斑马鱼固定装置及其固定方法

摘要

本发明涉及一种斑马鱼固定装置及其固定方法。该斑马鱼固定装置，包括本体，本体的表面开设有固定槽以及容置槽，固定槽与容置槽连通，固定槽用于固定斑马鱼的身体，容置槽用于容置斑马鱼的头部，且容置槽的内侧壁与斑马鱼的头部间隔。在上述斑马鱼固定装置中，固定槽用于固定斑马鱼的身体，也即固定槽的宽度与斑马鱼的身体的宽度适配，固定槽的两个内侧壁可以防止斑马鱼的身体移动。而容置槽用于容置斑马鱼的头部，且容置槽的内侧壁与斑马鱼的头部间隔，可以避免影响斑马鱼的眼动。因此，上述斑马鱼固定装置既能较好的固定斑马鱼，又能避免影响斑马鱼的眼动，从而便于对斑马鱼进行前庭眼动反射测试，而且能消除使用麻醉损伤眼动肌带来的误差。

说明书

技术领域

本发明涉及前庭听觉技术领域，特别是涉及一种斑马鱼固定装置及其固定方法。

背景技术

前庭功能障碍作为一种发病率高、危害多、资源损耗巨大的疾病，严重影响人类健康，三分之一成人曾罹患此病，并有逐年上升的趋势。前庭功能障碍不仅带来眩晕、平衡障碍，继发听力损害等躯体不适，而且还会削弱社会功能、引起心理和精神障碍。耳毒性药物(氨苄类抗生素)滥用，以及环境污染，眩晕人群逐年上升，眩晕已成为一个全球性的健康问题。听毛细胞是听觉系统和平衡系统共同的感受细胞，由于听觉系统内耳迷宫的复杂性，对于听觉毛细胞发育和基因调控的研究可以通过研究模式动物平衡系统的听毛细胞功能来进行，常采用的模式动物有小鼠和斑马鱼。

前庭听觉研究中，斑马鱼是一种优良的模式动物。斑马鱼虽然不像哺乳动物具有耳蜗，但是拥有作为耳石结构的椭圆囊和球囊具有听觉和前庭功能，可以探测由头部相对重力倾斜产生的线性加速度引起的前庭刺激。斑马鱼胚体透明，易于观察前庭听觉结构与发育状况。斑马鱼基因组已完成测序，与人类相似度87％，现已发现多个与人相同的听力/平衡基因，相关试验技术成熟，突变种繁多，普遍用于耳聋基因的分析。对耳毒性药物的反应性上，斑马鱼敏感性与人类相似，而且斑马鱼体型微小、生命周期很短、繁殖迅速，使高通量分析成为可能。所以，斑马鱼在前庭/听觉研究中具有重要的地位和广泛的应用，必须建立相应的测量系统。

前庭眼动反射(vestibulo-ocular reflex，VOR)可以产生与头转向相反的眼动，以维持视网膜成像的稳定。作为所有眼动的基本机制，前庭眼动反射(VOR)是一种简单快速有效的听觉受损检测手段。而在前庭眼动反射测试系统中，如何固定斑马鱼十分重要，其中一个固定方式是将斑马鱼麻醉在盖玻片上的培养液滴，麻醉使得斑马鱼固定在盖玻片上，但是麻药损伤斑马鱼的神经而容易导致测试结果产生误差。

发明内容

基于此，有必要提供一种能较好固定斑马鱼的斑马鱼固定装置及其固定方法。

一种斑马鱼固定装置，包括本体，所述本体的表面开设有固定槽以及容置槽，所述固定槽与所述容置槽连通，所述固定槽用于固定斑马鱼的身体，所述容置槽用于容置所述斑马鱼的头部，且所述容置槽的内侧壁与所述斑马鱼的头部间隔。

