梨优异加工品质新品种的创制与应用

摘要

本发明公开了一种梨优异加工品质新品种的创制与应用。本发明首先提供了一种制备梨膏的方法，依次包括如下步骤：(1)以‘CSSL‑777’的果实或‘CSXL‑666’的果实为唯一原料，制备果汁；(2)在70‑80℃温度下蒸发浓缩，直至得到膏状物(梨膏)。本发明提供的两个梨新品种的果实制备得到梨膏晶莹透明、呈现琥珀色，并且本发明提供的两个梨新品种的果实制备得到梨膏的糖酸比更高、更为适口。综上所述，本发明的发明人提供的梨新品种的果实在制备梨膏中具有显著优势，可用于制备梨膏类的食品、保健品或药品，具有重大的应用推广价值以及庞大的市场前景。

说明书

技术领域

本发明涉及一种梨优异加工品质新品种的创制与应用。

背景技术

“医食同源，吃营养，吃健康”已成为人们的共识。梨是中国重要果树之一，不仅营养丰富，还具有药用功效。梨性凉、味甘微酸，入肺、胃经，能生津润燥，有止咳化痰、滋阴润肺、解酒毒的作用。因此，随着我国近几年“雾霾”的加剧，进一步推进梨产业的发展对提高中国人的健康水平和生活质量具有重要意义。

中国是世界梨属(Pyrus L.)植物最主要的起源地之一，遗传多样性丰富。起源于中国的梨有砂梨、白梨、秋子梨、新疆梨杜梨及豆梨等13个种，其中砂梨、白梨、秋子梨、新疆梨为栽培种，杜梨及豆梨为野生(砧木)种，砂梨和豆梨分布于长江流域，白梨和杜梨分布于黄河流域，秋子梨分布于东北地区。中国也是世界梨第一生产大国，2016年中国梨栽培总面积和总产量分别为108.9万hm2和1707.3万t，占世界总面积和总产量的69.6％和66.5％。经过劳动人民长期的栽培实践与系统选育，形成了砀山酥梨、鸭梨、南果梨、京白梨、库尔勒香梨、雪花梨、苍溪雪梨及三花梨等传统地方名产品种，其中山东有莱阳慈梨、冠县鸭梨、栖霞香水梨、黄县长把梨及泰山美人梨等；在品种构成成上，一直以传统地方品种为主，砀山酥梨、鸭梨、雪花梨等占全国梨总产量的40％；凭借拥有丰富梨种质资源优势，经几代人的努力，中国梨新品种选育成就突出，相继育种了早酥、黄花、翠冠、黄冠及中梨1号等100余个优良新品种，有力推动了中国梨产业发展。

山东的‘莱阳慈’梨和安徽的‘砀山酥’梨等是我国白梨系统(Pyrus bretschneideri Rehd.)的著名传统地方名产品种，长期的栽培不仅对当地的自然风土条件具有良好的适应性，而且均具有较高的市场知名度，但随着人们消费水平的提高，均存在一定的缺陷或不足，名产品种的品牌价值得不到有效发挥，有待进一步改良。

山东烟台渤海制药有限公司以莱阳梨膏为原料生产的“莱阳梨膏”、“润肺膏”及“莱阳梨止咳糖浆”等产品，深受消费者的欢迎，目前占市场同类产品份额的90％以上，产品供不应求。因此，进一步利用现代育种技术对‘莱阳慈’梨和‘砀山酥’梨进行改良，选育梨膏加工性能优异的梨新品种，对于提高企业产品质量与效益、满足消费需求具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种梨优异加工品质新品种的创制与应用。

