一种大鼠脑垂体细胞的分离及培养方法

摘要

本发明提供了一种大鼠脑垂体细胞的分离及培养方法，包括以下步骤：(1)选取8d的雄性SD大鼠，麻醉处死；(2)将大鼠麻醉后腹面向上固定于板上，无菌条件下取出大鼠脑垂体，将脑垂体放入预冷PBS液中洗涤数次除去血渍，去除垂体包膜；(3)无菌条件下，在预冷的PBS中用眼科剪将脑垂体剪成1mm×1mm碎块；(4)用预热的III型胶原酶结合中性酶混合消化；(5)终止消化，过滤，收集滤液离心，弃上清，加培养基重悬，重复操作三次；(6)接种到24孔培养板培养；(7)将培养7d的细胞经胰酶消化后再次筛网纯化，离心弃上清，重悬接种于处理后的培养板中；(8)细胞免疫荧光鉴定。本发明提供的一种大鼠脑垂体细胞的分离及培养方法，操作简单，所得脑垂体细胞存活率高、活性好，可用于建立体外实验模型细胞，满足脑垂体细胞实验的要求。