦酸酐/乙酸乙酯溶液(12.1ml)和吡啶(25ml)的混合物在室温下搅拌1小时后，在室温下滴加2-氨基-5-溴-3-甲基苯甲酰胺(2.78g)的吡啶溶液(25ml)，并在室温下搅拌过夜。用2.0M氢氧化钠水溶液(25ml)中和该混合物，并减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入乙酸乙酯、THF和水以分离有机层。在用饱和盐水洗涤后，用无水硫酸镁进行脱水，并减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入乙醇(100ml)并混合，然后在室温下加入2.0M氢氧化钠水溶液(24.3ml)。在室温下搅拌30分钟后，加入2.0M盐酸(24ml)中和混合物。通过过滤分离沉淀物，并用乙醇/水(1/1)洗涤，得到标题化合物(4.1g)。

(B)4-氟-4-(6-(8-氟-2-甲基咪唑[1,2-a]吡啶-6-基)-8-甲基-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

将4-(6-溴-8-甲基-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-4-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.0g)、双(频那醇合)二硼(692mg)、钾醋(potassium vinegar)(446mg)、[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(11)二氯化物二氯甲烷加合物(93mg)和环戊基甲醚(5mL)的混合物在130℃下于微波辐射下搅拌30分钟，加入水，将混合物在室温下用硅藻土过滤除去固体；然后用乙酸乙酯萃取滤液。在分离有机层后，用饱和盐水洗涤，用无水硫酸镁脱水，减压蒸馏除去挥发性组分，得到粗产物。向所得粗产物中加入6-溴-8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶(624mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯二氯甲烷加合物(93mg)、2.0M碳酸铯水溶液(2.3mL)和DME(10ml)，并将混合物在130℃下于微波辐射下搅拌30分钟。将所得混合物通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化，得到标题化合物(440mg)。

MS:[M+H]

(C)6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)-8-甲基喹唑啉-4-(3H)-酮

将4-氟-4-(6-(8-氟-2-甲基咪唑[1,2-a]吡啶-6-基)-8-甲基-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(114mg)和甲酸(2mL)的混合物在60℃搅拌10分钟；之后，减压蒸馏除去挥发性组分。将硼烷-2-甲吡啶络合物(60mg)加入剩余固体、甲醇(2mL)、乙酸(0.2ml)和37％甲醛水溶液(0.073ml)的混合物中，并将混合物在室温下搅拌过夜。减压蒸馏除去混合物的挥发性组分，将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化，并用乙酸乙酯洗涤所得固体，得到标题化合物(28mg)。

工作实施例90

2-(1-乙基-4-氟哌啶-4-基)-6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-8-甲基喹唑啉-4-(3H)-酮

将4-氟-4-(6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-8-甲基-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(324mg)和甲酸(2mL)的混合物在60℃下搅拌10分钟，然后减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入甲醇(5mL)、乙酸(1mL)和5.0M乙醛/THF溶液(0.382mL)并混合；另外，加入硼烷-2-甲吡啶络合物(102mg),并将混合物在室温下搅拌过夜。减压蒸馏除去挥发性组分，并将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化。用乙酸乙酯和乙醇洗涤所得固体，得到标题化合物(120mg)。

工作实施例91

2-(4-氟-1-异丙基哌啶-4-基)-6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)喹唑啉-4-(3H)-酮

将6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(4-氟哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮(100mg)、丙酮(0.093ml)、氰基硼氢化钠(64mg)、乙酸(0.15ml)和甲醇(3mL)的混合物在60℃搅拌2小时，减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化，并用乙醇/水(1/1)洗涤所得固体，得到标题化合物(45mg)。

工作实施例92

2-(1-乙基-4-氟哌啶-4-基)-6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)喹唑啉-4(3H)-酮

将4-(6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(161mg)和甲酸(2mL)的混合物在70℃下搅拌20分钟，然后减压蒸馏除去挥发性组分。将甲醇(1.5ml)、乙酸(0.1ml)和5.0M乙醛/THF溶液(0.195ml)与剩余的固体混合，进一步加入硼烷-2-甲吡啶络合物(52mg)，并将混合物在室温下搅拌过夜。减压蒸馏除去挥发性组分，并将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化。用乙醇/水(1/1)洗涤所得固体，得到标题化合物(32mg)。

工作实施例93

2-(1-(2,2-二氟乙基)-4-氟哌啶-4-基)-6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)喹唑啉-4-(3H)-酮

在将6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-1-基)-2-(4-氟哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮(200mg)、2,2-二氟乙基三氟甲烷磺酸酯(0.201ml)、碳酸钾(140mg)和DMF(3mL)的混合物在60℃下搅拌过夜后，在室温下加入水(4mL)，并将混合物在相同温度下搅拌3小时。在过滤分离沉淀物并用乙醇/水(1/1)洗涤后，将产物通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化，并用乙酸乙酯洗涤所得固体，得到标题化合物(41mg)。

工作实施例94

8-氟-2-(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)1-6-(2-甲基咪唑[1,2-a]吡啶-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)4-((4-溴-2-氨基甲酰基-6-氟苯基)氨基甲酰基)-4-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯

在室温下，向2-氨基-5-溴-3-氟苯甲酰胺(4.0g)、1-(叔丁氧基羰基)-4-氟哌啶-4-羧酸(5.09g)和吡啶(40mL)的混合物中加入1.7M丙基膦酸酐/乙酸乙酯溶液(15mL),并将混合物在相同温度下搅拌16小时。在减压蒸馏除去挥发性组分后，将剩余的固体通过硅胶柱色谱(乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(3.90g)。

MS:[M+Na]

(B)4-(6-溴-8-氟-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-4-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯

在室温下向4-[(4-溴-2-氨基甲酰基-6-氟苯基)氨基甲酰基]-4-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯(3.9g)和乙醇(78mL)的混合物中加入2.0M氢氧化钠水溶液(12.7mL)。在将混合物在室温下搅拌1小时后，将混合物用2.0M盐酸中和，并通过过滤分离沉淀物，得到标题化合物(3.4g)。

(C)4-氟-4-[8-氟-6-(2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将4-(6-溴-8-氟-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-4-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯(254mg)、双(频那醇合)二硼(174mg)、乙酸钾(112mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物)(23.3mg)和环戊基甲基醚(5mL)的混合物在130℃下于微波辐射条件下搅拌30分钟。在混合物经硅藻土过滤后，用THF水洗，从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。将所得固体加入到6-碘-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶(177mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(23.3mg)、2.0M碳酸钠水溶液(0.57mL)和DME(12mL)中，并将混合物在130℃下于微波辐射条件下搅拌30分钟。混合物通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化，并用乙酸乙酯洗涤所得固体，得到标题化合物(170mg)。

MS:[M+H]

(D)8-氟-2-(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)-6-(2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)喹唑啉-4(3H)-酮

在将4-氟-4-[8-氟-6-(2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(170mg)和甲酸(2mL)的混合物在60℃下搅拌10分钟后，减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入甲醇(2mL)、乙酸(0.5mL)和甲醛水溶液(0.10mL)，然后进一步向其中加入硼烷-2-甲基吡啶络合物(110mg)。然后，将混合物在室温下搅拌过夜。减压蒸馏除去挥发性组分，并将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化。然后，用乙酸乙酯洗涤所得固体，得到标题化合物(88mg)。

工作实施例95

2-(1-乙基-4-氟哌啶-4-基)-8-氟-6-(2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)喹唑啉-4(3H)-酮

在将4-氟-4-[8-氟-6-(2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(224mg)和甲酸(1mL)的混合物在60℃下搅拌10分钟后，减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入甲醇(2mL)、乙酸(0.2mL)和乙醛(0.27mL)，然后进一步向其中加入硼烷-2-甲基吡啶络合物(85mg)。然后，将混合物在室温下搅拌过夜。减压蒸馏除去挥发性组分，并将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化。然后，将所得固体从乙醇/乙酸乙酯/己烷中重结晶，得到标题化合物(30mg)。

工作实施例96

8-氟-2-(4-氟-1-异丙基哌啶-4-基)-6-(2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)喹唑啉-4(3H)-酮

在将4-氟-4-[8-氟-6-(2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(115mg)和甲酸(1.5mL)的混合物在60℃下搅拌10分钟后，减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入甲醇(2mL)、乙酸(0.13mL)和丙酮(0.086mL)，然后进一步向其中加入氰基三氢硼酸钠(58mg)然后。将混合物在60℃下搅拌过夜。减压蒸馏除去挥发性组分，并将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化。然后，用乙酸乙酯洗涤所得固体，得到标题化合物(88mg)。

工作实施例97

8-氟-6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)4-氟-4-[8-氟-6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将4-(6-溴-8-氟-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-4-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯(500mg)、双(频那醇合)二硼(343mg)、乙酸钾(221mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物)(46.0mg)和环戊基甲基醚(5mL)的混合物在130℃下于微波辐射条件下搅拌30分钟。在混合物经硅藻土过滤并用THF洗涤后，从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。将所得固体的混合物，4-氟-4-[8-氟-4-氧代-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼烷-2-基)-3,4-二氢喹唑啉-2-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(553mg)、6-溴-8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶(309mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(46mg)、2.0M碳酸钠水溶液(1.13mL)和DME(12mL)在130℃下于微波辐射条件下搅拌30分钟。混合物通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化，并用水和二异丙基醚洗涤所得固体，得到标题化合物(344mg)。

MS:[M+H]

(B)8-氟-6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

在将4-氟-4-[8-氟-6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(110mg)和甲酸(2mL)的混合物在60℃下搅拌10分钟后，减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入甲醇(2mL)、乙酸(0.5mL)和甲醛水溶液(0.07mL)，然后进一步向其中加入硼烷-2-甲基吡啶络合物(69mg)。然后，将混合物在室温下搅拌过夜。减压蒸馏除去挥发性组分，并将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化。然后，用乙酸乙酯洗涤所得固体，得到标题化合物(50mg)。

工作实施例98

2-(1-乙基-4-氟哌啶-4-基)-8-氟-6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)喹唑啉-4(3H)-酮

在将4-氟-4-[8-氟-6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(215mg)和甲酸(2mL)的混合物在60℃下搅拌10分钟后，减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入甲醇(2mL)、乙酸(0.5mL)和乙醛(0.224mL)，然后进一步向其中加入硼烷-2-甲基吡啶络合物(134mg)。然后，将混合物在室温下搅拌过夜。减压蒸馏除去挥发性组分，并将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化。然后，用乙酸乙酯洗涤所得固体，得到标题化合物(62mg)。

工作实施例99

8-氟-2-(4-氟-1-异丙基哌啶-4-基)-6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)喹唑啉-4(3H)-酮

在将4-氟-4-[8-氟-6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(110mg)和甲酸(2mL)的混合物在60℃下搅拌10分钟后，减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入甲醇(2mL)、乙酸(0.5mL)和丙酮(0.16mL)，然后进一步向其中加入氰基三氢硼酸钠(67.3mg)。然后，将混合物在60℃下搅拌过夜。减压蒸馏除去挥发性组分，并将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化。然后，用乙酸乙酯洗涤所得固体，得到标题化合物(62mg)。

