基于CRSIPR-Cas9技术的肺癌融合基因核酸检测质控品及其制备方法

摘要

本发明提供一种基于CRSIPR‑Cas9技术的肺癌融合基因核酸检测质控品，用于全方位监控融合基因检测的过程。制备步骤如下：(1)利用CRISPR‑Cas9敲入技术构建带有EML4‑ALK、CD74‑ROS1融合基因特定融合位点的单克隆性HBE细胞株；(2)应用步骤(1)中基因编辑成功的单克隆性HBE细胞株结合对照野生型细胞株构建小鼠皮下移植瘤模型；等待肿瘤成长至1cm3后处死模型小鼠，收集肿瘤组织，预处理后固定，石蜡包埋；(3)利用步骤(2)收集的肿瘤组织，按照一定突变/野生比例构建病例组织切片微阵列，得到不同融合频率的肺癌融合基因核酸检测质控品。本发明制备的质控品与非小细胞肺癌具有高度相似性，可极为真实地肺癌样本组织从取材到检测的全过程，实现融合基因检测的全方位监控。