本发明首先提供了一种制备梨膏的方法，依次包括如下步骤：

(1)以‘CSSL-777’的果实或‘CSXL-666’的果实为唯一原料，制备果汁；

(2)在70-80℃温度下蒸发浓缩，直至得到膏状物(梨膏)。

所述膏状物在70-80℃温度下的比重为1.22-1.24。

所述膏状物在20℃温度下的比重为1.24-1.26。

所述步骤(1)和所述步骤(2)之间还包括如下步骤：将步骤(1)得到的果汁加热至微沸，保持微沸状态下撇除浮沫，冷却，然后离心收集上清液或过滤收集滤液，然后进行步骤(2)。

所述果实为无腐烂的成熟果实。

所述果实已去除果柄。

在制备果汁前，先用水清洗所述果实。

制备果汁的方法具体如下：先将果实破碎得到最大直径≤4厘米的果实块，然后将果实块进行榨汁，然后过100目筛网并收集果汁。

制备果汁的方法具体如下：将果实进行榨汁，然后过100目筛网并收集果汁。

所述离心的条件为5000rpm离心30秒。

所述方法中，每千克鲜重的果实具体得到100g膏状物。

以上任一所述方法制备得到的梨膏也属于本发明的保护范围。

本发明还保护以‘CSSL-777’的果实或‘CSXL-666’的果实为唯一原料制备得到的梨膏。所述果实为无腐烂的成熟果实。所述果实已去除果柄。

本发明还保护‘CSSL-777’的果实或‘CSXL-666’的果实在制备梨膏中的应用。所述果实为无腐烂的成熟果实。所述果实已去除果柄。

本发明还保护‘CSSL-777’的果实或‘CSXL-666’的果实作为原料在制备产品中的应用。所述果实为无腐烂的成熟果实。所述果实已去除果柄。所述产品为食品或者保健品或者药品。所述药品具体可为具有止咳和/或祛痰和/或生津和/或润肺功能的药品。

本发明还保护‘CSSL-777’或‘CSXL-666’在生产梨膏中的应用。

本发明还保护‘CSSL-777’或‘CSXL-666’在生产以梨为原料的产品中的应用。所述产品可为食品、保健品或药品。所述药品具体可为具有止咳和/或祛痰和/或生津和/或润肺功能的药品。

‘CSSL-777’，又称梨(Pyrus sp.)CSSL-777，已于2017年5月10日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，保藏登记号为CGMCC NO.12822。

‘CSXL-666’，又称梨(Pyrus sp.)CSXL-666，已于2017年5月10日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，保藏登记号为CGMCC NO.12223。

本发明的发明人创制了两个梨的新品种，梨(Pyrus sp.)CSSL-777和梨(Pyrus sp.)CSXL-666。现有梨品种的果实制备得到的梨膏都呈现不透明的暗棕色，而本发明提供的两个梨新品种的果实制备得到梨膏晶莹透明、呈现琥珀色，并且本发明提供的两个梨新品种的果实制备得到梨膏的糖酸比更高、更为适口。综上所述，本发明的发明人提供的梨新品种的果实在制备梨膏中具有显著优势，可用于制备梨膏类的食品、保健品或药品，具有重大的应用推广价值以及庞大的市场前景。

附图说明

图1为实施例3的步骤一制备的各个梨膏的照片。

具体实施方式

以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。实施例中所用的营养钵容积约为350mL。育苗基质：本发明的实施例中采用的育苗基质为山东艺景园林有限公司生产的用于花卉苗木栽植的穴盘基质，一般各花卉苗木公司均有生产和销售。

‘新梨7号’梨，提及它的参考文献：刘建萍，阎春雨等，早熟、优质、耐贮梨新品种新梨7号选育研究，果树学报，2002，19(1):36-38。‘新梨7号’梨的亲本组合是库尔勒香梨(新疆梨，P.sinkiangensisYu)×早酥梨，早酥梨亲本是苹果梨(沙梨，P.pyrifolia Burm.)×身不知，经考证，身不知是西洋梨(P.communis L.)与白梨(P.bretschneideri Rehd.)的杂种后代。因此，‘新梨7号’梨含有梨属(Pyrus)新疆梨、沙梨、西洋梨和白梨等4个种的血缘。‘新梨7号’梨的亲本追溯见文献：曹玉芬主编，中国梨品种，中国农业出版社，2014；曹玉芬主编，中国梨品种，中国农业出版社，2014；曹玉芬主编，中国梨品种，中国农业出版社，2014。