工作实施例100

2-(1-乙基-4-氟哌啶-4-基)-6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-8-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮

(A)3-氨基-6-溴-4-甲基吡啶甲酸甲酯

在室温下向3-氨基-4-甲基吡啶甲酸甲酯(8.0g)和DMF(100mL)的混合物中加入N-溴琥珀酰亚胺(12.9g)，并将混合物在相同温度下搅拌15小时。然后，进一步向其中加入水，并用乙酸乙酯萃取混合物。分离有机层，用水和饱和盐水洗涤，并经硫酸镁干燥，然后减压蒸馏除去挥发性组分。剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(11.3g)。

(B)3-氨基-6-溴-4-甲基吡啶甲酰胺

在室温下向3-氨基-6-溴-4-甲基吡啶甲酸(7.46g)、N-(3-二甲氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺盐酸盐(1/1)(8.05g)、三乙胺(6.7mL)和DMF(100mL)的混合物中加入1H-苯并三唑-1-醇铵盐(1/1)(6.4g)，并将混合物在相同温度下搅拌15小时。然后，向其中加入水，并用乙酸乙酯萃取混合物。将有机层用饱和碳酸氢钠水溶液和水洗涤，然后经硫酸镁干燥，并减压蒸馏除去挥发性组分。用乙酸乙酯/二异丙基醚洗涤所得固体，得到标题化合物(3.71g)。

MS:[M+H]

(C)4-(6-溴-8-甲基-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,2-d]嘧啶-2-基)-4-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯

在室温下向3-氨基-6-溴-4-甲基吡啶甲酰胺(0.96g)、1-(叔丁氧基羰基)-4-氟哌啶-4-羧酸(1.24g)和吡啶(20mL)的混合物中加入1.7M丙基膦酸酐/乙酸乙酯溶液(3.68mL)，并将混合物在相同温度下搅拌15小时。在减压蒸馏除去挥发性组分后，向剩余的固体中加入0.1M盐酸，并用乙酸乙酯萃取混合物。将有机层用水和饱和盐水洗涤，然后经硫酸镁干燥，并减压蒸馏除去挥发性组分。在于室温下向所得固体和乙醇(15mL)的混合物中加入2.0M氢氧化钠水溶液(6.27mL)，并将混合物在相同温度下搅拌2小时后，将混合物用2.0M盐酸中和，并用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和饱和盐水洗涤，然后经硫酸镁干燥，并减压蒸馏除去挥发性组分。然后，将所得固体通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(1.8g)。

MS:[M+H]

(D)8-氟-2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼烷-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶

将6-溴-8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶(433mg)、双(频那醇合)二硼(576mg)、乙酸钾(371mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(77mg)和环戊基甲基醚(7mL)的混合物在130℃下于微波辐射条件下搅拌30分钟。在混合物经硅藻土过滤后，减压蒸馏除去滤液中的挥发性组分，得到标题化合物(552mg)。

(E)4-氟-4-[6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-8-甲基-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,2-d]嘧啶-2-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将8-氟-2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼烷-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶(523mg)、4-(6-溴-8-甲基-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,2-d]嘧啶-2-基)-4-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯(760mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(70.3mg)、2.0M碳酸钠水溶液(2.58mL)和DME(13mL)的混合物在130℃下于微波辐射条件下搅拌30分钟，并在室温下进一步向其中加入水。然后，过滤混合物。用乙酸乙酯萃取滤液，并经硫酸镁干燥，然后通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化。然后，用乙酸乙酯/二异丙基醚洗涤所得固体，得到标题化合物(650mg)。

(F)6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(4-氟哌啶-4-基)-8-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮

在将4-氟-4-[6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-8-甲基-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,2-d]嘧啶-2-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(650mg)和甲酸(2mL)的混合物在70℃下搅拌30分钟后，减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入甲醇和8.0M氨/甲醇溶液，并减压蒸馏除去挥发性组分。然后，用乙酸乙酯洗涤剩余的固体，得到标题化合物(465mg)。

MS:[M+H]

(G)2-(1-乙基-4-氟哌啶-4-基)-6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-8-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮

向6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(4-氟哌啶-4-基)-8-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(148mg)、甲醇(2mL)、乙酸(0.2mL)和乙醛(0.201mL)的混合物中加入硼烷-2-甲基吡啶络合物(57.7mg)，并将混合物在室温下搅拌15小时。减压蒸馏除去挥发性组分，并将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化。然后，用乙酸乙酯洗涤所得固体，得到标题化合物(55mg)。

工作实施例101

2-(4-氟-1-异丙基哌啶-4-基)-6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-8-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮

在室温下向6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(4-氟哌啶-4-基)-8-甲基吡啶并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(168mg)、甲醇(2mL)、乙酸(0.2mL)和丙酮(0.301mL)的混合物中加入氰基三氢硼酸钠(38.5mg)，并将混合物在相同温度下搅拌15小时。然后，减压蒸馏除去挥发性组分。向所得固体中加入5％的氢氧化铵溶液，并减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化，并用乙酸乙酯洗涤所得固体，得到标题化合物(35mg)。

工作实施例102

2-(1-环丙基-4-氟哌啶-4-基)-6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮

将6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(4-氟哌啶-4-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(180mg)、((1-乙氧基环丙氧基)氧基)(三甲基)硅烷(0.274mL)、氰基三氢硼酸钠(57.1mg)、乙酸(0.10mL)和甲醇(3.0mL)的混合物在60℃下搅拌3小时，并减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化，并用乙酸乙酯洗涤所得固体，得到标题化合物(145mg)。

工作实施例103

2-(1-环丙基-4-氟哌啶-4-基)-6-(2-甲基咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-基)-8-甲基喹唑啉-4(3H)-酮

(A)6-溴-2-(4-氟哌啶-4-基)-8-甲基喹唑啉-4(3H)-酮

在将4-(6-溴-8-甲基-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-4-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.0g)和甲酸(10mL)的混合物在60℃下搅拌10分钟后，减压蒸馏除去挥发性组分。用5％氢氧化铵溶液洗涤剩余的固体，得到标题化合物(720mg)。

(B)6-溴-2-(1-环丙基-4-氟哌啶-4-基)-8-甲基喹唑啉-4(3H)-酮

将6-溴-2-(4-氟哌啶-4-基)-8-甲基喹唑啉-4(3H)-酮(718mg)、(1-乙氧基环丙氧基)三甲基硅烷(2.12mL)、氰基三氢硼酸钠(265mg)、乙酸(1.27mL)和甲醇(14mL)的混合物在60℃下搅拌3小时，并减压蒸馏除去挥发性组分。剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化，并用乙酸乙酯洗涤所得固体，得到标题化合物(530mg)。

MS:[M+H]

(C)2-(1-环丙基-4-氟哌啶-4-基)-6-(2-甲基咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-基)-8-甲基喹唑啉-4(3H)-酮

将6-溴-2-甲基咪唑并[1,2-a]嘧啶(170mg)、双(频那醇合)二硼(265mg)、乙酸钾(236mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(32.7mg)和环戊基甲基醚(2mL)的混合物在130℃下于微波辐射条件下搅拌4小时。在将所得混合物通过硅藻土过滤并用THF洗涤后，从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。将所得物质、6-溴-2-(4-环丙基-1-氟哌啶-4-基)-8-甲基喹唑啉-4(3H)-酮(250mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯二氯甲烷加合物(26.8mg)、2.0M碳酸钠水溶液(0.986mL)和1,2-二甲氧基乙烷(15mL)的混合物在130℃下于微波辐射条件下搅拌60分钟。所得混合物通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化，用乙酸乙酯洗涤所得固体，得到标题化合物(19mg)。

工作实施例104

2-(1-环丙基-4-氟哌啶-4-基)-6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮

(A)5-氨基-2-氯异烟酰胺

在室温下，向5-氨基-2-氯异烟酸(3.07g)、N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺盐酸盐(1/1)(4.09g)、三乙胺(3.7mL)和DMF(50mL)的混合物中加入1H-苯并三唑-1-醇铵盐(1/1)(3.25g)，并将混合物在相同温度下搅拌15小时。然后，进一步向其中加入水，并用乙酸乙酯萃取混合物。将有机层用饱和碳酸氢钠水溶液和饱和盐水洗涤，然后经硫酸镁干燥，并减压蒸馏除去挥发性组分。用乙酸乙酯/二异丙基醚洗涤所得固体，得到标题化合物(1.92g)。

(B)4-[(4-氨基甲酰基-6-氯吡啶-3-基)氨基甲酰基-4-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯

将5-氨基-2-氯异烟酰胺(1.92g)、1-(叔丁氧基羰基)-4-氟哌啶-4-羧酸(2.77g)、1.7M丙基膦酸酐/乙酸乙酯溶液(9.87mL)和吡啶(20mL)的混合物在室温下搅拌过夜，减压蒸馏除去挥发性组分。在进一步向其中加入0.1M盐酸后用乙酸乙酯萃取，混合物。将所得有机层用水和饱和盐水洗涤，然后经无水硫酸镁干燥，减压蒸馏除去挥发性组分。用二异丙基醚洗涤剩余的固体，得到标题化合物(3.93g)。

(C)4-(6-氯-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]-4-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯

在室温下向4-[(4-氨基甲酰基-6-氯吡啶-3-基)氨基甲酰基-4-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯(3.93g)和乙醇(35mL)的混合物中滴加2.0M氢氧化钠水溶液(14.7mL)。在将所得混合物在室温下搅拌2小时并用2.0M盐酸中和后，向其中加入水，然后通过过滤分离沉淀物，并用乙醇/水洗涤，得到标题化合物(3.68g)。

(D)6-氯-2-(4-氟哌啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮

在将4-(6-氯-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]-4-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.0g)和甲酸(5mL)的混合物在70℃下搅拌30分钟后，减压蒸馏除去挥发性组分。用5％氢氧化铵溶液和水洗涤剩余的固体，得到标题化合物(735mg)。

(E)6-氯-2-(1-环丙基-4-氟哌啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮

将6-氯-2-(4-氟哌啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮(306mg)、(1-乙氧基环丙氧基)三甲基硅烷(1.1mL)、氰基三氢硼酸钠(136mg)、乙酸(0.62mL)和甲醇(6mL)的混合物在60℃下搅拌2小时，并在室温下进一步向其中加入饱和碳酸氢钠水溶液，然后混合。然后，用乙酸乙酯萃取混合物。将所得有机层用水和饱和盐水洗涤，然后经无水硫酸镁干燥，并减压蒸馏除去挥发性组分。用二异丙基醚洗涤剩余的固体，得到标题化合物(215mg)。

