CRISPR/Cas9载体组合及其在基因敲除中的应用

摘要

本发明公开了SgRNA组合，包括特异性靶向GGTA1基因的SgRNA、特异性靶向CMAH基因的SgRNA和特异性靶向β4GalNT2基因的SgRNA；本发明还公开了CRISPR/Cas9载体组合，包括GGTA1‑CRISPR/Cas9载体、CMAH‑CRISPR/Cas9载体和β4GalNT2‑CRISPR/Cas9载体；本发明还公开了CRISPR/Cas9载体组合在敲除GGTA1基因、CMAH基因和β4GalNT2基因中的应用。通过设计特异性靶向的SgRNA序列，三个基因敲除效率分别为56％、63％和41％，敲除与免疫排斥反应有关的三个基因，得到三基因敲除猪，并取得其心脏瓣膜。