‘砀山酥’梨，提及它的参考文献：聂敬全,蔡永萍等，砀山酥梨果实石细胞与薄壁细胞发育关系的解剖学研究，园艺学报，2009,36(8):1209-1214。

‘莱阳慈’梨，提及它们的参考文献：李文香，周莎莎等，微真空贮藏条件下莱阳梨果实褐变的生理机制，食品科学，2013,34(6)：266-270。

MS基本培养基的大量元素母液的制备方法：将1650mg NH₄NO₃、1900mg>3、440mg>2·2H₂O、370mg>4·7H₂O和170mg>2PO₄溶于水并用水定容至1L。

实施例1、梨育种

1、杂交(在新疆塔里木进行)

2003年4月，将‘莱阳慈’梨的花粉对去雄后的‘新梨7号’梨进行授粉，收获F₁杂交种子，将F₁杂交种子洗净后放到1-3℃冰箱保鲜室层积处理60d左右(目的是通过满足需冷量来解除种子休眠)。

2、温室育苗(在山东泰安进行)

2003年12月，将步骤1得到的F₁杂交种子播种于装有育苗基质的营养钵(每个营养钵播种3-5粒种子)培养至实生苗高度为8-15cm且根颈处木质化(通常为播种2-3个月)，然后将实生苗移栽至新的装有育苗基质的营养钵(每个营养钵移栽1株)进行培养；本步骤中的培养条件为：25℃、每天光照12小时(光照强度3000lx)，从种子萌发开始每7-10天浇一次营养液(将MS基本培养基的大量元素母液用水稀释至10倍体积即为营养液)、每次每个营养钵浇40-50ml。

3、杂种实生苗定植(在山东泰安进行)

2004年2月，在拟定植实生苗的选种圃(大田)中每亩施入有机肥(本实施例中采用的为充分腐熟的奶牛粪)6000kg并浇水沉实；2004年4月，将860株步骤2得到的实生苗定植于选种圃，2004年4月在定植有实生苗的选种圃中每亩再施入有机肥(本实施例中采用的为充分腐熟的奶牛粪)6000kg并及时浇水。

4、2009年，从杂种实生苗中筛选综合性状优良的植株。

单个植株称为株系，可从上面剪取枝条嫁接，得到新品系。

将性能最为优良的一株植株命名为‘CSXL-666’。

将性能优良的另一株植株命名为‘新慈香梨’。

‘CSXL-666’上生长的成熟果实具有如下特性：果实圆形，纵径10.5cm，横径10.6cm，单果重597g，最大单果重780g；果实底色绿黄色，果点不明显；果梗长3.6cm、粗3.5mm，基部膨大，斜生，梗洼深度广度中，萼片残存、呈聚合态，萼洼隆起；果心居中，种子卵圆形，果肉白色细腻；果实硬度为4.65kg·cm^-2，汁多味甘，气味浓香，成熟时可溶性固形物含量为13.3％，品质优。

‘CSXL-666’，又称梨(Pyrus sp.)CSXL-666，已于2017年5月10日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，保藏登记号为CGMCC NO.12223。

实施例2、梨育种

用‘砀山酥’梨代替‘莱阳慈’梨，其他同实施例1。

将性能最为优良的一株植株命名为‘CSSL-777’。

将性能优良的另两株植株分别命名为‘山农酥梨2号’和‘山农酥梨3号’。

‘CSSL-777’上生长的成熟果实具有如下特性：果实纵径10.8cm，横径9.8cm，单果重460g，最大单果重738g；果实底色黄绿色，全果着果锈，表面有棱沟；果梗斜生，长4.2cm、粗3.4mm，基部无膨大，梗洼深度浅，萼片宿存、呈聚合态，萼洼隆起；果心居中，种子卵圆形，心室数5，果肉白色；果实硬度为4.01kg·cm^-2，质地细密，汁多味甘，成熟时果实微香，可溶性固形物含量达12.0％，品质优。