(F)2-(1-环丙基-4-氟哌啶-4-基)-6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮

在将6-溴-8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶(156mg)、双(频那醇合)二硼(208mg)、乙酸钾(134mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(27.8mg)和环戊基甲基醚(3mL)的混合物在130℃下于微波辐射条件下搅拌30分钟后，将所得混合物通过硅藻土过滤，从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。将所得物质、6-氯-2-(1-环丙基-4-氟哌啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮(200mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯二氯甲烷加合物(25.3mg)、2.0M碳酸钠水溶液(0.62mL)和1,2-二甲氧基乙烷(3mL)的混合物在130℃下于微波辐射条件下搅拌30分钟，并在室温下进一步向其中加入水，然后混合。然后，通过硅藻土过滤除去残渣。用乙酸乙酯萃取所得滤液，并将有机层经无水硫酸镁干燥。然后，减压蒸馏除去挥发性组分。剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化，得到标题化合物(150mg)。

工作实施例105

2-(1-环丙-4-氟哌啶-4-基)-8-氟-6-(2-甲基咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)4-氟-4-[8-氟-6-(2-甲基咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将6-溴-2-甲基咪唑并[1,2-a]嘧啶(300mg)、双(频那醇合)二硼(431mg)、乙酸钾(278mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(57.8mg)和环戊基甲基醚(3mL)的混合物在130℃下于微波辐射条件下搅拌2小时。在将所得混合物通过硅藻土过滤后，从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。将所得物质、4-(6-溴-8-氟-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基]-4-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯(500mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯二氯甲烷加合物(46.0mg)、2.0M碳酸钠水溶液(1.13mL)和1,2-二甲氧基乙烷(13mL)的混合物在130℃下于微波辐射条件下搅拌30分钟，并滤出沉淀物，然后用水洗涤。将所得固体溶解在7N氨/甲醇溶液中，并向其中加入活性炭。所得混合物通过硅藻土过滤，并用甲醇洗涤。从所得滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。用甲醇/乙酸乙酯洗涤剩余的固体，得到标题化合物(322mg)。

(B)8-氟-2-(4-氟哌啶-4-基)-6-(2-甲基咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-基)喹唑啉-4(3H)-酮

在将4-氟-4-[8-氟-6-(2-甲基咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(322mg)和甲酸(3mL)的混合物在60℃下搅拌10分钟后，减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入7M氨/甲醇溶液，并减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余物质通过硅胶柱色谱(甲醇)纯化，得到标题化合物(196mg)。

(C)2-(1-环丙-4-氟哌啶-4-基)-8-氟-6-(2-甲基咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-基)喹唑啉-4(3H)-酮

将8-氟-2-(4-氟哌啶-4-基)-6-(2-甲基咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-基)喹唑啉-4(3H)-酮(70mg)、((1-乙氧基环丙基)氧基)(三甲基)硅烷(0.18mL)、氰基三氢硼酸钠(22mg)、乙酸(0.053mL)和甲醇(3mL)的混合物在60℃下搅拌3小时，并减压蒸馏除去挥发性组分。剩余物质通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化，并用乙酸乙酯洗涤所得固体，得到标题化合物(8mg)。

MS:[M+H]

工作实施例106

2-(1-环丙基哌啶-4-基)-6-(4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮

(A)4-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,2-d]嘧啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

在将1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-羧酸(1.27g)、3-氨基-6-溴吡啶甲酰胺(1.00g)、1.7M丙基膦酸酐/乙酸乙酯溶液(4.1mL)和吡啶(20mL)的混合物在室温下搅拌16小时后，减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入乙酸乙酯和水，然后分离有机层，用饱和碳酸氢钠水溶液和饱和盐水洗涤，然后经无水硫酸镁干燥。然后，减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入乙醇(20mL)，然后混合，并在室温下进一步向其中加入2.0M氢氧化钠水溶液(4.63mL)。然后，将混合物在室温下搅拌2小时，并用2.0M盐酸中和。滤出沉淀物，得到标题化合物(1.20g)。

(B)6-溴-2-(哌啶-4-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮

在将4-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,2-d]嘧啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.23g)和甲酸(12mL)的混合物在60℃下搅拌10分钟后，减压蒸馏除去挥发性组分。在向剩余的固体中加入5％氢氧化铵溶液后，将混合物在室温下搅拌30分钟。然后，用水洗涤所得固体，得到标题化合物(929mg)。

MS:[M+H]

(C)6-溴-2-(1-环丙基哌啶-4-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮

将6-溴-2-(哌啶-4-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(929mg)、((1-乙氧基环丙基)氧基)(三甲基)硅烷(3.02mL)、氰基三氢硼酸钠(378mg)、乙酸(1.80mL)和甲醇(20mL)的混合物在60℃下搅拌16小时并冷却至室温。滤出所得沉淀物，然后用甲醇和水洗涤，得到标题化合物(630mg)。

(D)2-(1-环丙基哌啶-4-基)-6-(4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮

将4-氟-2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼烷-2-基)-1,3-苯并噁唑(286mg)、6-溴-2-(1-环丙基哌啶-4-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮(300mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯二氯甲烷加合物(35.1mg)、2.0M碳酸钠水溶液(1.29mL)和1,2-二甲氧基乙烷(15mL)的混合物在130℃下于微波辐射条件下搅拌40分钟，滤出沉淀物，然后用1,2-二甲氧基乙烷和水洗涤。将所得固体溶解在7N氨/甲醇溶液中，并将混合物通过硅胶(NH)过滤。然后，从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。用乙酸乙酯和乙醇/水洗涤剩余的固体，得到标题化合物(70mg)。

工作实施例107

2-(1-环丙基-4-氟哌啶-4-基)-6-(4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮

将4-氟-2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼烷-2-基)-1,3-苯并噁唑(250mg)、6-氯-2-(4-氟-1-环丙基哌啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮(243mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯二氯甲烷加合物(30.7mg)、2.0M碳酸钠水溶液(1.13mL)和1,2-二甲氧基乙烷(15mL)的混合物在130℃下于微波辐射条件下搅拌40分钟，并滤出沉淀。向所得固体中加入乙酸乙酯和水，然后分离有机层，用饱和盐水洗涤，并经无水硫酸镁干燥。然后，减压蒸馏除去挥发性组分。用乙酸乙酯、甲醇和水洗涤剩余的固体，得到标题化合物(40mg)。

工作实施例108

2-(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)-6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮

(A)4-氟-4-[6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将6-溴-8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶(360mg)、双(频那醇合)二硼(478mg)、乙酸钾(308mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(64.1mg)和环戊基甲基醚(5mL)的混合物在130℃下于微波辐射条件下搅拌30分钟。在将所得混合物通过硅藻土过滤后，从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。将所得物质、4-(6-氯-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]-4-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯(600mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯二氯甲烷加合物(64.0mg)、2.0M碳酸钠水溶液(1.57mL)和1,2-二甲氧基乙烷(9mL)的混合物在130℃下于微波辐射条件下搅拌30分钟。在向混合物中加入水并通过过滤除去不溶性组分后，用乙酸乙酯萃取滤液。将所得有机层经无水硫酸镁干燥。将所得混合物通过硅胶(NH)过滤，并从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。用乙酸乙酯洗涤剩余的固体，得到标题化合物(573mg)。

(B)6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(4-氟哌啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮

在将4-氟-4-[6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(573mg)和甲酸(2mL)的混合物在70℃下搅拌30分钟后，减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入7M氨/甲醇溶液(5mL)和水(5mL)，然后过滤沉淀物。用乙醇/水洗涤所得固体，得到标题化合物(403mg)。

(C)2-(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)-6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮

向6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(4-氟哌啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮(122mg)、甲醇(2mL)、乙酸(0.2mL)和37％甲醛水溶液(0.125mL)的混合物中加入硼烷-2-甲基吡啶络合物(49.5mg)，并将混合物在室温下搅拌15小时。从所得混合物中减压蒸馏除去挥发性组分，并将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化。用乙酸乙酯洗涤所得固体，得到标题化合物(55.0mg)。

工作实施例109

2-(1-乙基-4-氟哌啶-4-基)-6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮

向6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(4-氟哌啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮(128mg)、甲醇(2mL)、乙酸(0.2mL)和乙醛(0.18mL)的混合物中加入硼烷-2-甲基吡啶络合物(51.7mg)，并将混合物在室温下搅拌15小时。从所得混合物中减压蒸馏除去挥发性组分，并将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化。用乙酸乙酯洗涤所得固体，得到标题化合物(55.0mg)。

工作实施例110

2-[4-氟-1-(2-甲氧基乙基)哌啶-4-基]-6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)6-溴-2-(4-氟哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮

在将4-(6-溴-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-4-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.99g)和甲酸(10mL)的混合物在70℃下搅拌30分钟后，减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入7M氨/甲醇溶液(5mL)和水(5mL)，然后减压蒸馏除去挥发性组分。然后，用水洗涤剩余的固体，得到标题化合物(750mg)。

(B)6-溴-2-[4-氟-1-(2-甲氧基乙基)哌啶-4-基]喹唑啉-4(3H)-酮

在将6-溴-2-(4-氟哌啶-4-基)喹唑啉-4(3H)-酮(400mg)、1-氯-2-甲氧基乙烷(0.123mL)、碳酸钾(339mg)、碘化四丁基铵(45.3mg)和DMF(5mL)的混合物在90℃下搅拌过夜后，在室温下向其中加入水，然后混合。用乙酸乙酯萃取混合物。将所得有机层用水和饱和盐水洗涤，然后经无水硫酸镁干燥，并减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，己烷/乙酸乙酯)纯化，得到标题化合物(150mg)。

(C)2-[4-氟-1-(2-甲氧基乙基)哌啶-4-基]-6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)喹唑啉-4(3H)-酮

将6-溴-8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶(116mg)、双(频那醇合)二硼(154mg)、乙酸钾(99.5mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(20.7mg)和环戊基甲基醚(2mL)的混合物在130℃下于微波辐射条件下搅拌60分钟。在将混合物通过硅藻土过滤后，从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。将所得物质、6-溴-2-[4-氟-1-(2-甲氧基乙基)哌啶-4-基]喹唑啉-4(3H)-酮(150mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯二氯甲烷加合物(15.9mg)、2.0M碳酸钠水溶液(0.586mL)和1,2-二甲氧基乙烷(15mL)的混合物在130℃下于微波辐射条件下搅拌50分钟。在通过过滤除去不溶性组分后，向滤液中加入乙酸乙酯和水，并分离有机层。将所得有机层用饱和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，然后减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体通过硅胶柱色谱(甲醇/乙酸乙酯)纯化，并用乙酸乙酯和水洗涤，得到标题化合物(97mg)。

工作实施例111

6-(4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)-2-(4-氟哌啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮

