恒温扩增与量子点荧光共振能量转移联用用于同时检测多种MicroRNAs的方法

摘要

本发明公开了检测一种细胞中miRNA含量的检测方法，通过联合超支化滚环扩增(HRCA)和量子点(QD)的荧光共振能量转移(FRET)的技术手段，解决了同时检测细胞中miR‑21和miR‑221两种miRNA的技术问题，具有检测快捷灵敏的技术效果。本发明相应的保护一种基于FRET的纳米荧光化学传感器、一种检测方法及相关应用。该传感器包括miR‑21和miR‑221的环形模板、Bst DNA聚合酶、dNTPs、用于HRCA反应的反向引物、捕获探针、链霉亲和素量子点的525QD、Cy3和Texas Red标记的报告探针。该检测方法通过HRCA反应将细胞中miR‑21和miR‑221的信号放大，HRCA产物与捕获探针及报告探针发生杂化反应，通过链霉素亲和素‑生物素的作用，形成525QD‑DNA‑Cy3/Texas Red纳米结构，从而使QD和受体之间产生有效FRET，通过测量荧光强度从而测定miR‑21和miR‑221的含量。