‘CSSL-777’，又称梨(Pyrus sp.)CSSL-777，已于2017年5月10日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，保藏登记号为CGMCC NO.12822。

实施例3、应用各个植株的成熟果实制备梨膏

一、制备梨膏。

分别采用‘莱阳慈’、‘CSXL-666’、‘新慈香梨’、‘砀山酥’、‘CSSL-777’、‘山农酥梨2号’和‘山农酥梨3号’的成熟果实制备梨膏。

制备梨膏的方法如下：

1、取已去除果柄的无腐烂的成熟果实，用自来水清洗。

2、取完成步骤1的果实，进行初步破碎，得到最大直径≤4厘米的果实块。

3、取步骤2得到的果实块，用榨汁机榨汁，然后过100目筛网，收集果汁。

4、取步骤3得到的果汁，加热至微沸，保持微沸状态下撇除浮沫，然后自然冷却，然后5000rpm离心30秒，收集上清液。

5、取步骤4得到的上清液，在70-80℃温度下蒸发浓缩，直至得到70-80℃温度下比重为1.22-1.24的膏状物，冷却至室温，即为梨膏。

70-80℃时比重为1.22-1.24对应20℃时比重为1.24-1.26。

每千克鲜重的‘莱阳慈’已去除果柄的无腐烂的成熟果实，得到100g梨膏。

每千克鲜重的‘CSXL-666’已去除果柄的无腐烂的成熟果实，得到100g梨膏。

每千克鲜重的‘新慈香梨’已去除果柄的无腐烂的成熟果实，得到100g梨膏。

每千克鲜重的‘砀山酥’已去除果柄的无腐烂的成熟果实，得到100g梨膏。

每千克鲜重的‘CSSL-777’已去除果柄的无腐烂的成熟果实，得到100g梨膏。

每千克鲜重的‘山农酥梨2号’已去除果柄的无腐烂的成熟果实，得到100g梨膏。

每千克鲜重的‘山农酥梨3号’已去除果柄的无腐烂的成熟果实，得到100g梨膏。

二、对各个梨膏进行外观和口味的感官评价。

步骤一制备的各个梨膏的照片见图1。以‘CSSL-777’成熟果实为原料制备的梨膏，外观晶莹透明、呈现琥珀色，口感香甜可口。以‘砀山酥’成熟果实为原料制备的梨膏，外观不透明、呈现暗棕色，口感酸甜。以‘CSXL-666’成熟果实为原料制备的梨膏，外观晶莹透明、呈现琥珀色，口感甜、略带酸味。以‘莱阳慈’成熟果实为原料制备的梨膏，外观不透明、呈现暗棕色，口感酸味重。

三、检测步骤一制备的各个梨膏的总糖含量、总酸含量，计算糖酸比。

检测梨膏的总糖含量的方法：参考国标GB/T 15038-2006《葡萄酒、果酒通用分析方法》菲林试剂直接滴定法。检测梨膏的总酸含量的方法：参考国标GB/T 15038-2006《葡萄酒、果酒通用分析方法》酸碱中和滴定指示剂法。单位质量梨膏中的总糖含量除以总酸含量＝糖酸比。

每克梨膏中的总糖含量(mg)、总酸含量(mg)的结果以及糖酸比的结果见表1。

表1

总糖(mg/g)总酸(mg/g)糖酸比以‘CSSL-777’成熟果实为原料制备的梨膏629.37.6881.94以‘砀山酥’成熟果实为原料制备的梨膏555.87.4674.50以‘山农酥梨2号’成熟果实为原料制备的梨膏573.77.8273.36以‘山农酥梨3号’成熟果实为原料制备的梨膏552.18.1467.83以‘CSXL-666’成熟果实为原料制备的梨膏631.812.4350.83以‘莱阳慈’成熟果实为原料制备的梨膏509.317.0629.85以‘新慈香梨’成熟果实为原料制备的梨膏572.914.6839.03