(A)4-氟-4-[6-(4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将4-氟-2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼烷-2-基)-1,3-苯并噁唑(261mg)、4-(6-氯-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)-4-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯(300mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(72.1mg)、2.0M碳酸钠水溶液(1.18mL)和1,2-二甲氧基乙烷(15mL)的混合物在130℃下于微波辐射条件下搅拌40分钟。向所得混合物中加入乙酸乙酯和水，然后分离有机层。将所得有机层用水和饱和盐水洗涤，然后经无水硫酸镁干燥，并减压蒸馏除去挥发性组分。用乙酸乙酯和乙醇/水洗涤剩余的固体，得到标题化合物(70mg)。

(B)6-(4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)-2-(4-氟哌啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮

在将4-氟-4-[6-(4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(72mg)和甲酸(1mL)的混合物在60℃下搅拌10分钟后，减压蒸馏除去挥发性组分。在向剩余的固体中加入5％氢氧化铵溶液后，减压蒸馏除去挥发性组分，并用乙酸乙酯和水洗涤所得固体，得到标题化合物(30.0mg)

工作实施例112

6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-[1-(2-甲氧基乙基)哌啶-4-基]吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮

(A)4-[(4-氨基甲酰基-6-氯吡啶-3-基)氨基甲酰基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

在将1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-羧酸(3.38g)、5-氨基-2-氯异烟酸(2.53g)、1.7M丙基膦酸酐/乙酸乙酯溶液(13mL)和吡啶(30mL)的混合物在室温下搅拌过夜后，减压蒸馏除去挥发性组分。向其中进一步加入0.1M盐酸，并用乙酸乙酯萃取混合物。将所得有机层用水和饱和盐水洗涤，然后经无水硫酸镁干燥，并减压蒸馏除去挥发性组分。用二异丙基醚洗涤剩余固体，得到标题化合物(4.94g)。

MS:[M+Na]

(B)4-(6-氯-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

向4-[(4-氨基甲酰基-6-氯吡啶-3-基)氨基甲酰基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(4.94g)中加入乙醇(40mL)，然后混合，并在室温下进一步向其中加入2.0M氢氧化钠水溶液(19.4mL)。然后，将混合物在相同温度下搅拌2小时，并用2.0M盐酸中和。向所得混合物中加入水，通过过滤分离沉淀物，并用乙醇/水(1/1)洗涤，得到标题化合物(4.47g)。

MS:[M+H]

(C)6-氯-2-(哌啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮

在将4-(6-氯-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(3.41g)和甲酸(15mL)的混合物在70℃下搅拌30分钟后，减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中加入5％氢氧化铵溶液，滤出沉淀物，并用水洗涤，得到标题化合物(2.91g)。

(D)6-氯-2-[1-(2-甲氧基乙基)哌啶-4-基]吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮

在将6-氯-2-(哌啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮(1.20g)、1-氯-2-甲氧基乙烷(0.455mL)、碳酸钾(1.25g)、碘化四丁基铵(167mg)和DMF(15mL)的混合物在90℃搅拌过夜后，并在室温下进一步向其中加入饱和盐水，然后混合。用THF/1,2-二甲氧基乙烷萃取混合物。将所得有机层用饱和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，然后减压蒸馏除去挥发性组分。用二异丙基醚/乙酸乙酯洗涤剩余固体，得到标题化合物(701mg)。

(E)6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-[1-(2-甲氧基乙基)哌啶-4-基]吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮

将6-溴-8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶(120mg)、双(频那醇合)二硼(160mg)、乙酸钾(103mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(21.4mg)和环戊基甲基醚(3mL)的混合物在130℃下于微波辐射条件下搅拌30分钟。在将所得混合物通过硅藻土过滤后，从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。将所得物质、6-氯-2-[1-(2-甲氧基乙基)哌啶-4-基]吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮(155mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(19.6mg)、2.0M碳酸钠水溶液(0.48mL)和1,2-二甲氧基乙烷(3mL)的混合物在130℃下于在微波辐射条件下搅拌30分钟。在向所得混合物中加入水并通过过滤除去不溶性组分后，用乙酸乙酯萃取滤液。在将所得有机层经无水硫酸镁干燥后，减压蒸馏除去挥发性组分。在将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化后，用乙酸乙酯洗涤所得固体，得到标题化合物(101mg)。

工作实施例113

6-(4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)-2-[1-(2-甲氧基乙基)哌啶-4-基]吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮

将6-溴-4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑(202mg)、双(频那醇合)二硼(268mg)、乙酸钾(173mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(35.9mg)和环戊基甲基醚(3mL)的混合物在130℃下于微波辐射条件下搅拌30分钟。在将所得混合物通过硅藻土过滤后，从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。将所得物质、6-氯-2-[1-(2-甲氧基乙基)哌啶-4-基]吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮(200mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(101mg)、2.0M碳酸钠水溶液(0.62mL)和1,2-二甲氧基乙烷(4mL)的混合物在130℃下于在微波辐射条件下搅拌30分钟。在向所得混合物中加入水并通过过滤除去不溶性组分后，用乙酸乙酯/THF萃取滤液。在将所得有机层经无水硫酸镁干燥后，将混合物通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化，并用乙酸乙酯洗涤所得固体，得到标题化合物(98.9mg)。

工作实施例114

2-(1-环丙基哌啶-4-基)-6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮

(A)6-氯-2-(1-环丙基哌啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮

将6-氯-2-(哌啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮(1.0g)、((1-乙氧基环丙基)氧基)(三甲基)硅烷(3.8mL)、氰基三氢硼酸钠(475mg)、乙酸(2.27mL)和甲醇(14mL)的混合物在60℃下搅拌15小时，并在室温下进一步向其中加入饱和碳酸氢钠水溶液，并将它们混合。然后，分离有机层。将所得有机层用水和饱和盐水洗涤，然后经无水硫酸镁干燥，并减压蒸馏除去挥发性组分。用二异丙基醚洗涤剩余的固体，得到标题化合物(910mg)。

MS:[M+H]

(B)2-(1-环丙基哌啶-4-基)-6-(8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮

将6-溴-8-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶(293mg)、双(频那醇合)二硼(390mg)、乙酸钾(251mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(52.3mg)和环戊基甲基醚(3mL)的混合物在130℃下于微波辐射条件下搅拌60分钟。在将所得混合物通过硅藻土过滤后，从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。将所得物质、6-氯-2-(1-环丙基哌啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮(300mg)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物)(40.2mg)、2.0M碳酸钠水溶液(1.48mL)和1,2-二甲氧基乙烷(15mL)的混合物在130℃下于微波辐射条件下于搅拌50分钟，并滤出沉淀。滤液通过硅胶柱色谱(甲醇/乙酸乙酯)纯化，用乙酸乙酯洗涤，得到标题化合物(62mg)。

MS:[M+H]

工作实施例115

2-(1-环丙基哌啶-4-基)-6-(4-氟-2-甲基-1,3-苯并噁唑-6-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮

将4-氟-2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼烷-2-基)-1,3-苯并噁唑(409mg)、6-氯-2-(1-环丙基哌啶-4-基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4(3H)-酮(300mg)、双(三叔丁基膦)钯(0)(50.3mg)、2.0M碳酸钠水溶液(1.48mL)和1,2-二甲氧基乙烷(15mL)的混合物在130℃下于微波辐射条件下于搅拌50分钟，并滤出沉淀物。将滤液通过硅胶柱色谱(己烷/乙酸乙酯)纯化，得到标题化合物(27mg)。

工作实施例116

6-(4-环丙基哌嗪-1-基)-2-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-羧酸乙酯

在将4-氯-6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-羧酸乙酯(1g)、钯-活性炭(10％钯)(261mg)、三乙胺(1.16mL)、乙醇(150mL)和THF(50mL)的混合物在室温下于常压和氢气气氛下搅拌13分钟后，通过过滤除去催化剂，并从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。所得物质通过硅胶柱色谱(己烷/乙酸乙酯)纯化，得到标题化合物(553mg)。

(B)6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-羧酸

向6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-羧酸乙酯(545mg)和乙醇(6mL)的混合物中加入2.0M氢氧化钠水溶液(6.64mL)，并将混合物在室温下搅拌10分钟。然后，减压蒸馏除去挥发性组分，并在室温下向其中加入2.0M盐酸以将pH值调节至约3。滤出所得沉淀物，并用水、乙醇和乙酸乙酯洗涤所得固体，得到标题化合物(439mg)。

(C)N-[2-氨基甲酰基-4-(4-环丙基哌嗪-1-基)苯基]-6-甲基吡唑[1,5-a]吡嗪-2-甲酰胺

将6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-羧酸(300mg)、1.7M丙基膦酸酐/乙酸乙酯溶液(1.49mL)和吡啶(5mL)的混合物在室温下搅拌1小时，并进一步向其中加入2-氨基-5-(4-环丙基哌啶-1-基)苯甲酰胺(529mg)。然后，将混合物在室温下搅拌90分钟。在减压蒸馏除去挥发性组分后，向剩余的固体中加入水(2mL)和15％碳酸钾水溶液(1mL)，并将混合物在室温下搅拌10分钟。然后，用水、甲醇和乙酸乙酯洗涤通过过滤沉淀物获得的固体。将所得固体在THF/甲醇中搅拌，并滤出沉淀物。然后，用甲醇和乙酸乙酯洗涤所得固体，得到标题化合物(636mg)。

(D)6-(4-环丙基哌嗪-1-基)-2-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)喹唑啉-4(3H)-酮

将N-[2-氨基甲酰基-4-(4-环丙基哌嗪-1-基)苯基]-6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲酰胺(610mg)、叔丁醇钾(催化量)和1-丁醇(20mL)的混合物在120℃下搅拌10小时并冷却至室温。滤出所得沉淀物，并用水、乙醇和乙酸乙酯洗涤所得固体，得到标题化合物(405mg)。

工作实施例117

6-(4-环丙基哌嗪-1-基)-2-(5,7-二甲基咪唑并[1,2-c]嘧啶-2-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)5,7-二甲基咪唑并[1,2-c]嘧啶-2-羧酸乙酯

在室温下向2,6-二甲基-4-氨基嘧啶(5.0g)和乙醇(20mL)的混合物中加入3-溴-2-氧代丙酸乙酯(9.9g)，并将混合物在回流下加热1小时。通过减压蒸馏除去挥发性组分来浓缩所得混合物，并滤出沉淀物。然后，从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分。向所得物质中加入饱和碳酸氢钠水溶液，并用乙酸乙酯萃取混合物。将有机层用水和饱和盐水洗涤，然后经无水硫酸钠干燥，并减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余物质通过硅胶柱色谱(乙酸乙酯/己烷)纯化，并从乙醇/二异丙基醚中重结晶，得到标题化合物(837mg)。

(B)5,7-二甲基咪唑并[1,2-c]嘧啶-2-羧酸

向5,7-二甲基咪唑并[1,2-c]嘧啶-2-羧酸乙酯(930mg)和乙醇(10mL)的混合物中加入2.0M氢氧化钠水溶液(848mg)，然后将混合物在室温下搅拌1小时，以及在50℃下搅拌1小时。减压蒸馏除去挥发性组分，并在室温下向其中加入6.0M盐酸，以将pH值调节至3-4。混合物通过HP-20树脂柱(水和丙酮)纯化，并从水/丙酮中重结晶，得到标题化合物(742mg)。

