一种利用PacBio单分子测序批量高精度获得昆虫COI基因条形码区域的方法

摘要

本发明公开了一种利用PacBio单分子测序批量高精度获得昆虫COI基因条形码区域的方法。本发明提供的方法包括如下步骤：(1)将多个昆虫的DNA样本分别进行PCR扩增；正向引物依次包括正向标签和对应于昆虫COI基因的正向片段，反向引物依次包括反向标签和对应于昆虫COI基因的反向片段；正向引物中的正向片段均相同，反向引物中的反向片段均相同；每两个正向引物的正向标签之间至少具有2个核苷酸的差异；每两个反向引物的反向标签之间至少具有2个核苷酸的差异；(2)分别取所有PCR扩增的扩增产物，混合，得到混合样本；(3)将混合样本进行第三代测序。本发明对于高通量获得昆虫COI基因条形码序列具有重大的应用推广价值。