一种快速克隆芥菜型油菜种皮基因TT2CDS序列的方法

摘要

本发明涉及一种取代从油菜种皮中提取TT2基因CDS序列的方法，因为叶片中TT2基因的mRNA表达较低CDS序列无法克隆，种皮取材不便。TTG1转录因子能促进TT2基因表达，通过过表达TTG1，提高TT2表达水平，可以方便TT2基因CDS的克隆。首先把油菜TTG1基因转化到发根农杆菌A4中，再用转化的侵染液侵染油菜外植体，再进行共培养，继代培养和扩增培养得到转基因的毛状根，取1g新鲜的转基因毛状根，进行RNA提取、反转录，再进行PCR反应，进行大肠杆菌转化，送公司测序。就能克隆出TT2基因，从而达到快速克隆控制油菜种皮颜色基因TT2CDS的目的。