(C)N-[2-氨基甲酰基-4-(4-环丙基哌嗪-1-基)苯基]-(5,7-二甲基咪唑并[1,2-c]嘧啶-2-甲酰胺

将5,7-二甲基咪唑并[1,2-c]嘧啶-2-羧酸(250mg)、1.7M丙基膦酸酐/乙酸乙酯溶液(1.25mL)和吡啶(5mL)的混合物在室温下搅拌30分钟，并进一步向其中加入2-氨基-5-(4-环丙基哌啶-1-基)苯甲酰胺(441mg)。然后，将混合物在室温下搅拌3小时。在减压蒸馏除去挥发性组分后，向剩余的固体中加入水(2mL)和15％碳酸钾水溶液(1mL)，并将混合物在室温下搅拌30分钟。滤出沉淀物，并用水、甲醇和二异丙基醚洗涤所得固体，得到标题化合物(262mg)。

(D)6-(4-环丙基哌嗪-1-基)-2-(5,7-二甲基咪唑并[1,2-c]嘧啶-2-基)喹唑啉-4(3H)-酮

将N-[2-氨基甲酰基-4-(4-环丙基哌嗪-1-基)苯基]-(5,7-二甲基咪唑并[1,2-c]嘧啶-2-甲酰胺(260mg)、叔丁醇钾(催化量)和1-丁醇(10mL)的混合物在120℃下搅拌10小时并冷却至室温。在滤出所得沉淀物并用乙醇洗涤后，将所得固体从THF/甲醇/水中重结晶，得到标题化合物(148mg)。

工作实施例118

6-(4-环丙基哌嗪-1-基)-2-(2-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)6-氯-2-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪

将3-氨基-6-氯哒嗪(5.5g)、1-氯丙酮(3.93g)和乙醇(20mL)的混合物在回流下加热3小时。向其中加入1-氯丙酮(1.85mL)，并将混合物在回流下加热1小时。在再次向其中加入1-氯丙酮(1.85g)并将混合物在回流下加热2小时后，减压蒸馏除去挥发性组分。滤出所得沉淀物，用乙醇洗涤，然后向所得固体中加入水和饱和碳酸氢钠水溶液。然后，用乙酸乙酯/THF萃取混合物。将所得有机层用水和饱和盐水洗涤，然后经无水硫酸钠干燥，并减压蒸馏除去挥发性组分。将所得固体从甲醇/二异丙基醚中重结晶，得到标题化合物(691mg)。

(B)2-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-羧酸乙酯

在将6-氯-2-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪(1.38g)、二氯[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷(602mg)、二异丙基乙胺(3.19g)和甲醇(10mL)的混合物在120℃下于一氧化碳气氛(0.5兆帕)下搅拌8小时后，减压蒸馏除去挥发性组分。剩余物质通过硅胶柱色谱(乙酸乙酯/甲醇)纯化，得到标题化合物(318mg)。

(C)2-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-羧酸

向2-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-羧酸乙酯(310mg)和乙醇(4mL)的混合物中加入2.0M氢氧化钠水溶液(4.05mL)，并将混合物在室温下搅拌10分钟。减压蒸馏除去挥发性组分，并在室温下向其中加入2.0M盐酸，以将pH值调节至约3。滤出所得沉淀物，然后用水、乙醇和乙酸乙酯洗涤，得到标题化合物(144mg)。

(D)N-[2-氨基甲酰基-4-(4-环丙基哌嗪-1-基)苯基]-2-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-甲酰胺

将2-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-羧酸(140mg)、1.7M丙基膦酸酐/乙酸乙酯溶液(0.65mL)和吡啶(3mL)的混合物在室温下搅拌1小时，并进一步向其中加入2-氨基-5-(4-环丙基哌啶-1-基)苯甲酰胺(229mg)。然后，将混合物在室温下搅拌3小时。在减压蒸馏除去挥发性组分后，向剩余的固体中加入水(2mL)和15％碳酸钾水溶液(1mL)，并将混合物在室温下搅拌30分钟。用水、甲醇和二异丙基醚洗涤通过过滤沉淀物获得的固体，得到标题化合物(275mg)。

(E)6-(4-环丙基哌嗪-1-基)-2-(2-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-基)喹唑啉-4(3H)-酮

将N-[2-氨基甲酰基-4-(4-环丙基哌嗪-1-基)苯基]-2-甲基咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-甲酰胺(260mg)和1-丁醇(10mL)的混合物在120℃下搅拌2小时，并向其中加入叔丁醇钾(催化量)。然后，将混合物在120℃下搅拌3小时，并冷却至室温。滤出所得沉淀物，并用乙醇洗涤，得到标题化合物(158mg)。

工作实施例119

2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(4-异丙基哌嗪-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮双三氟乙酸酯

(A)2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-碘喹唑啉-4(3H)-酮

在室温下，向2-氨基-5-碘苯甲酰胺(2.00g)、4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲醛(1.34g)和乙醇(65mL)的混合物中加入碘(2.91g)，并将混合物在回流下加热3天。在将混合物冷却至室温后，滤出所得沉淀物，并用乙醇洗涤。用乙醇/水(2:1)和乙醇洗涤所得固体，得到标题化合物(2.86g)。

(B)2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(4-异丙基哌嗪-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮双三氟乙酸酯

将2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-碘喹唑啉-4(3H)-酮(125mg)、叔丁醇钾(135mg)、(2-二环己基膦基-2’,4’,6’-三异丙基-1,1’-联苯基)[2-(2’-氨基-1,1’-联苯基)]甲磺酸钯(II)(25.5mg)、叔戊醇(1mL)和1-异丙基哌嗪(115mg)的混合物在180℃下于微波辐射条件下搅拌1小时。在向其中加入二甲基亚砜(1mL)和甲醇(3mL)后，将混合物通过硅藻土过滤，通过将滤液加热至60℃来蒸馏除去挥发性组分。将所得物质通过HPLC[YMC-Triart C18，含0.1％三氟乙酸的乙腈/含0.1％三氟乙酸的水]纯化，得到标题化合物(32.6mg)。

MS:[M-2TFA+H]

工作实施例120

6-[4-(环丙基甲基)哌嗪-1-基]-2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)喹唑啉-4(3H)-酮三氟乙酸酯

将2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-碘喹唑啉-4(3H)-酮(83.4mg)、叔丁醇钾(89.8mg)、(2-二环己基膦基-2’,4’,6’-三异丙基-1,1’-联苯基)[2-(2’-氨基-1,1’-联苯基)]甲磺酸钯(II)(17mg)、叔戊醇(1mL)和1-环丙基甲基)哌嗪(84mg)的混合物在180℃下于微波辐射条件下搅拌1小时。在向其中加入二甲基亚砜(1mL)和甲醇(3mL)后，将混合物通过硅藻土过滤，通过将滤液加热至60℃来蒸馏除去挥发性组分。将所得物质通过HPLC[YMC-Triart C18，含0.1％三氟乙酸的乙腈/含0.1％三氟乙酸的水]纯化，得到标题化合物(33.3mg)。

MS:[M-2TFA+H]

工作实施例121

(S)-2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(六氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1H)-基)喹唑啉-4(3H)-酮三氟乙酸酯

将2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-碘喹唑啉-4(3H)-酮(83.4mg)、叔丁醇钾(89.8mg)、(2-二环己基膦基-2’,4’,6’-三异丙基-1,1’-联苯基)[2-(2’-氨基-1,1’-联苯基)]甲磺酸钯(II)(17mg)、叔戊醇(1mL)和(S)-八氢吡咯并[1,2-a]吡嗪(76mg)的混合物在180℃下于微波辐射条件下搅拌1小时。在向其中加入二甲基亚砜(1mL)和甲醇(3mL)后，将混合物通过硅藻土过滤，通过将滤液加热至60℃来蒸馏除去挥发性组分。将所得物质通过HPLC[YMC-Triart C18，含0.1％三氟乙酸的乙腈/含0.1％三氟乙酸的水]纯化，得到标题化合物(14.2mg)。

MS:[M-2TFA+H]

工作实施例122

6-(3,3-二甲基哌嗪-1-基)-2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)喹唑啉-4(3H)-酮双三氟乙酸酯

将2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-碘喹唑啉-4(3H)-酮(125mg)、叔丁醇钾(134.7mg)、(2-二环己基膦基-2’,4’,6’-三异丙基-1,1’-联苯基)[2-(2’-氨基-1,1’-联苯基)]甲磺酸钯(II)(25.5mg)、叔戊醇(1mL)和2,2-二甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(193mg)的混合物在180℃下于微波辐射条件下搅拌1小时。在向其中加入二甲基亚砜(1mL)和甲醇(3mL)并将混合物通过硅藻土过滤后，通过将滤液加热至60℃蒸馏除去挥发性组分。将所得物质通过HPLC[YMC-Triart C18，含0.1％三氟乙酸的乙腈/含0.1％三氟乙酸的水]纯化。向所得固体中加入三氟乙酸(0.3mL)并将混合物在室温下搅拌1小时后，蒸馏除去挥发性组分，得到标题化合物(33.5mg)。

MS:[M-2TFA+H]

工作实施例123

2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基)喹唑啉-4(3H)-酮双三氟乙酸酯

将2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-碘喹唑啉-4(3H)-酮(125mg)、叔丁醇钾(134.7mg)、(2-二环己基膦基-2’,4’,6’-三异丙基-1,1’-联苯基)[2-(2’-氨基-1,1’-联苯基)]甲磺酸钯(II)(25.5mg)、叔戊醇(1mL)和4,7-二氮杂螺[2.5]辛烷-4-羧酸叔丁酯(191mg)的混合物在180℃下于微波辐射条件下搅拌1小时。在向其中加入二甲基亚砜(1mL)和甲醇(3mL)并将混合物通过硅藻土过滤后，通过将滤液加热至60℃蒸馏除去挥发性组分。将所得物质通过HPLC[YMC-Triart C18，含0.1％三氟乙酸的乙腈/含0.1％三氟乙酸的水]纯化。向所得固体中加入三氟乙酸(0.3mL)并将混合物在室温下搅拌1小时后，蒸馏除去挥发性组分，得到标题化合物(33.5mg)。

MS:[M-2TFA+H]

工作实施例124

2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(八氢-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2-基)喹唑啉-4(3H)-酮(优对映体(eutomer))

