肺癌患者肺泡灌洗液表达的OPN蛋白的应用

摘要

本发明提供检测肺泡灌洗液蛋白的一种方式，并成功检测出正常人与肺癌患者肺泡灌洗液中Osteopontin 1(OPN)的表达。本发明通过研究证实正常人与肺癌患者肺泡灌洗液中OPN的表达特征，证实肺泡灌洗液OPN对患者的疾病情况具有诊断价值。

说明书

技术领域

本发明涉及检测正常人与肺癌患者的肺泡灌洗液蛋白，并证实肺癌患者肺泡灌洗液中OPN 的含量显著高于正常人。

背景技术

肺癌是世界上导致癌症死亡的主要原因，占所有癌症死亡人数的1/4以上。每年肺癌导致40万人死亡。目前，肺癌治疗的主要手段仍然是手术切除，但是一旦疾病发展到转移阶段，手术切除治疗通常无效，并且晚期患者预后不良。化疗一般不能治疗转移性肺癌患者，患者5年生存率＜15％，目前还没有明确的治疗肺癌的最佳方法。肺癌患者的低生存率归因于无法进行早期诊断，从而无法进行有效的外科治疗。因此，迫切需要早期检测肺癌的手段来降低死亡率。

Osteopontin(OPN)是一种多功能磷酸化糖蛋白，参与细胞迁移和粘附，介导肿瘤细胞的侵袭和转移。与肿瘤发生、进展、转移和癌症预后有关。它由多种组织表达，在体液如血液、乳汁和肺泡灌洗液中大量存在，对疾病诊断治疗具有较高的价值，然而，肺癌患者OPN的水平与疾病的相关性仍有待评估。我们检测了肺泡灌洗液中OPN蛋白的表达，验证了OPN蛋白对肺癌诊断的价值，本发明将提供人肺泡灌洗液表达的OPN蛋白的应用。

发明内容

本发明的目的在于提供人肺泡灌洗液表达蛋白的检测方式。

优选地，所述人肺泡灌洗液为正常人与肺癌患者的肺泡灌洗液。

优选地，所述蛋白为OPN。

发明人首先收集正常人和肺癌患者的肺泡灌洗液，之后采用ELISA法进行检测，结果与患者的疾病情况进行分析，证实肺泡灌洗液中OPN和肺癌具有相关性。

为让本发明的上述和其它目的、特征和优点能更明显易懂，下文特举较佳实施例，并配合附图，作详细说明如下。

附图说明

图1是肺泡灌洗液OPN在正常人与肺癌患者中的表达。

具体实施方式

患者首先使用2％利多卡因进行局部麻醉，然后使用光纤支气管镜(OlympusExera BF 240) 进行支气管镜检查。为了防止任何血液污染的可能性，需对活检或刷洗标本采集进行冲洗。通过用50ml无菌盐水冲洗疾病侧支气管两次，然后缓慢地将该溶液置入玻璃管中并放入冰水中进行冲洗。回收40ml肺泡灌洗液。分离后，立即将灌洗液在1500g的条件下旋转10分钟，然后将上清液于-80℃冻存。

使用酶联免疫吸附测定试剂盒检测肺泡灌洗液OPN浓度。用680型微板分析仪(BIO-RAD) 在450nm处测量光密度。利用标准样品的浓度和对应的光密度值，绘制出每一平板的标准曲线。同时试验中采用了阳性和阴性对照，以提高该方法的有效性。

虽然本发明已以较佳实施例披露如上，然其并非用以限定本发明，任何所属技术领域的技术人员，在不脱离本发明的精神和范围内，当可作些许的更动与改进，因此本发明的保护范围当视权利要求所界定者为准。