促皮质素与胰岛素样生长因子1融合蛋白及其制备方法

摘要

本发明涉及一种基因重组人促皮质素(ACTH)与胰岛素样生长因子1(IGF‑1)融合蛋白及其制备方法。本发明首先采用适合在工程菌中表达的优化密码子，构建了编码ACTH与IGF‑1融合蛋白的表达质粒：HisTag‑linker‑EKst‑ACTH‑IGF‑1 pET30a质粒，编码序列(CDS)中包含组氨酸标签(HisTag)序列、连接序列(linker)、肠激酶底物(EKst)序列以及ACTH和IGF‑1序列。在大肠杆菌表达菌株BL21‑DE3中诱导表达后，用镍(Ni)柱从破碎溶解的包涵体中分离纯化出HisTag‑linker‑EKst‑ACTH‑IGF‑1多肽链，之后用带有组氨酸标签的肠激酶切下HisTag‑linker‑EKst片段，然后再用Ni柱除去肠激酶和HisTag‑linker‑EKst片段，得到ACTH‑IGF‑1融合蛋白。