将2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-碘喹唑啉-4(3H)-酮(83.4mg)、叔丁醇钾(89.8mg)、(2-二环己基膦基-2’,4’,6’-三异丙基-1,1’-联苯基)[2-(2’-氨基-1,1’-联苯基]甲磺酸钯(II)(17mg)、叔戊醇(1mL)和八氢-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪(84mg)(外消旋物)的混合物在180℃下于微波辐射条件下搅拌1小时。在向其中加入二甲基亚砜(1mL)和甲醇(3mL)并将混合物通过硅藻土过滤后，通过将滤液加热至60℃蒸馏除去挥发性组分。将所得物质通过HPLC[YMC-Triart C18，含0.1％三氟乙酸的乙腈/含0.1％三氟乙酸的水]纯化。将所得固体进行光学拆分(CHIRALCEL OJ-H，己烷/乙醇/二乙胺)，得到标题化合物(9.6mg)。

(优对映体)MS:[M+H]

工作实施例125

2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(八氢-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2-基)喹唑啉-4(3H)-酮(优对映体)和2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(八氢-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-2-基)喹唑啉-4(3H)(劣对映体(distomer))；

将2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-碘喹唑啉-4(3H)-酮(83.4mg)、叔丁醇钾(89.8mg)、(2-二环己基膦基-2’,4’,6’-三异丙基-1,1’-联苯基)[2-(2’-氨基-1,1’-联苯基]甲磺酸钯(II)(17mg)、叔戊醇(1mL)和八氢-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪(84mg)(外消旋物)的混合物在180℃下于微波辐射条件下搅拌1小时。在向其中加入DMSO(1mL)和甲醇(3mL)并将混合物通过硅藻土过滤后，通过将滤液加热至60℃蒸馏除去挥发性组分。将所得物质通过HPLC[YMC-Triart C18，含0.1％三氟乙酸的乙腈/含0.1％三氟乙酸的水]纯化。将所得固体进行光学拆分(CHIRALCEL OJ-H，己烷/乙醇/二乙胺)，得到标题化合物(8.8mg)。

(劣对映体)MS:[M+H]

工作实施例126

(R)-2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(六氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1H)-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)(R)-5-(六氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1H)-基)-2-硝基苯甲酰胺

将乙基5-氟-2-硝基苯甲酰胺(5.84g)、(R)-八氢吡咯并[1,2-a]吡嗪(5.20g)、碳酸钾(6.57g)和乙腈(130mL)的混合物在50℃搅拌过夜。在向其中加入水(130ml)并减压蒸馏除去挥发性组分后，滤出沉淀物，并用水洗涤，得到标题化合物(8.79g)。

(B)(R)-2-氨基-5-(六氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1H)-基)苯甲酰胺

在将(R)-5-(六氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1H)-基)-2-硝基苯甲酰胺(8.79g)、钯-活性炭(5％钯)(879mg)、甲醇(90mL)和THF(90mL)的混合物在室温下于常压和氢气气氛下搅拌过夜后，通过过滤除去催化剂，并用甲醇洗涤滤液。从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分，并将所得固体从乙酸乙酯/己烷中重结晶，得到标题化合物(6.21g)。

(C)(R)-2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(六氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1H)-基)喹唑啉-4(3H)-酮

将4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-羧酸(4.55g)、(R)-2-氨基-5-(六氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1H)-基)苯甲酰胺(6.19g)、1.7M丙基膦酸酐/乙酸乙酯溶液(21mL)和吡啶(60mL)的混合物在室温下搅拌过夜。在减压蒸馏除去挥发性组分后，向剩余的固体中加入水(120mL)和15％碳酸钾水溶液(120mL)，然后将混合物在室温下搅拌1小时。用水和二异丙基醚洗涤通过过滤获得的固体。向所得固体中加入1-丁醇(150mL)和叔丁醇钾(267mg)，然后将混合物在120℃搅拌过夜并冷却至60℃。进一步向其中加入乙酸乙酯(150mL)，并将混合物在60℃搅拌1小时，冷却至室温并在室温下搅拌过夜。滤出沉淀物，然后用1-丁醇/乙酸乙酯(1/1)和乙酸乙酯洗涤。将所得固体从1-丁醇/庚烷中重结晶，得到标题化合物(6.84g)。

工作实施例127

(S)-6-(2,4-二甲基哌嗪-1-基)-2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-喹唑啉-4(3H)-酮

(A)5-氟-2-硝基苯甲酸乙酯

在室温下向5-氟-2-硝基苯甲酸(20.0g)、DMF(0.084mL)和THF(100mL)的混合物中滴加草酰氯(10.4mL)，然后将混合物在相同温度下搅拌1小时。在从所得混合物中减压蒸馏除去挥发性组分后，在室温下向其中加入乙醇(50mL)，然后混合。将混合物在相同温度下搅拌过夜。在相同温度下向其中进一步加入饱和碳酸氢钠水溶液，然后用乙酸乙酯萃取混合物。将有机层用饱和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，然后减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余物质通过硅胶柱色谱(乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(24.5g)。

(B)(S)-4-(3-乙氧羰基-4-硝基苯基)-3-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯

将5-氟-2-硝基苯甲酸乙酯(4.00g)、(S)-3-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯(4.13g)、碳酸钾(3.89g)和DMF(20mL)的混合物在100℃下搅拌1天。在室温下向所得混合物中加入水并用乙酸乙酯萃取混合物后，将有机层用水和饱和盐水洗涤，然后经无水硫酸镁干燥。减压蒸馏除去挥发性组分，并将剩余物质通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(5.76g)。

MS:[M+H]

(C)(S)-5-(2,4-二甲基哌嗪-1-基)-2-硝基苯甲酸乙酯

在将(S)-4-(3-乙氧基羰基-4-硝基苯基)-3-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯(3.42g)和三氟乙酸(20mL)的混合物在室温下搅拌30分钟后，减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余物质中加入甲苯，并减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余物质中再次加入甲苯，并减压蒸馏除去挥发性组分。在室温下向所得物质和DMF(35mL)的混合物中加入碳酸钾(6.00g)，并将混合物在相同温度下搅拌30分钟。然后，进一步向其中加入碘甲烷(0.706mL)，并将混合物在室温下搅拌30分钟。在室温下向混合物中加入水并用乙酸乙酯萃取混合物后，用水和饱和盐水洗涤有机层。将混合物经无水硫酸镁干燥，并减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余物质通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(1.97g)。

(D)(S)-5-(2,4-二甲基哌嗪-1-基)-2-硝基苯甲酰胺

在室温下，向(S)-5-(2,4-二甲基哌嗪-1-基)-2-硝基苯甲酸乙酯(1.76g)、甲醇(8mL)和THF(8mL)的混合物中加入8M氢氧化钠水溶液(0.93mL)，然后将混合物在60℃下搅拌12小时。在从所得混合物中减压蒸馏除去挥发性组分后，向剩余的固体中加入甲苯/THF，并进一步减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中再次加入甲苯/THF，并减压蒸馏除去挥发性组分。在室温下，向所得固体、DMF(0.045mL)和THF(30mL)的混合物中滴加草酰氯(1.50mL)，并将混合物在室温下搅拌1小时。在从所得混合物中减压蒸馏除去挥发性组分后，向其中加入THF(30mL)，并将它们混合，并在室温下将混合物滴加到28％氢氧化铵溶液(30mL)中。然后，将混合物在相同温度下搅拌1小时。在相同温度下进一步向其中加入水，并用乙酸乙酯萃取混合物。分离有机层，用饱和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，然后减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余物质通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(1.08g)。

(E)(S)-2-氨基-5-(2,4-二甲基哌嗪-1-基)苯甲酰胺

在将(S)-5-((2,4-二甲基哌嗪-1-基)-2-硝基苯甲酰胺(1.24g)、钯-活性炭(5％钯)(124mg)和甲醇(10mL)的混合物在室温下于常压和氢气气氛下搅拌过夜后，通过过滤除去催化剂，并用甲醇洗涤滤液。从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分，并将所得物质通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(1.06g)。

(F)(S)-6-(2,4-二甲基哌嗪-1-基)-2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)喹唑啉-4(3H)-酮

将4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-羧酸(0.816g)、(S)-2-氨基-5-(2,4-二甲基哌嗪-1-基)苯甲酰胺(1.06g)、1.7M丙基膦酸酐/乙酸乙酯溶液(3.8mL)和吡啶(10mL)的混合物在室温下搅拌90分钟。在减压蒸馏除去挥发性组分后，向剩余的固体中加入水(20mL)和15％碳酸钾水溶液(20mL)，并将混合物在室温下搅拌2小时。用水和二异丙基醚洗涤通过过滤获得的固体。在向所得固体中加入1-丁醇(30mL)和叔丁醇钾(50.0mg)并将混合物在120℃下搅拌过夜后，减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化，并将所得固体从乙醇/己烷中重结晶，得到标题化合物(1.22g)。

工作实施例128

(R)-6-(2,4-二甲基哌嗪-1-基)-2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-喹唑啉-4(3H)-酮

(A)(R)-4-(3-乙氧基羰基-4-硝基苯基)-3-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯

将5-氟-2-硝基苯甲酸乙酯(5.00g)、(R)-3-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯(5.17g)、碳酸钾(4.86g)和DMF(20mL)的混合物在100℃下搅拌12小时。在室温下向所得混合物中加入水并用乙酸乙酯萃取混合物后，用水和饱和盐水洗涤有机层。将混合物经无水硫酸镁干燥，并减压蒸馏除去挥发性组分。剩余物质通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(6.07g)。

(B)(R)-5-(2,4-二甲基哌嗪-1-基)-2-硝基苯甲酸乙酯

在将(R)-4-(3-乙氧基羰基-4-硝基苯基)-3-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.95g)和三氟乙酸(30mL)的混合物在室温下搅拌1小时后，减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余物质中加入甲苯，并减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余物质中再次加入甲苯，并减压蒸馏除去挥发性组分。在室温下向所得物质和DMF(30mL)的混合物中加入碳酸钾(5.18g)，并将混合物在相同温度下搅拌30分钟。然后，进一步向其中加入碘甲烷(0.563mL)，并将混合物在室温下搅拌过夜。在室温下向所得混合物中加入水并用乙酸乙酯萃取混合物后，用水和饱和盐水洗涤有机层。混合物经无水硫酸镁干燥，并减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余物质通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(2.14g)。

(C)(R)-5-(2,4-二甲基哌嗪-1-基)-2-硝基苯甲酰胺

在室温下向(R)-5-(2,4-二甲基哌嗪-1-基)-2-硝基苯甲酸乙酯(2.14g)、甲醇(10mL)和THF(10mL)的混合物中加入8M氢氧化钠水溶液(1.1mL)，并将混合物在60℃搅拌过夜。在从所得混合物中减压蒸馏除去挥发性组分后，向剩余的固体中加入甲苯/THF，并进一步减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中再次加入甲苯/TH，并减压蒸馏除去挥发性组分。在室温下，向所得固体、DMF(0.054mL)和THF(20mL)的混合物中滴加草酰氯(1.83mL)，并将混合物在室温下搅拌1小时。在从所得混合物中减压蒸馏除去挥发性组分后，向其中加入THF(30mL)，并将它们混合。在室温下，将混合物滴加到28％氢氧化铵溶液(20mL)中。然后，将混合物在相同温度下搅拌1小时。在相同温度下进一步向其中加入水，并用乙酸乙酯萃取混合物。分离有机层，用饱和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，然后减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余物质通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(1.12g)。

