一种超声波辅助农杆菌介导花粉的玉米转基因方法

摘要

本发明公开了一种使用超声波辅助农杆菌介导花粉的非组培转基因方法，属于基因工程技术领域。步骤为：（1）液体培养含有目的基因的农杆菌菌株，用营养液稀释至0.6～0.8OD；（2）将花粉溶于浓度为10～20%的蔗糖溶液中，超声波处理后静置，倒掉上清液；（3）将农杆菌悬浊液和花粉受体混合，加入50～200μmol/L乙酰丁香酮，静置5～15分钟，用细刷将沉淀的处理花粉授到待转化植物柱头上，并套袋挂牌标记，隔两天处理一次，反复2～3次，待转化植物籽粒成熟后收获播种，用筛选标记基因筛选即可获得转基因植株。本发明方法转化机理清楚，易于操作，可提高转化率和结实率，稳定性好，具有较大的实用价值。