一种人原代结肠癌细胞的分离及培养方法

摘要

本发明提供了一种人原代结肠癌细胞的分离及培养方法，包括以下步骤：(1)无菌条件下切取新鲜结肠癌组织，4℃密封运回实验室；(2)组织处理器械消毒；(3)用手术剪分离结肠癌组织，将组织放入预冷无菌含双抗的PBS液中洗涤数次除去血管、脂肪、坏死组织；(4)剪碎组织，并用预热的胰酶和iv型胶原酶分别消化；(5)终止消化，离心，弃上清；(6)取细胞滤液用锥虫蓝染色检测细胞活性；(7)细胞计数后接种到包被后的培养瓶；(8)置于37℃、5％CO2环境中培养；(9)细胞纯化；(10)细胞传代培养；(11)细胞形态鉴定；(12)细胞存活率测定；(13)免疫学鉴定。本发明提供的一种人结肠癌细胞的分离及培养方法，操作简单，所得细胞数量多，成活率高，是一种理想的人结肠癌细胞原代分离与培养方法，为实验提供可靠的细胞资源。