(D)(R)-2-氨基-5-(2,4-二甲基哌嗪-1-基)苯甲酰胺

在将(R)-5-((2,4-二甲基哌嗪-1-基)-2-硝基苯甲酰胺(1.48g)、钯-活性炭(5％钯)(148mg)、甲醇(15mL)的混合物在室温下于常压和氢气气氛下搅拌过夜后，通过过滤除去催化剂，并用甲醇洗涤滤液。从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分，并将所得物质通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(1.22g)。

(E)(R)-6-(2,4-二甲基哌嗪-1-基)-2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-喹唑啉-4(3H)-酮

将4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-羧酸(0.940g)、(R)-2-氨基-5-(2,4-二甲基哌嗪-1-基)苯甲酰胺(1.22g)、1.7M丙基膦酸酐/乙酸乙酯溶液(4.34mL)和吡啶(15mL)的混合物在室温下搅拌过夜。在减压蒸馏除去挥发性组分后，向剩余的固体中加入水(15mL)和15％碳酸钾水溶液(15mL)，然后将混合物在室温下搅拌2小时。用水和二异丙基醚洗涤通过过滤获得的固体。在向所得固体中加入1-丁醇(20mL)和叔丁醇钾(45.5mg)并将混合物在120℃下搅拌过夜后，减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化，并从乙酸乙酯/己烷中重结晶，得到标题化合物(0.968g)。

工作实施例129

(S)-2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(2-乙基-4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)(S)-4-(3-乙氧基羰基-4-硝基苯基)-3-乙基哌啶-1-羧酸叔丁酯

将5-氟-2-硝基苯甲酸乙酯(2.00g)、(S)-3-乙基哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.21g)、碳酸钾(1.95g)和DMF(10mL)的混合物在100℃下搅拌1天。在室温下向所得混合物中加入水并用乙酸乙酯萃取混合物后，用水和饱和盐水洗涤有机层。在将混合物经无水硫酸镁干燥后，减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余物质通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(2.02g)。

(B)(S)-5-(2-乙基-4-甲基哌啶-1-基)-2-硝基苯甲酸乙酯

在将(S)-4-(3-乙氧基羰基-4-硝基苯基)-3-乙基哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.02g)和三氟乙酸(15mL)的混合物在室温下搅拌30分钟后，减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余物质中加入甲苯，并减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余物质中再次加入甲苯，并减压蒸馏除去挥发性组分。在室温下向所得物质和DMF(10mL)的混合物中加入碳酸钾(2.74g)，并将混合物在相同温度下搅拌30分钟。然后，向其中加入碘甲烷(0.372mL)，并将混合物在室温下搅拌30分钟。在室温下向所得混合物中加入水并用乙酸乙酯萃取混合物后，用水和饱和盐水洗涤有机层。在将混合物经无水硫酸镁干燥后，减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余物质通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(1.36g)。

(C)(S)-5-(2-乙基-4-甲基哌啶-1-基)-2-硝基苯甲酰胺

室温下，向(S)-5-(2-乙基-4-甲基哌啶-1-基)-2-硝基苯甲酸乙酯(1.35g)、甲醇(6mL)和THF(6mL)的混合物中加入8M氢氧化钠水溶液(0.68mL)，并将混合物在60℃下搅拌12小时。在从所得混合物中减压蒸馏除去挥发性组分后，向剩余的固体中加入甲苯/THF，并进一步减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中再次加入甲苯/THF，并减压蒸馏除去挥发性组分。在室温下，向所得固体、DMF(0.033mL)和THF(25mL)的混合物中滴加草酰氯(1.10mL)，并将混合物在室温下搅拌1小时。在从所得混合物中减压蒸馏除去挥发性组分后，向其中加入THF(30mL)，并将混合物在室温下滴加到28％氢氧化铵溶液(25mL)中。然后，将混合物在相同温度下搅拌1小时。在相同温度下进一步向其中加入水，并用乙酸乙酯萃取混合物。分离有机层，用饱和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，然后减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余物质通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(1.11g)。

(D)(S)-2-氨基-5-((2-乙基-4-甲基哌啶-1-基)苯甲酰胺

在将(S)-5-((2-乙基-4-甲基哌啶-1-基)-2-硝基苯甲酰胺(1.10g)、钯-活性炭(5％钯)(110mg)、甲醇(10mL)的混合物在室温下于常压和氢气气氛下搅拌过夜后，通过过滤除去催化剂，并用甲醇洗涤滤液。从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分，并将所得物质通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(0.965g)。

(E)(S)-2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(2-乙基-4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮

将4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-羧酸(0.703g)、(S)-2-氨基-5-(2-乙基-4-甲基哌啶-1-基)苯甲酰胺(0.965g)、1.7M丙基膦酸酐/乙酸乙酯溶液(3.2mL)和吡啶(10mL)的混合物在室温下搅拌90分钟。在减压蒸馏除去挥发性组分后，向剩余的固体中加入水(20mL)和15％碳酸钾水溶液(20mL)，然后将混合物在室温下搅拌2小时。用水和二异丙基醚洗涤通过过滤获得的固体。在向所得固体中加入1-丁醇(25mL)和叔丁醇钾(41.3mg)并将混合物在120℃下搅拌过夜后，减压蒸馏除去挥发性组分。将所得物质通过硅胶柱色谱(NH，甲醇/乙酸乙酯)纯化，并从乙醇/己烷中重结晶，得到标题化合物(0.753g)。

工作实施例130

(S)-2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(4-乙基-2-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)(S)-5-(4-乙基-2-甲基哌啶-1-基)-2-硝基苯甲酸乙酯

在将(S)-4-(3-乙氧基羰基-4-硝基苯基)-3-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.34g)和三氟乙酸(25mL)的混合物在室温下搅拌30分钟后，减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余物质中加入甲苯，并减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余物质中再次加入甲苯，并减压蒸馏除去挥发性组分。在室温下向所得物质和DMF(25mL)的混合物中加入碳酸钾(5.31g)，并将混合物在相同温度下搅拌30分钟。然后，进一步向其中加入碘甲烷(0.577mL)，并将混合物在室温下搅拌3小时。在室温下向所得混合物中加入水并用乙酸乙酯萃取混合物后，用水和饱和盐水洗涤有机层。在将混合物经无水硫酸镁干燥后，减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余物质通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(1.46g)。

(B)(S)-5-(4-乙基-2-甲基哌啶-1-基)-2-硝基苯甲酰胺

室温下向(S)-5-(4-乙基-2-甲基哌啶-1-基)-2-硝基苯甲酸乙酯(1.45g)、甲醇(10mL)和THF(10mL)的混合物中加入8M氢氧化钠水溶液(0.73mL)，并将混合物在60℃搅拌过夜。在从所得混合物中减压蒸馏除去挥发性组分后，向所得固体中加入甲苯/THF，并进一步减压蒸馏除去挥发性组分。向所得固体中再次加入甲苯/THF，并减压蒸馏除去挥发性组分。在室温下向所得固体、DMF(0.035mL)和THF(20mL)的混合物中滴加草酰氯(1.18mL)，并将混合物在室温下搅拌1小时。在从所得混合物中减压蒸馏除去挥发性组分后，向其中加入THF(30mL)，并将它们混合。在室温下将混合物滴加到28％氢氧化铵溶液(20mL)中后，将所得混合物在相同温度下搅拌1小时。在相同温度下进一步向其中加入水，并用乙酸乙酯萃取混合物。分离有机层，并用饱和盐水洗涤。在将混合物经无水硫酸镁干燥后，减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余物质通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(0.988g)。

(C)(S)-2-氨基-5-(4-乙基-2-甲基哌啶-1-基)苯甲酰胺

在将(S)-5-(4-乙基-2-甲基哌啶-1-基)-2-硝基苯甲酰胺(0.988g)、钯-活性炭(5％钯)(98.8mg)和甲醇(10mL)的混合物在室温下于常压和氢气气氛下搅拌过夜后，通过过滤除去催化剂，并用甲醇洗涤滤液。从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分，并将所得物质通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(0.755g)。

(D)(S)-2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(4-乙基-2-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮

将4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-羧酸(0.547g)、(S)-2-氨基-5-(4-乙基-2-甲基哌啶-1-基)苯甲酰胺(0.750g)、1.7M丙基膦酸酐/乙酸乙酯溶液(2.52mL)和吡啶(10mL)的混合物在室温下搅拌过夜。在减压蒸馏除去挥发性组分后，向剩余的固体中加入水(10mL)和15％碳酸钾水溶液(10mL)，并将混合物在室温下搅拌2小时。用水和二异丙基醚洗涤通过过滤获得的固体。向所得固体中加入1-丁醇(15mL)和叔丁醇钾(28.9mg)，然后将混合物在120℃下搅拌过夜。然后，减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体从乙醇/己烷重结晶，得到标题化合物(0.700g)。

工作实施例131

(R)-2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(4-乙基-2-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)(R)-5-(4-乙基-2-甲基哌啶-1-基)-2-硝基苯甲酸乙酯

将(R)-4-(3-(乙氧基羰基)-4-硝基苯基)-3-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯(3.02g)和三氟乙酸(30mL)的混合物在室温下搅拌30分钟后，减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余物质中加入甲苯，并减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余物质中再次加入甲苯，并减压蒸馏除去挥发性组分。在室温下向所得物质和DMF(30mL)的混合物中加入碳酸钾(5.31g)，并将混合物在相同温度下搅拌30分钟。然后，向其中加入碘甲烷(0.807mL)，并将混合物在室温下搅拌3小时。在室温下向所得混合物中加入水，并用乙酸乙酯萃取混合物。然后，用水和饱和盐水洗涤有机层。在将混合物经无水硫酸镁干燥后，减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余物质通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(2.16g)。

(B)(R)-5-((4-乙基-2-甲基哌啶-1-基)-2-硝基苯甲酰胺

在室温下向(R)-5-(4-乙基-2-甲基哌啶-1-基)-2-硝基苯甲酸乙酯(2.16g)、甲醇(10mL)和THF(10mL)的混合物中加入8M氢氧化钠水溶液(1.1mL)，然后将混合物在60℃搅拌过夜。在从所得混合物中减压蒸馏除去挥发性组分后，向剩余的固体中加入甲苯/THF，并进一步减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中再次加入甲苯/THF，并减压蒸馏除去挥发性组分。在室温下向所得固体、DMF(0.052mL)和THF(20mL)的混合物中滴加草酰氯(1.76mL)，并将混合物在室温下搅拌1小时。在从所得混合物中减压蒸馏除去挥发性组分后，向其中加入THF(30mL)，并将它们混合。在室温下，将混合物滴加到28％氢氧化铵溶液(20mL)中。然后，将混合物在相同温度下搅拌1小时。在相同温度下进一步向其中加入水，并用乙酸乙酯萃取混合物。分离有机层，用饱和氯化钠水溶液洗涤，经无水硫酸镁干燥，然后减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余物质通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(1.54g)。