在上述斑马鱼固定装置中，固定槽用于固定斑马鱼的身体，也即固定槽的宽度与斑马鱼的身体的宽度适配，固定槽的两个内侧壁可以防止斑马鱼的身体移动。例如，当斑马鱼竖直放置，且头部朝上，背部朝外(朝向工作表面)时，固定槽的两个内侧壁可以防止斑马鱼的身体左右移动以及上下移动。而容置槽用于容置斑马鱼的头部，且容置槽的内侧壁与斑马鱼的头部间隔，可以避免影响斑马鱼的眼动。因此，上述斑马鱼固定装置既能较好的固定斑马鱼，又能避免影响斑马鱼的眼动，从而便于对斑马鱼进行前庭眼动反射测试，而且能消除使用麻醉损伤眼动肌带来的误差。

在其中一个实施例中，所述本体为透光本体。

在其中一个实施例中，所述容置槽包括第一容置槽以及第二容置槽，所述固定槽、所述第一容置槽及第二容置槽依次连通，且所述固定槽的宽度小于所述第二容置槽的宽度，在所述固定槽、所述第一容置槽及所述第二容置槽的排布方向上，所述第一容置槽的宽度逐渐增大。

在其中一个实施例中，所述固定槽的宽度为0.2～0.4mm，所述第二容置槽的宽度为0.9～1.1mm。

在其中一个实施例中，还包括盖玻片，所述盖玻片用于盖设于所述本体的所述工作表面上，以封闭所述容置槽的开口侧，并形成容置腔，所述容置腔用于保持培养基，以供所述斑马鱼呼吸。

一种斑马鱼的固定方法，包括如下步骤：

提供斑马鱼固定装置，所述斑马鱼固定装置包括本体，所述本体包括工作表面，所述工作表面开设有固定槽以及容置槽，所述固定槽与所述容置槽连通，所述固定槽用于固定斑马鱼的身体，所述容置槽用于容置所述斑马鱼的头部，且所述容置槽的内侧壁与所述斑马鱼的头部间隔；以及

将所述斑马鱼的身体卡于所述固定槽内，并使得所述斑马鱼的头部容置于所述容置槽内，所述斑马鱼的头部与所述容置槽的内侧壁间隔。

在其中一个实施例中，将所述斑马鱼的身体卡于所述固定槽内，并使得所述斑马鱼的头部容置于所述容置槽内的步骤包括如下步骤：

将所述斑马鱼及用于供所述斑马鱼呼吸的培养基放置于工作表面上，所述斑马鱼位于所述培养基中；

采用针拨动所述斑马鱼，以使得所述斑马鱼的身体及头部分别与所述固定槽及所述容置槽正对，所述斑马鱼的背部远离所述工作表面；以及

采用吸水纸吸走所述培养基，在吸走所述培养基时，所述斑马鱼的身体及头部分别顺势滑入所述固定槽及所述容置槽内。

在其中一个实施例中，当所述斑马鱼的身体卡于所述固定槽内，所述斑马鱼的头部容置于所述容置槽内后，在所述工作表面涂敷粘着物以粘住所述斑马鱼的身体，避免所述斑马鱼移动。

在其中一个实施例中，当所述斑马鱼的身体卡于所述固定槽内，所述斑马鱼的头部容置于所述容置槽内后，在所述工作表面上，盖设盖玻片，以遮蔽所述斑马鱼的头部。

在其中一个实施例中，所述盖玻片封闭所述容置槽的开口侧，并形成用于保持培养基的容置腔，在容置腔内滴入培养基以供斑马鱼呼吸。

附图说明

图1为本实施例的斑马鱼固定装置的立体示意图；

图2为图1的俯视示意图；

图3为斑马鱼的俯视示意图。

具体实施方式

为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合附图对本发明的具体实施方式做详细的说明。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明。但是本发明能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似改进，因此本发明不受下面公开的具体实施的限制。

需要说明的是，当元件被称为“固定于”另一个元件，它可以直接在另一个元件上或者也可以存在居中的元件。当一个元件被认为是“连接”另一个元件，它可以是直接连接到另一个元件或者可能同时存在居中元件。

除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“及/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。

如图1、图2及图3所示，本实施提供的斑马鱼固定装置10，该斑马鱼固定装置10用于固定斑马鱼20。

斑马鱼固定装置10包括本体100，本体100包括相对的安装表面102以及工作表面104。工作表面104开设有固定槽110以及容置槽120，固定槽110与容置槽120连通。固定槽110用于固定斑马鱼的身体22，容置槽120用于容置斑马鱼的头部24，且容置槽120的内侧壁120a与斑马鱼的头部24间隔。

