一种筛选丙酰辅酶A羧化酶pcc的CT亚基的重组菌及其构建方法与应用

摘要

一种筛选丙酰辅酶A羧化酶pcc的CT亚基的重组菌及其构建方法与应用，属于基因工程和蛋白质工程领域。针对丙酰辅酶A羧化酶酶活较低，以及如何对丙酰辅酶A羧化酶进行高通量筛选的问题，本发明提供了一种筛选丙酰辅酶A羧化酶pcc的CT亚基的重组菌，所述重组菌是以草酰乙酸营养缺陷型的大肠杆菌为宿主菌，在所述宿主菌中过表达甲基丙二酸单酰辅酶A羧基转移酶基因mct，乙酰辅酶A羧化酶BCCP亚基基因accB和乙酰辅酶A羧化酶BC亚基基因accC，本发明还提供了能够提高丙酰辅酶A羧化酶pcc酶活的单一位点突变体以及多位点突变体。本发明可实现丙酰辅酶A羧化酶基因pcc的CT亚基高通量筛选。