一种从芒果叶中提取高纯芒果苷的方法

摘要

本发明公开了一种从芒果叶中提取高纯芒果苷的方法。本发明的提取方法包括芒果叶烘干粉碎、微波加热、超声波提取、离心、旋转蒸发、大孔吸附树脂纯化、浓缩、冷冻干燥等步骤，具有操作简单、成本低、提取率高等特点，对生产设备没有特殊要求。本发明采用的提取溶剂具备绿色环保的特点，不会对环境和人体健康产生不良影响。本发明提取的芒果苷纯度较高，拥有巨大的工业价值和良好的应用前景。本发明不仅能够充分利用芒果叶资源，为芒果叶资源的综合利用提供新思路，还能生产出具有高附加值的芒果苷产品，增加果农收入，拥有巨大的工业价值和良好的应用前景。

说明书

技术领域

本发明涉及植物功能性成分提取领域，特别是涉及一种从芒果叶中提取高纯芒果苷的方法。

背景技术

芒果叶为漆树科植物芒果(Mangifera indica L.)的树叶，主要分布在我国广东、广西、云南、海南、台湾等热带、亚热带地区，具有分布地域广、价格低廉、原料易得等优点。芒果叶中含有抗坏血酸、鞣质、芒果苷、黄酮类等物质，芒果叶提取物能够抑制化脓球菌、大肠杆菌的生长和繁殖，同时还具有治疗热滞腹痛、气胀、小儿疳积，并洗烂疮等功效。

芒果苷(Mangiferin)又名知母宁(Chinonin)或芒果素，是一种四羟基吡酮的碳酮苷，属于双苯酮类黄酮类化合物。芒果苷为芒果叶的主要活性成分。研究表明，芒果苷具有显著的抗炎、抗氧化、抗缺血等作用，对心、脑、肾及血管损伤具有明确的保护作用。中国是名副其实的芒果种植大国，芒果的种植面积和产量均居世界前列。目前，芒果成熟后，果农一般只会采收芒果果实，而芒果叶则被丢弃，这对芒果叶资源造成了极大的浪费。

专利号为CN201510006602.2的中国专利，公开了一种纤维素酶辅助的芒果叶中芒果苷和槲皮素的提取方法，其采用的是酶法提取芒果叶中的芒果苷，该方法虽然填补了现有技术中酶法辅助提取芒果苷的空白，但其仅采用了纤维素酶一种酶来对原料进行处理，因此，该方法增加提取率的效果并不显著。专利号为CN201710057903.7的中国专利，公开了一种从芒果叶中提取分离芒果苷的方法，但该方法在提取过程中应用到了乙酸乙酯和甲醇等会对人体产生危害的有机溶剂，提取出的芒果苷虽然纯度较高，但极易产生溶剂残留等问题，为产品后续的应用带来极大的限制，也会对使用者的健康带来一定的安全隐患。专利号为CN200910194672.X的中国专利，公开了一种从芒果叶中提取芒果苷的方法，该发明利用碱性水溶液对芒果叶粗粉进行水浴提取，随后用酸液酸化提取液，浓缩，加醇并离心，对上清液进行SephadexLH-20凝胶柱层析清除杂质，洗脱、蒸干、重结晶得到芒果苷。该方法利用碱性水溶液对芒果苷进行提取，导致芒果苷在溶剂中的溶解度较低，降低了提取率。

综上所述，目前从芒果叶中提取芒果苷的技术方案均存在安全性差或提取率低等问题。因此，开发一种工艺简单、成本低、提取率高，同时还能保证芒果苷成品具有较高纯度的提取方法是目前亟待解决的问题。