在上述斑马鱼固定装置10中，固定槽110用于固定斑马鱼的身体22，也即固定槽110的宽度与斑马鱼的身体22的宽度适配，固定槽110的两个内侧壁110a可以防止斑马鱼的身体22移动。例如，当斑马鱼20竖直放置，且头部24朝上，背部26朝外(朝向工作表面104)时，固定槽110的两个内侧壁110a可以防止斑马鱼的身体22左右移动。而容置槽120用于容置斑马鱼的头部24，且容置槽120的内侧壁120a与斑马鱼的头部24间隔，可以避免影响斑马鱼20的眼动。因此，上述斑马鱼固定装置10既能较好的固定斑马鱼20，又能避免影响斑马鱼20的眼动，从而便于对斑马鱼20进行前庭眼动反射测试，而且能消除使用麻醉损伤眼动肌带来的误差。

进一步，在本实施例中，固定槽110远离容置槽120的一端贯穿本体100的端面，容置槽120远离固定槽110的一端贯穿本体100的另一端面。如此，便于形成固定槽110与容置槽120，也便于清洗固定槽110与容置槽120。

进一步，在本实施例中，容置槽120包括第一容置槽122以及第二容置槽124，固定槽110、第一容置槽122及第二容置槽124依次连通，且固定槽110的宽度小于第二容置槽124的宽度，在固定槽110、第一容置槽122及第二容置槽124的排布方向上，第一容置槽122的宽度逐渐增大。进一步，在本实施例中，第一容置槽122靠近固定槽110的一端的宽度与固定槽110的宽度相等，第一容置槽122靠近第二容置槽124的一端的宽度与第二容置槽124的宽度相等。

进一步，在本实施例中，位于同一侧的固定槽110的内侧壁110a与第二容置槽124的内侧壁124a平行，连接同一侧的固定槽110的内侧壁110a与第二容置槽124的内侧壁124a的第一容置槽122的内侧壁122a为斜平面。

进一步，在本实施例中，固定槽110的内侧壁110a与第一容置槽122的内侧壁122a的连接处形成倒圆角(图未示)，如此，可以避免尖角伤害斑马鱼20。

在本实施例中，斑马鱼20为斑马幼鱼。具体地，斑马鱼20为出生4～10天的斑马幼鱼，此时，斑马鱼20的长度为3～4mm，斑马鱼的头部24的宽度为0.8～1.0mm。相应地，在本实施例中，固定槽110的宽度为0.2～0.4mm，第二容置槽124的宽度为0.9～1.1mm。

进一步，在本实施例中，本体100呈长方体形，本体100的长度为6.5mm，宽度为5mm，高度为4mm。本体100的尺寸较小，便于携带。其中，本体100的长边与固定槽110、第一容置槽122及第二容置槽124的排布方向平行，本体100的高为安装表面102与工作表面104之间的距离。

进一步，在本实施例中，本体100为透光本体。如此，可以将本体100的安装表面102设于红外光源的光罩上，并使得斑马鱼20位于竖直方向上，且斑马鱼20的头部24相对于斑马鱼20的身体22位于上方，再在本体100的工作表面104所在的一侧设置红外摄像机，在黑暗环境下，通过红外摄像机获取经红外光源照射的斑马鱼的头部图像，根据图像获取斑马鱼20的前庭眼动反射结果。在本实施例中，红外光源、本体100及红外相机依次排布，且位于同一直线上，图像获取方式为透射式，在其他实施例中，本体100与红外相机正对设置，红外光源设于红外相机上，且与本体100正对，图像获取方式为反射式，此时本体100可以不透光。

进一步，在本实施例中，本体100为有机玻璃。

进一步，在本实施例中，斑马鱼固定装置10还包括盖玻片(图未示)，盖玻片用于盖设于本体100的工作表面104上，以封闭容置槽120的开口侧，并形成容置腔(图未示)，容置腔用于容置斑马鱼的头部24以及用于保持培养基，以供斑马鱼20呼吸。而且位于斑马鱼的头部24处的盖玻片，还能消除水滴透镜效应带来的图像畸变。