(C)(R)-2-氨基-5-((4-乙基-2-甲基哌啶-1-基)苯甲酰胺

在将(R)-5-((4-乙基-2-甲基哌啶-1-基)-2-硝基苯甲酰胺(1.54g)、钯-活性炭(5％钯)(154mg)和甲醇(15mL)的混合物在室温下于常压和氢气气氛下搅拌过夜后，通过过滤除去催化剂，并用甲醇洗涤滤液。从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分，并将所得物质通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(1.21g)。

(D)(R)-2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(4-乙基-2-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮

将4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-羧酸(0.881g)、(R)-2-氨基-5-(4-乙基-2-甲基哌啶-1-基)苯甲酰胺(1.21g)、1.7M丙基膦酸酐/乙酸乙酯溶液(4.1mL)和吡啶(15mL)的混合物在室温下搅拌过夜。在减压蒸馏除去挥发性组分后，向剩余的固体中加入水(15mL)和15％碳酸钾水溶液(15mL)，并将混合物在室温下搅拌2小时。用水和二异丙基醚洗涤通过过滤获得的固体。向所得固体中加入1-丁醇(20mL)和叔丁醇钾(43.5mg)，然后将混合物在120℃下搅拌过夜。然后，减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体从乙醇/己烷重结晶，得到标题化合物(0.987g)。

工作实施例132

(R)-2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(2-乙基-4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮

(A)(R)-4-(3-乙氧基羰基-4-硝基苯基)-3-乙基哌啶-1-羧酸叔丁酯

将5-氟-2-硝基苯甲酸乙酯(3.00g)、(R)-3-乙基哌啶-1-羧酸叔丁酯(3.32g)、碳酸钾(2.92g)和DMF(15mL)的混合物在100℃下搅拌1天。在室温下向所得混合物中加入水并用乙酸乙酯萃取混合物后，用水和饱和盐水洗涤有机层。在将混合物经无水硫酸镁干燥后，减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余物质通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(4.13g)。

MS:[M+H]

(B)(R)-5-(2-乙基-4-甲基哌啶-1-基)-2-硝基苯甲酸乙酯

在将(R)-4-(3-乙氧基羰基-4-硝基苯基)-3-乙基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(4.13g)和三氟乙酸(40mL)的混合物在室温下搅拌1小时后，减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余物质中加入甲苯，并减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余物质中再次加入甲苯，并减压蒸馏除去挥发性组分。在室温下向所得物质和DMF(45mL)的混合物中加入碳酸钾(6.98g)，并将混合物在相同温度下搅拌30分钟。然后，进一步向其中加入碘甲烷(0.758mL)，并将混合物在室温下搅拌过夜。向所得混合物中加入碘甲烷(0.189ml)，并将混合物在室温下搅拌2小时。然后，进一步向其中加入碘甲烷(0.189mL)，并将混合物在室温下搅拌1小时。在室温下向所得混合物中加入水并用乙酸乙酯萃取混合物后，用水和饱和盐水洗涤有机层。在将混合物经无水硫酸镁干燥后，减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余物质通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(2.41g)。

MS:[M+H]

(C)(R)-5-(2-乙基-4-甲基哌啶-1-基)-2-硝基苯甲酰胺

在室温下向(R)-5-(2-乙基-4-甲基哌啶-1-基)-2-硝基苯甲酸乙酯(2.41g)、甲醇(10mL)和THF(10mL)的混合物中加入8M氢氧化钠水溶液(1.2mL)，并将混合物在60℃搅拌过夜。在从所得混合物中减压蒸馏除去挥发性组分后，向剩余的固体中加入甲苯/THF，并进一步减压蒸馏除去挥发性组分。向剩余的固体中再次加入甲苯/THF，并减压蒸馏除去挥发性组分。在室温下向所得固体、DMF(0.058mL)和THF(25mL)的混合物中滴加草酰氯(1.97mL)，并将混合物在室温下搅拌1小时。在从所得混合物中减压蒸馏除去挥发性组分后，向其中加入THF(30mL)，并将它们混合。在室温下，将混合物滴加到28％氢氧化铵溶液(25mL)中。然后，将混合物在相同温度下搅拌1小时。在相同温度下进一步向其中加入水，并用乙酸乙酯萃取混合物。分离有机层，用饱和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，然后减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余物质通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(1.42g)。

(D)(R)-2-氨基-5-(2-乙基-4-甲基哌啶-1-基)苯甲酰胺

在将(R)-5-((2-乙基-4-甲基哌啶-1-基)-2-硝基苯甲酰胺(1.42g)、钯-活性炭(5％钯)(142mg)和甲醇(15mL)的混合物在室温下于常压和氢气气氛下搅拌过夜后，通过过滤除去催化剂，并用甲醇洗涤。从滤液中减压蒸馏除去挥发性组分，并将所得物质通过硅胶柱色谱(NH，乙酸乙酯/己烷)纯化，得到标题化合物(0.984g)。

(E)(R)-2-(4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-6-(2-乙基-4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4(3H)-酮

将4,6-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-羧酸(0.714g)、(R)-2-氨基-5-(2-乙基-4-甲基哌啶-1-基)苯甲酰胺(0.980g)、1.7M丙基膦酸酐/乙酸乙酯溶液(3.30mL)和吡啶(10mL)的混合物在室温下搅拌过夜。在减压蒸馏除去挥发性组分后，向剩余的固体中加入水(10mL)和15％碳酸钾水溶液(10mL)，并将混合物在室温下搅拌2小时。用水和二异丙基醚洗涤通过过滤获得的固体。向所得固体中加入1-丁醇(15mL)和叔丁醇钾(34.8mg)，然后将混合物在120℃下搅拌过夜。然后，减压蒸馏除去挥发性组分。将剩余的固体从乙醇/己烷重结晶，得到标题化合物(0.674g)。

[2]化合物列表

下表给出了用作实施例的化合物。表中的“MS”表示测量值。使用上述实施例之一中描述的方法或类似方法产生下表1中给出的实施例的化合物。

[表1]

[实验实施例2]测量暴露于化合物后mRNA水平的变化的活细胞测定

在本实施例中，向培养细胞施用每种测试化合物，并使用PCR检查SMN(即包含外显子7和8的FL-SMN和跳过外显子7的Δ7)的mRNA转录物的表达水平的变化。原则上，如图3B和图3D所示，使用与外显子7中的序列匹配的引物(003-Fw-FL-SMN)(检查FL-SMN的表达)和具有跨越外显子6与外显子8之间的接合处的核苷酸序列的引物(006-Fw-Δ7)(检查Δ7的表达)来彼此区分FL-SMN和Δ7。

(实验方法)

使用补充有10％FBS(Life Technologies)的DMEM(高葡萄糖)(LifeTechnologies)对源于患者的成纤维细胞SMA(GM03813)(Coriell Cell Repositories)进行传代培养。将细胞在100μL培养基中以1.5或0.5×10

(校准曲线的生成)

如上所述，引物和探针的组合(B)检测源自含外显子7的FL-SMN mRNA的cDNA，而引物和探针的组合(D)检测源自不含外显子7的Δ7mRNA的cDNA。

首先，使用寡DNA标准溶液和每个引物-探针对进行PCR，并根据获得的Ct值生成校准曲线。图3C和图3E分别显示了对于使用001-标准物FL-SMN和002-标准物Δ7作为模板的实验获得的结果。

如图3C所示，对于001-标准物FL-SMN模板，PCR效率为至少95％，并且对于组合(B)，可以线性地检测到5至5×10

因此，引物和探针的组合(B)和(D)分别特异性地检测001-标准物FL-SMN和002-标准物Δ7，并且可以线性地检测至少5至5×10

接下来，使用上述模板和20×基因表达PCR测定对GAPDH进行类似的实验。如图4所示，PCR效率至少为95％，并且可线性地检测到5至5×10

(使用化合物进行的实验的结果)

使用上述测定，评价实施例的化合物的活性。具体而言，将使用不含化合物的DMSO获得的并且针对GAPDH标准化的FL-SMN值和Δ7值的百分比设定为100％，并且计算在施用化合物时获得的并且针对GAPDH标准化的FL-SMN值和Δ7值的百分比。表2显示了工作实施例1至132中获得的化合物在1μM浓度下的FL-SMN mRNA的计算结果。在表2中，等于或高于100％但低于120％的FL-SMN mRNA的计算结果用单个星号(*)表示，等于或高于120％但低于150％的那些用双星号(**)表示，等于或高于150％但低于180％的那些用三个星号(***)表示，并且等于或高于180％的那些用四个星号(****)表示。

应该注意的是，对于Δ7，选择代表性化合物进行测量，并且在下文中给出了在一定范围内(30nM至3μM)的不同浓度下获得的结果，连同使用相同条件测量的对于FL-SMN获得的结果，以及后面描述的关于蛋白质表达的结果。

[表2]

如表2所示，实施例的所有化合物都使FL-SMN的表达水平升高。因此，根据本发明的化合物可用作脊髓性肌萎缩症的治疗剂。

[实验实施例3]用于测量暴露于化合物后蛋白质表达的变化的活细胞测定

在本实施例中，以不同的浓度向培养细胞施用代表性测试化合物，并使用蛋白质印迹法检查SMN蛋白表达水平的变化。

(实验方法)

使用补充有10％FBS(Life Technologies)的DMEM(高葡萄糖)(LifeTechnologies)对源于患者的成纤维细胞SMA(GM03813)(Coriell Cell Repositories)进行传代培养。将细胞在100μL中以1.5×10

(使用化合物进行的实验的结果)

使用上述系统，评价代表性实施例的化合物的活性。具体而言，将使用不含化合物的DMSO获得的并针对GAPDH标准化的SMN蛋白的表达水平的百分比设定为100％，并计算在施用化合物时获得的并针对GAPDH标准化的SMN蛋白的表达水平。随后，将结果与使用与实验实施例2类似的方法获得的对于Δ7和FL-SMN获得的结果一起绘制在曲线图上。

如图5所示，测试化合物以浓度依赖的方式增加了FL-SMN mRNA的量，减少了Δ7mRNA的量，并增加了SMN蛋白的量。FL-SMN mRNA表达水平的升高几乎与Δ7mRNA表达水平的降低成反比。结果表明，目标化合物调节剪接，从而增加FL-SMN mRNA，其为正常的剪接产物。因此，根据本发明的化合物可用作SMN基因，特别是突变SMN基因的剪接调节剂。此外，FL-SMN浓度的增加几乎与SMN蛋白表达水平的升高成正比，表明在化合物调节后产生的FL-SMN mRNA被翻译成正常蛋白。

[工业适用性]

本发明使得为脊髓性肌萎缩症提供预防剂或治疗剂成为可能。