发明内容

基于上述问题，本发明的提供了一种从芒果叶中提取高纯芒果苷的方法，该方法工艺简单、成本低、提取率高，制得的芒果苷成品具有较高的纯度。

本发明从芒果叶中提取高纯芒果苷的方法，包括以下步骤：

1)取叶形完整、弹性良好的芒果叶，洗净、沥干，去除叶柄，在低温条件下烘干，粉碎后过筛，避光保存备用；

2)将处理好的芒果叶与溶剂混合，进行微波加热后再进行多次超声波提取；

3)合并提取液，将提取液进行离心，取上清液；

4)将上清液旋转蒸发至体积为原提取液的1/5，得到浓缩提取液；

5)采用AB-8型大孔吸附树脂对浓缩提取液进行纯化，纯化完成后用浓度为75％的乙醇溶液洗脱；

6)将洗脱液旋转蒸发至体积为原提取液的1/5，得到纯化后的浓缩提取液；

7)将纯化后的浓缩提取液冷冻干燥，得到芒果苷纯品。

进一步的，步骤1)中所述烘干温度为40～60℃，芒果叶粉碎粒径为80～120目。

进一步的，步骤2)中所述溶剂为75～95％的乙醇溶液，料液比为1:5～15g/mL。

进一步的，步骤2)中微波加热温度为40～60℃，超声波提取功率为120～300w，超声波提取时间为15～45min。

进一步的，步骤2)中所述提取次数为2～5次。

进一步的，步骤3)中所述离心温度为0～4℃，离心时间为10～15min，转速为3500～5000r/min。

进一步的，步骤4)中所述旋转蒸发温度为45～60℃。

进一步的，步骤5)中上样体积为9～12BV，洗脱液体积为3～5BV，上样流速和洗脱液流速为2mL/min。

进一步的，步骤5)中所述旋转蒸发温度为45～60℃。

进一步的，步骤6)中所述真空冷冻干燥温度为40～60℃。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

(1)本发明从芒果叶中提取高纯芒果苷的方法具备操作简单、成本低、提取率高等特点，对生产设备没有特殊要求，得到的芒果苷成品具有较高的纯度，有利于大规模的工业化生产。

(2)本发明芒果苷的提取过程均在一个较低的温度条件下进行，能够最大程度的防止芒果苷在提取过程中因受热而造成的损失，从而进一步达到提高得率的目的。

(3)本发明提取过程中仅采用不同浓度的乙醇溶液作为溶剂，具备绿色环保的特点，不会对环境和人体健康产生不良影响。

具体实施方式

本发明提供了一种从芒果叶中提取高纯芒果苷的方法，包括以下步骤：

1)取叶形完整、弹性良好的芒果叶，洗净、沥干，去除叶柄，在低温条件下烘干，粉碎后过筛，避光保存备用；

2)将处理好的芒果叶与溶剂混合，进行微波加热后再进行多次超声波提取；

3)合并提取液，将提取液进行离心，取上清液；

4)将上清液旋转蒸发至体积为原提取液的1/5，得到浓缩提取液；

5)采用AB-8型大孔吸附树脂对浓缩提取液进行纯化，纯化完成后用浓度为75％的乙醇溶液洗脱；

6)将洗脱液旋转蒸发至体积为原提取液的1/5，得到纯化后的浓缩提取液；

7)将纯化后的浓缩提取液冷冻干燥，得到芒果苷纯品。

其中，步骤1)中所述烘干温度为40～60℃，芒果叶粉碎粒径为80～120目。

其中，步骤2)中所述溶剂为75～95％的乙醇溶液，料液比为1:5～15g/mL。

其中，步骤2)中微波加热温度为40～60℃，超声波提取功率为120～300w，超声波提取时间为15～45min。

其中，步骤2)中所述提取次数为2～5次。

其中，步骤3)中所述离心温度为0～4℃，离心时间为10～15min，转速为3500～5000r/min。

其中，步骤4)中所述旋转蒸发温度为45～60℃。

其中，步骤5)中上样体积为9～12BV，洗脱液体积为3～5BV，上样流速和洗脱液流速为2mL/min。

其中，步骤5)中所述旋转蒸发温度为45～60℃。

其中，步骤6)中所述真空冷冻干燥温度为40～60℃。

本发明从芒果叶中提取高纯芒果苷的方法操作简单、成本低、提取率高，对生产设备没有特殊要求，得到的芒果苷成品具有较高的纯度，对环境和人体健康无不良影响，有利于大规模的工业化生产。

