一株利用CRISPR/Cas9系统敲除XKS1基因的工业酿酒酵母菌株及构建方法

摘要

本发明公开了一株敲除XKS1基因以高效产木糖醇的工业酿酒酵母菌株，其命名为SEB9，保藏编号为CGMCC No.14272；本发明还涉及一株上述酿酒酵母菌株的构建方法，其包括如下步骤：敲除出发菌株的KanMX基因构建KanMX—菌株，并筛选高木糖醇产量的KanMX—菌株；敲除所筛选的KanMX—菌株的XKS1基因构建ΔXKS1菌株，并筛选高木糖醇产率的ΔXKS1菌株。本发明通过CRISPR/Cas9基因编辑技术，可以通过一次性酵母转化迅速而快捷地敲除XKS1基因，阻断木酮糖进一步向5‑磷酸木酮糖代谢从而获得高产木糖醇的菌株；通过本发明所述构建方法制备的酿酒酵母菌株SEB9，与出发菌株相比，其木糖发酵生产木糖醇的性能优越，收率可接近理论值1.0，能有效提高木糖醇的收率和木糖醇产量，其具有良好的应用前景。