一种降低海带幼孢子体发育畸形率的方法

摘要

本发明公开了一种降低海带幼孢子体发育畸形率的方法，具体涉及大型经济海藻苗种繁育领域，包括处理母液，包含有如下质量百分比的组分：15‑30g/ml碳酸钠15％‑25％，25‑40g/ml碳酸氢钠30％‑40％，20‑35g/ml碳酸氢钙20％‑40％，余量为水。本发明经实施后可以有效降低海带幼孢子体发育畸形率，使海带幼苗成苗率提升5‑10％，1.5cm以上的苗种达到25株/cm以上，0.2cm以上的苗种达到180株/cm以上，苗帘断档率为0，附苗总量达5.5万株/帘，远超出一类海带苗帘的要求；处理液配制简单、无污染；苗帘处理方法简单易行，便于操作实施，并且大大提高了育苗效率和质量。

说明书

技术领域

本发明涉及大型经济海藻苗种繁育技术领域，更具体地说，本发明涉及一种降低海带幼孢子体发育畸形率的方法。

背景技术

海带是我国水产养殖业中主要的大型经济海藻养殖品种。自我国上世纪相继对海带苗种繁育、人工养殖领域获得突破以来，我国的水产养殖业迎来了以海带全人工筏式养殖为代表的第一次海水养殖浪潮，以海带为主线的海藻产业快速发展，为我国的国民经济增长做出了突出的贡献，为我国开发蓝色国土提供了典范和样板。

海带苗种人工繁育是海带养殖业的前端环节，存在绿烂、脱落等不利影响，其多数原因在于幼孢子体发育畸形。研究表明，导致海带幼孢子体发育畸形的原因有很多，诸如光照条件、水质条件、附着基处理等。光照条件、水质条件等经过多年试验与摸索，已经获得了详细的控制条件，同时附着基也经过筛选后发展了以棕帘和化纤帘等为代表的附着基质。但是对于附着基的处理还不够完善，对于附着基的处理不当，依然会产生海带幼孢子体的发育畸形，以至于苗种繁育工作受到严重影响。

发明内容

为了克服现有技术的上述缺陷，本发明的实施例提供一种降低海带幼孢子体发育畸形率的方法，本发明所要解决的技术问题是：如何解决海带苗种繁育过程之中的幼孢子体发育畸形问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种降低海带幼孢子体发育畸形率的方法，包括处理母液，包含有如下质量百分比的组分：15-30g/ml碳酸钠15％-25％，25-40g/ml碳酸氢钠30％-40％，20-35g/ml碳酸氢钙20％-40％，余量为水；

具体养殖具体实施步骤如下：

S1、配子体培育：

S1.1：在海带出现孢子囊群时进行游孢子分离采集，将单个游孢子分别置入500ml锥形瓶中并加入培养液，并存放于低温、低光照的种质库内，使其发育形成丝状配子体；

S1.2：通过显微镜定期检查步骤S1.1中形成的丝状配子体，并利用组织粉碎机将其定期处理，以保持其单条丝状体长度保持在30个细胞以内；

S2、配子体切段分离：

S2.1：用组织粉碎机将海带配子体进行切段分离，显微镜检查丝状体片段每段为3-6个细胞，即可停止切段分离；

S2.2：切段分离后，使用按一定比例稀释后的处理液母液进行冲洗，其中稀释比例为1:500；冲洗时，用5000ml锥形瓶装入4000ml无菌海水，按比例加入处理液，并通过充气保证洗浴效果，其中充气量为200ml/min，处理时间为10min；

S2.3：冲洗完成后，将配子体按照雌雄比例6:1泼洒于苗帘上，进行培育；待海带幼孢子体形成并生长至两列细胞时，开始流水培育，其中流水速度为0.3m/s；

S3、苗帘喷刷：流水培育3d之后进行镜检，待幼孢子体假根附着牢固后开始苗圃喷刷，然后将苗帘移至采苗池中继续培育。

在一个优选地实施方式中，所述处理母液包含有如下质量百分比的组分：25g/ml碳酸钠15％，30g/ml碳酸氢钠40％，28g/ml碳酸氢钙40％，余量为水。

在一个优选地实施方式中，所述处理母液包含有如下质量百分比的组分：25g/ml碳酸钠20％，30g/ml碳酸氢钠35％，28g/ml碳酸氢钙30％，余量为水。

在一个优选地实施方式中，所述处理母液包含有如下质量百分比的组分：25g/ml碳酸钠25％，30g/ml碳酸氢钠30％，28g/ml碳酸氢钙20％，余量为水。

在一个优选地实施方式中，所述步骤S1.1中锥形瓶内培养液设置为无菌海水，总量为300ml±50ml，每隔15d更换新培养液1次，温度条件为10℃±2℃，光照条件为6000lx±300lx。

