运营中的沥青路面上微生物种属及其数量确定方法

摘要

本发明目的是提供一种运营中的沥青路面上微生物种属及其数量确定方法，解决目前运营中的沥青路面微生物种属不明确和数量难以确定的问题。本发明首先根据运营中沥青路面的工作环境条件，现场采集样本，制备稀释菌液，用接种环挑取第一次富集培养液，在油平板上划线分离，三次富集后，观察在平板上形成的优势菌种，在牛肉膏蛋白胨培养基上多次划线分离，以纯化得到的单菌落；并通过16S rDNA的PCR、测序及NCBI数据库Blast比对分析，鉴定微生物类别；在无菌室内火焰旁，分别测定六个不同稀释度的菌落数。本发明提出的沥青路面微生物类别及其数量方法为沥青路面运营过程微生物对沥青的老化作用奠定基础，提出沥青路面抗微生物老化措施，延长沥青路面使用寿命。