在本实施例中，还提供一种斑马鱼的固定方法，包括如下步骤：

步骤S210，提供上述的斑马鱼固定装置。

步骤S220，将斑马鱼的身体卡于固定槽内，并使得斑马鱼的头部容置于容置槽内，斑马鱼的头部与容置槽的内侧壁间隔。

在本实施例中，步骤S220包括如下步骤：

步骤S222，将斑马鱼及用于供斑马鱼呼吸的培养基放置于工作表面上，斑马鱼位于培养基中。在本实施例中，采用吸管吸取培养于培养基中的斑马鱼及培养基，将斑马鱼及培养基滴于工作表面上，也即斑马鱼与培养基同时被放置在工作表面上。可以理解，在其他实施例中，斑马鱼与培养基也可以一前一后的放置在工作表面上。具体地，在本实施例中，吸管为巴斯吸管。

步骤S224，采用针拨动斑马鱼，以使得斑马鱼的身体及头部分别与固定槽及容置槽正对，斑马鱼的背部远离安装表面。也即使得斑马鱼的身体及头部分别位于固定槽及容置槽的上方。具体地，在本实施例中，采用细铜针拨动斑马鱼。采用针拨动斑马鱼，可以使得斑马鱼的身体快速准确的对准固定槽。

步骤S226，吸走培养基，以使得将斑马鱼的身体卡于固定槽内，并使得斑马鱼的头部容置于容置槽内。在本实施例中，采用吸水纸吸走培养基，在吸走培养基时，斑马鱼的身体及头部分别顺势滑入固定槽及容置槽内。具体地，在本实施例中，吸水纸为日常生活中所用的卫生纸。

可以理解，在其他实施例中，将斑马鱼及培养基滴于固定槽后，也可以等斑马鱼主动进入固定槽。

步骤S230，在工作表面涂敷粘着物以粘住斑马鱼的身体，避免斑马鱼移动。具体地，在本实施例中，粘有粘着物的刷子，自固定槽与容置槽的交界处，沿着固定槽滑动，以在工作表面涂敷粘着物。也即在本实施例中，在固定槽上方涂敷粘着物，不在容置槽上方涂敷粘着物。粘着物能粘住斑马鱼的身体，避免斑马鱼上下移动(斑马鱼20的头部24与身体22分别对应上下)，使得斑马鱼更加牢固的固定于本体上。可以理解，在其他实施例中，步骤S230可以省略。

更具体地，在本实施例中，粘着物为质量分数为3％的甲基纤维素溶液。在其他实施例中，粘着物也可以为琼脂。

步骤S240，在工作表面上，盖设盖玻片，以遮蔽斑马鱼的头部。

在本实施例中，盖玻片通过粘着物吸附于工作表面上。可以理解，在其他实施例中，当步骤S230省略时，可以在工作表面上涂敷清水，盖玻片通过清水吸附于工作表面上。设置盖玻片，可以消除水滴透镜效应带来的图像畸变。

具体地，在本实施例中，盖玻片的尺寸与工作表面104的尺寸一致，完全覆盖工作表面104。更具体地，在本实施例中，盖玻片的长度为6.5mm，宽度为5mm。

步骤S250，盖玻片封闭容置槽的开口侧，并形成容置腔，在容置腔内滴入培养基以供斑马鱼呼吸。盖玻片不仅能消除水滴透镜效应带来的图像畸变，还能用于封闭容置槽的开口侧，使得培养基稳定于容置腔内。

采用上述斑马鱼的固定方法固定斑马鱼后，将本体的安装表面设于红外光源的光罩上，以进行获取斑马鱼的前庭眼动反射结果，最后取下盖玻片，并将斑马鱼从本体上冲洗下来，以待下次使用。

上述斑马鱼的固定方法能消除在前庭眼动反射测试中，因使用麻醉损伤眼动肌带来的误差，而且上述斑马鱼的固定方法与前庭眼动反射测试相对独立，可以提供多个斑马鱼固定装置，从而可以多人合作固定斑马鱼，加快测试效率，每条鱼平均花费2分钟，利于高通量测试。

以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。