在一个优选地实施方式中，所述步骤S2.1中组织粉碎机的转速设置为1200转/min，分3次粉碎，每次10s。

在一个优选地实施方式中，所述步骤S2.3中处理间隔时间为3-5d，单次工作时长设置为时间为5-10min，流水设置为1:100-200比例稀释的处理母液。

在一个优选地实施方式中，所述步骤S3中喷刷强度为：喷刷频次为3次/d，间隔时间为4h以上。

本发明的技术效果和优点：

本发明通过利用分离的海带雌雄配子体进行苗种繁育，通过配子体培育、配子体切段分离、苗池清理、幼孢子体附着、苗帘浸浴、苗帘喷刷环节，进行基于海带配子体的苗种繁育工作，结合发明研制的处理液与配套的配子体、海带苗帘处理方法，有效提高了海带幼苗苗帘的出苗率；且处理液配制简单、无污染；苗帘处理方法简单易行，便于操作实施，并且大大提高了育苗效率和质量。

具体实施方式

下面将结合本发明中的实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1：

本发明提供了一种降低海带幼孢子体发育畸形率的方法，其中包括处理母液，包含有如下质量百分比的组分：15-30g/ml碳酸钠15％-25％，25-40g/ml碳酸氢钠30％-40％，20-35g/ml碳酸氢钙20％-40％，余量为水；

而具体到本实施例中，处理母液包含有如下质量百分比的组分：25g/ml碳酸钠15％，30g/ml碳酸氢钠40％，28g/ml碳酸氢钙40％，余量为水。

具体养殖具体实施步骤如下：

S1、配子体培育：

S1.1：在海带出现孢子囊群时进行游孢子分离采集，将单个游孢子分别置入500ml锥形瓶中并加入培养液，并存放于低温、低光照的种质库内，使其发育形成丝状配子体，锥形瓶内培养液设置为无菌海水，总量为300ml±50ml，每隔15d更换新培养液1次，温度条件为10℃±2℃，光照条件为6000lx±300lx；

S1.2：通过显微镜定期检查步骤S1.1中形成的丝状配子体，并利用组织粉碎机将其定期处理，以保持其单条丝状体长度保持在30个细胞以内；

S2、配子体切段分离：

S2.1：用组织粉碎机将海带配子体进行切段分离，显微镜检查丝状体片段每段为3-6个细胞，即可停止切段分离，组织粉碎机的转速设置为1200转/min，分3次粉碎，每次10s；

S2.2：切段分离后，使用按一定比例稀释后的处理液母液进行冲洗，其中稀释比例为1:500；冲洗时，用5000ml锥形瓶装入4000ml无菌海水，按比例加入处理液，并通过充气保证洗浴效果，其中充气量为200ml/min，处理时间为10min；

S2.3：冲洗完成后，将配子体按照雌雄比例6:1泼洒于苗帘上，进行培育；待海带幼孢子体形成并生长至两列细胞时，开始流水培育，其中流水速度为0.3m/s，处理间隔时间为3-5d，单次工作时长设置为时间为5-10min，流水设置为1:100-200比例稀释的处理母液；

S3、苗帘喷刷：流水培育3d之后进行镜检，待幼孢子体假根附着牢固后开始苗圃喷刷，喷刷强度为：喷刷频次为3次/d，间隔时间为4h以上，然后将苗帘移至采苗池中继续培育。

实施例2：

本发明提供了一种降低海带幼孢子体发育畸形率的方法，其中包括处理母液，包含有如下质量百分比的组分：15-30g/ml碳酸钠15％-25％，25-40g/ml碳酸氢钠30％-40％，20-35g/ml碳酸氢钙20％-40％，余量为水；

而具体到本实施例中，处理母液包含有如下质量百分比的组分：25g/ml碳酸钠20％，30g/ml碳酸氢钠35％，28g/ml碳酸氢钙30％，余量为水。

具体养殖具体实施步骤如下：

S1、配子体培育：

S1.1：在海带出现孢子囊群时进行游孢子分离采集，将单个游孢子分别置入500ml锥形瓶中并加入培养液，并存放于低温、低光照的种质库内，使其发育形成丝状配子体，锥形瓶内培养液设置为无菌海水，总量为300ml±50ml，每隔15d更换新培养液1次，温度条件为10℃±2℃，光照条件为6000lx±300lx；

