二代测序文库构建中接头连接效率的评估方法

摘要

本发明公开了二代测序文库构建中接头连接效率的评估方法，该方法通过构建两端含接头序列的片段，该片段为L1‑A‑L2，其中，L1、L2为接头，A为DNA片段；检测获取上述构建的L1‑A‑L2的拷贝数；以L1、L2为接头对A片段进行文库构建，文库构建完成后，对文库构建的产物进行纯化回收得到文库a；以L1‑A‑L2为标准品采用qPCR法对文库a进行绝对定量，检测获取文库a中总A片段的分子个数n以及文库a中L1‑A‑L2的分子个数m，文库a中两端连接有接头的分子个数占总A片段分子个数的百分比即为文库构建中接头的连接效率。该方法能够准确获得二代测序文库构建中接头连接的具体百分比。