一种用于冷冻电镜的免疫金标记蛋白质方法

摘要

本发明提供一种用于冷冻电镜的免疫金标记蛋白质方法，包括如下步骤：1）利用多聚‑L‑赖氨酸溶液和PBS分别对冷冻电镜的格栅进行预处理；2）将格栅正面朝上放置在培养皿中，滴取样品到格栅上，静置孵育后用PBS洗脱；3）在培养皿中加入封闭剂，静置孵育后用PBS洗脱；4）在培养皿中加入一抗，即目标蛋白质的特异性抗体，静置孵育后用PBS洗脱；5）在培养皿中加入二抗，即根据一抗种属选取的免疫金抗体，静置孵育后用PBS洗脱；6）取出格栅并用冷冻电镜成像，分析图像数据得到目标蛋白质结构。本发明结合免疫标记蛋白质技术和冷冻电镜断层扫描技术的优点，实现在冷冻电镜成像中观察到目标蛋白质的同时进行结构解析。