S1.2：通过显微镜定期检查步骤S1.1中形成的丝状配子体，并利用组织粉碎机将其定期处理，以保持其单条丝状体长度保持在30个细胞以内；

S2、配子体切段分离：

S2.1：用组织粉碎机将海带配子体进行切段分离，显微镜检查丝状体片段每段为3-6个细胞，即可停止切段分离，组织粉碎机的转速设置为1200转/min，分3次粉碎，每次10s；

S2.2：切段分离后，使用按一定比例稀释后的处理液母液进行冲洗，其中稀释比例为1:500；冲洗时，用5000ml锥形瓶装入4000ml无菌海水，按比例加入处理液，并通过充气保证洗浴效果，其中充气量为200ml/min，处理时间为10min；

S2.3：冲洗完成后，将配子体按照雌雄比例6:1泼洒于苗帘上，进行培育；待海带幼孢子体形成并生长至两列细胞时，开始流水培育，其中流水速度为0.3m/s，处理间隔时间为3-5d，单次工作时长设置为时间为5-10min，流水设置为1:100-200比例稀释的处理母液；

S3、苗帘喷刷：流水培育3d之后进行镜检，待幼孢子体假根附着牢固后开始苗圃喷刷，喷刷强度为：喷刷频次为3次/d，间隔时间为4h以上，然后将苗帘移至采苗池中继续培育。

实施例3：

本发明提供了一种降低海带幼孢子体发育畸形率的方法，其中包括处理母液，包含有如下质量百分比的组分：15-30g/ml碳酸钠15％-25％，25-40g/ml碳酸氢钠30％-40％，20-35g/ml碳酸氢钙20％-40％，余量为水；

而具体到本实施例中，处理母液包含有如下质量百分比的组分：25g/ml碳酸钠25％，30g/ml碳酸氢钠30％，28g/ml碳酸氢钙20％，余量为水。

具体养殖具体实施步骤如下：

S1、配子体培育：

S1.1：在海带出现孢子囊群时进行游孢子分离采集，将单个游孢子分别置入500ml锥形瓶中并加入培养液，并存放于低温、低光照的种质库内，使其发育形成丝状配子体，锥形瓶内培养液设置为无菌海水，总量为300ml±50ml，每隔15d更换新培养液1次，温度条件为10℃±2℃，光照条件为6000lx±300lx；

S1.2：通过显微镜定期检查步骤S1.1中形成的丝状配子体，并利用组织粉碎机将其定期处理，以保持其单条丝状体长度保持在30个细胞以内；

S2、配子体切段分离：

S2.1：用组织粉碎机将海带配子体进行切段分离，显微镜检查丝状体片段每段为3-6个细胞，即可停止切段分离，组织粉碎机的转速设置为1200转/min，分3次粉碎，每次10s；

S2.2：切段分离后，使用按一定比例稀释后的处理液母液进行冲洗，其中稀释比例为1:500；冲洗时，用5000ml锥形瓶装入4000ml无菌海水，按比例加入处理液，并通过充气保证洗浴效果，其中充气量为200ml/min，处理时间为10min；

S2.3：冲洗完成后，将配子体按照雌雄比例6:1泼洒于苗帘上，进行培育；待海带幼孢子体形成并生长至两列细胞时，开始流水培育，其中流水速度为0.3m/s，处理间隔时间为3-5d，单次工作时长设置为时间为5-10min，流水设置为1:100-200比例稀释的处理母液；

S3、苗帘喷刷：流水培育3d之后进行镜检，待幼孢子体假根附着牢固后开始苗圃喷刷，喷刷强度为：喷刷频次为3次/d，间隔时间为4h以上，然后将苗帘移至采苗池中继续培育。

实施例4：

分别取上述实施例1-3的方式分别进行海带苗种繁育，并采用现有的海带苗种繁育技术作为对比例，得到以下数据：

由上表可知，实施例2中方式对海带苗种繁育最佳，使海带幼苗成苗率提升5-10％，1.5cm以上的苗种达到25株/cm以上，0.2cm以上的苗种达到180株/cm以上，苗帘断档率为0，附苗总量达5.5万株/帘，远超出一类海带苗帘的要求，研制处理液并对海带配子体、苗帘进行处理，可以提高海带幼孢子体的成苗率，实现海带苗种繁育高质量幼苗供应，从而实现海带种业的健康发展；可以有效降低海带幼孢子体发育畸形率。

最后：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。