下面结合实施例对本发明作进一步解释说明。

实施例1

一种从芒果叶中提取高纯芒果苷的方法，包括以下步骤：

1)取叶形完整、弹性良好的芒果叶，洗净、沥干，去除叶柄，在40℃低温条件下烘干，粉碎后过80目筛，避光保存备用；

2)将处理好的芒果叶与浓度为75％的乙醇溶液按1：5g/mL的比例混合，微波加热至40℃，分别进行2次超声波提取，提取功率为120w，提取时间15min，；

3)合并提取液，将提取液在4℃，3500r/min的条件下离心15min，取上清液；

4)将上清液在45℃条件下旋转蒸发至体积为原提取液的1/5，得到浓缩提取液；

5)采用AB-8型大孔吸附树脂对浓缩提取液进行纯化，上样量为12BV，纯化完成后用3BV浓度为75％的乙醇溶液洗脱，上样流速和洗脱液流速为2mL/min；

6)将洗脱液在45℃条件下旋转蒸发至体积为原提取液的1/5，得到纯化后的浓缩提取液；

7)将纯化后的浓缩提取液在40℃条件下冷冻干燥，得到芒果苷纯品。

实施例2

一种从芒果叶中提取高纯芒果苷的方法，包括以下步骤：

1)取叶形完整、弹性良好的芒果叶，洗净、沥干，去除叶柄，在40℃低温条件下烘干，粉碎后过120目筛，避光保存备用；

2)将处理好的芒果叶与浓度为95％的乙醇溶液按1:15g/mL的比例混合，微波加热至60℃，分别进行5次超声波提取，提取功率为120w，提取时间45min，；

3)合并提取液，将提取液在0℃，5000r/min的条件下离心45min，取上清液；

4)将上清液在60℃条件下旋转蒸发至体积为原提取液的1/5，得到浓缩提取液；

5)采用AB-8型大孔吸附树脂对浓缩提取液进行纯化，上样量为9BV，纯化完成后用5BV浓度为75％的乙醇溶液洗脱，上样流速和洗脱液流速为2mL/min；

6)将洗脱液在60℃条件下旋转蒸发至体积为原提取液的1/5，得到纯化后的浓缩提取液；

7)将纯化后的浓缩提取液在60℃条件下冷冻干燥，得到芒果苷纯品。

实施例3

一种从芒果叶中提取高纯芒果苷的方法，包括以下步骤：

1)取叶形完整、弹性良好的芒果叶，洗净、沥干，去除叶柄，在40℃低温条件下烘干，粉碎后过100目筛，避光保存备用；

2)将处理好的芒果叶与浓度为80％的乙醇溶液按1:8g/mL的比例混合，微波加热至60℃，分别进行5次超声波提取，提取功率为250w，提取时间25min，；

3)合并提取液，将提取液在4℃，4000r/min的条件下离心20min，取上清液；

4)将上清液在50℃条件下旋转蒸发至体积为原提取液的1/5，得到浓缩提取液；

5)采用AB-8型大孔吸附树脂对浓缩提取液进行纯化，上样量为10BV，纯化完成后用3BV浓度为75％的乙醇溶液洗脱，上样流速和洗脱液流速为2mL/min；

6)将洗脱液在50℃条件下旋转蒸发至体积为原提取液的1/5，得到纯化后的浓缩提取液；

7)将纯化后的浓缩提取液在60℃条件下冷冻干燥，得到芒果苷纯品。

实施例4

一种从芒果叶中提取高纯芒果苷的方法，包括以下步骤：

1)取叶形完整、弹性良好的芒果叶，洗净、沥干，去除叶柄，在40℃低温条件下烘干，粉碎后过80目筛，避光保存备用；

2)将处理好的芒果叶与浓度为75％的乙醇溶液按1:12g/mL的比例混合，微波加热至45℃，分别进行5次超声波提取，提取功率为300w，提取时间20min，；

3)合并提取液，将提取液在4℃，3500r/min的条件下离心15min，取上清液；

4)将上清液在50℃条件下旋转蒸发至体积为原提取液的1/5，得到浓缩提取液；

5)采用AB-8型大孔吸附树脂对浓缩提取液进行纯化，上样量为11BV，纯化完成后用4BV浓度为75％的乙醇溶液洗脱，上样流速和洗脱液流速为2mL/min；

6)将洗脱液在50℃条件下旋转蒸发至体积为原提取液的1/5，得到纯化后的浓缩提取液；

7)将纯化后的浓缩提取液在60℃条件下冷冻干燥，得到芒果苷纯品。

实施例5

一种从芒果叶中提取高纯芒果苷的方法，包括以下步骤：

1)取叶形完整、弹性良好的芒果叶，洗净、沥干，去除叶柄，在60℃低温条件下烘干，粉碎后过120目筛，避光保存备用；

2)将处理好的芒果叶与浓度为95％的乙醇溶液按1:13g/mL的比例混合，微波加热至60℃，分别进行5次超声波提取，提取功率为200w，提取时间45min，；

3)合并提取液，将提取液在0℃，4500r/min的条件下进行离心，取上清液；

4)将上清液在60℃条件下旋转蒸发至体积为原提取液的1/5，得到浓缩提取液；

5)采用AB-8型大孔吸附树脂对浓缩提取液进行纯化，上样量为9BV，纯化完成后用5BV浓度为75％的乙醇溶液洗脱，上样流速和洗脱液流速为2mL/min；

6)将洗脱液在60℃条件下旋转蒸发至体积为原提取液的1/5，得到纯化后的浓缩提取液；

7)将纯化后的浓缩提取液在60℃条件下冷冻干燥，得到芒果苷纯品。

测试例1

分别测定实施例1-5中，芒果苷的提取率以及纯度，提取率以原料中芒果苷的含量计，结果如下：

通过数据可以看出，本发明从芒果叶中提取高纯芒果苷的方法提取率较高，且得到的芒果苷具有较高的纯度，拥有巨大的工业价值和良好的应用前景。

本文中应用了具体个例对本发明的原理及实施方式进行了阐述，以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想；同时，对于本领域的一般技术人员，依据本发明的思想，在具体实施方式及应用范围上均会有改变之处。综上所述，本说明书内容不应理解为对本发明的限制。