一种用于检测L-色氨酸的荧光探针

摘要

本发明公开了一种用于检测L‑色氨酸的荧光探针及其应用和检测方法，由甲基柱[5]芳烃、二氯甲烷溶液和乙醇制成。该荧光探针检测L‑色氨酸的方法包括如下步骤：1)取荧光探针；2)向荧光探针中加入待检测液，放置10‑20min，然后以固定激发波长270nm进行荧光发射光谱测定，并绘制激发出的该激光波长处的荧光强度的变化曲线；3)根据步骤2)的曲线计算荧光探针溶液中加入待测液前后荧光发射光谱强度变化值，即可对L‑色氨酸进行检测。本发明的探针具有能够检测L‑色氨酸的特点，且检测灵敏度较高，检测成本较低，样品处理简单，操作方便，测定快速，可实时检测。

说明书

技术领域

本发明涉及一种荧光探针及其应用和检测方法，特别是一种用于检测L- 色氨酸的荧光探针及其应用和检测方法。

背景技术

氨基酸是蛋白质的基本组成物质，摄入氨基酸是人体获得氮源的唯一方式，因此，氨基酸在生物体成长发育过程中发挥着极其重要的其作用，其作用主要体现在：1、是人体组织的构成部分；2、构成人体内的各种物质；3、供给热量；4、免疫调节；5、作为体内重要的载体，起者运输的作用；6、氧化功能。人体吸收氨基酸后一部分被直接用来合成蛋白质，一部分被氧化分解，其中含氮部分用来合成其他必须氨基酸，一部分作为能量被分解掉，以尿素的形式排出体外。

L-色氨酸又名α-氨基吲哚基丙酸，分子式:C

基于氨基酸对于人体成长发育的重要性，对食物中氨基酸含量及其种类的检测显得尤为重要，而荧光探针是一种新型的检测试剂，由于其具有较高灵敏度、较低检测成本、样品处理简单、操作方便、测定快速以及实时检测的优点而备受人们的青睐，研究一种检测L-色氨酸用的荧光探针及荧光探针检测方法很有必要。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种用于检测L-色氨酸的荧光探针及其应用和检测方法。本发明的探针具有能够检测L-色氨酸的特点，且检测灵敏度较高，检测成本较低，样品处理简单，操作方便，测定快速，可实时检测。

本发明的技术方案：一种用于检测L-色氨酸的荧光探针，由甲基柱[5] 芳烃、二氯甲烷溶液和乙醇制成。

前述的用于检测L-色氨酸的荧光探针，具体通过如下方法制备：取甲基柱[5]芳烃，用二氯甲烷与乙醇的混合液溶解，即得荧光探针。

前述的用于检测L-色氨酸的荧光探针，所述荧光探针中甲基柱[5]芳烃的浓度为4.0×10

前述的用于检测L-色氨酸的荧光探针，所述荧光探针中甲基柱[5]芳烃的浓度为5.0×10

一种前述的荧光探针在检测L-色氨酸中的应用。

一种利用前述的荧光探针检测L-色氨酸的方法，包括如下步骤：

1)取荧光探针；

2)向荧光探针中加入待检测液，放置10-20min，然后以固定激发波长 270nm进行荧光发射光谱测定，并绘制激发出的该激光波长处的荧光强度的变化曲线；

3)根据步骤2)的曲线计算荧光探针溶液中加入待测液前后荧光发射光谱强度变化值，即可对L-色氨酸进行检测。

前述的荧光探针检测L-色氨酸的方法，所述步骤3)中，当加入待测液前后荧光发射光谱强度变化且发生红移，则表明待检测液中含有L-色氨酸；当加入待测液前后荧光发射光谱强度不变化且不发生红移，则表明待检测液中不含有L-色氨酸。

本发明的有益效果

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

1、本发明的荧光探针能够对L-色氨酸进行检测，只要其中含有L-色氨酸，即可检测出，具有检测灵敏度高及特异性的优点。即此探针特异性检测L-色氨酸，检测成本低，检测效率高，且利于对复杂微观系统的分析。

2、本发明的探针中的甲基柱[5]芳烃可与L-色氨酸形成主客体包结，从而使荧光探针的荧光强度降低且发生红移，因此，可以简单、快速、灵敏的对L-色氨酸进行检测。

3、本发明与传统的检测方法相比，其检测成本大大降低，并且操作也方便，可以实时检测。

综上，本发明探针能对L-色氨酸进行特异性检测，检测成本低，检测效率高，且有利于对复杂微观系统的分析。此外使用本发明探针检测时，还具有较高灵敏度、样品处理简单、操作方便、测定快速以及实时检测的优点。

为验证本发明的有益效果，发明人进行了大量的实验研究，部分实验过程和结果如下：

摩尔比法测定甲基柱[5]芳烃与L-色氨酸之间的荧光光谱数据，具体方法为：将甲基柱[5]芳烃和L-色氨酸分别配制成1.0×10

定量分析

向本发明制得的浓度为5.0×10

附图说明：

图1为5.0×10

图2为EtOH/CH

图3为L-氨基酸对甲基柱[5]芳烃(5.0×10

图4为L-色氨酸滴定探针甲基柱[5]芳烃的荧光光谱；

图5为荧光发射随C

图6为不同浓度的L-色氨酸对探针滴定的荧光强度变化的线性拟合曲线图；

图7中(a)为L-色氨酸的

图8为甲基柱[5]芳烃和L-色氨酸之间的主客交互建模；

图9为甲基柱[5]芳烃@L-色氨酸的质谱。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步的说明，但并不作为对本发明限制的依据。

本发明的实施例

实施例1：一种用于检测L-色氨酸的荧光探针，通过如下方法制备：将二氯甲烷与乙醇按体积比98：2混合制成混合液，取甲基柱[5]芳烃溶解在混合液中，制成甲基柱[5]芳烃的浓度为5.0×10

实施例2：一种用于检测L-色氨酸的荧光探针，通过如下方法制备：将二氯甲烷与乙醇按体积比90：10混合制成混合液，取甲基柱[5]芳烃溶解在混合液中，制成甲基柱[5]芳烃的浓度为4.0×10

实施例3：一种用于检测L-色氨酸的荧光探针，通过如下方法制备：将二氯甲烷与乙醇按体积比99：1混合制成混合液，取甲基柱[5]芳烃溶解在混合液中，制成甲基柱[5]芳烃的浓度为6.0×10

实施例4：一种利用荧光探针检测L-色氨酸的方法，步骤如下：

1)取实施例1-3制得的任一荧光探针；

2)向荧光探针中加入待检测液，放置10-20min，然后以固定激发波长 270nm进行荧光发射光谱测定，并绘制激发出的该激光波长处的荧光强度的变化曲线；

3)根据步骤2)的曲线计算荧光探针溶液中加入待测液前后荧光发射光谱强度变化值，当加入待测液前后荧光发射光谱强度变化且发生红移，则表明待检测液中含有L-色氨酸；当加入待测液前后荧光发射光谱强度不变化且不发生红移，则表明待检测液中不含有L-色氨酸。

以上所述，仅为本发明创造较佳的具体实施方式，但本发明创造的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明创造揭露的技术范围内，根据本发明创造的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明创造的保护范围之内。