四、检测各个梨膏的各种糖含量

采用HPLC法检测检测步骤一制备的各个梨膏的果糖含量、山梨醇含量、葡萄糖含量和蔗糖含量，将上述四种糖的总量计作总糖含量。

HPLC法检测果糖或山梨醇或葡萄糖或蔗糖的方法：采用Waters 600高效液相色谱仪，RID-10A检测器,YMC-Pack Polyamine Ⅱ色谱柱(250×4.6mm，5μm)；流动相由3体积份乙腈和1体积份水组成，流速为0.8mL/min；进样体积为10μL；果糖标准品的出峰时间为15.16min(D-果糖标准品购自Sigma公司，CAS号57-48-7)，山梨醇标准品的出峰时间为17.65min(D-山梨醇标准品购自Sigma公司，CAS号50-70-4)，葡萄糖标准品的出峰时间为19.03min(D-葡萄糖标准品购自Sigma公司，CAS号50-99-7)，蔗糖标准品的出峰时间为26.53min(蔗糖标准品购自Sigma公司，CAS号57-50-1)。

每克梨膏中的果糖含量(mg)、山梨醇含量(mg)、葡萄糖含量(mg)、蔗糖含量(mg)和总糖含量(mg)的结果见表2。

表2

五、检测各个梨膏的各种酸含量

采用HPLC法检测步骤一制备的各个梨膏的苹果酸含量、柠檬酸含量、草酸含量、酒石酸含量、乳酸含量和琥珀酸含量，将上述六种酸的总量计作总酸含量。

HPLC法检测苹果酸或柠檬酸或草酸或酒石酸或乳酸或琥珀酸的方法：采用Waters600型液相色谱仪，Waters 2487双波长紫外检测器(检测波长210nm)，Thermo Hypersil GOLD液相色谱柱(250×4.6mm，5μm)，填充物为十八烷基硅烷；流动相由1.5体积份甲醇和98.5体积份1.1506g/L磷酸二氢铵水溶液(pH2.3)组成，流速为0.4mL/min；进样体积10μL；苹果酸标准品的出峰时间为11.49min(L-苹果酸标准品购自Sigma公司，CAS号97-67-6)，柠檬酸标准品的出峰时间为17.83min(柠檬酸标准品购自Sigma公司，CAS号77-92-9)，草酸标准品的出峰时间为7.95min(草酸标准品购自Sigma公司，CAS号144-62-7)，酒石酸标准品的出峰时间为8.95min(L-酒石酸标准品购自Sigma公司，CAS号87-69-4)，乳酸标准品的出峰时间为12.17min(乳酸标准品购自Sigma公司，CAS号50-21-5)，琥珀酸标准品的出峰时间为19.33min(琥珀酸标准品购自Sigma公司，CAS号110-15-6)。

每克梨膏中的苹果酸含量(mg)、柠檬酸含量(mg)、草酸含量(mg)、酒石酸含量(mg)、乳酸含量(mg)、琥珀酸含量(mg)和总酸含量(mg)的结果见表3。

表3

六、检测各个梨膏的各种酚含量

采用HPLC法检测步骤一制备的各个梨膏的没食子酸含量、绿原酸含量、咖啡酸含量、阿魏酸含量、儿茶素含量、原花青素含量、表儿茶素含量和根皮苷含量，将上述八种物质的总量计作总酚含量。

HPLC法检测没食子酸、绿原酸、咖啡酸、阿魏酸、儿茶素、原花青素、表儿茶素和根皮苷的方法如下：

采用Waters Allicance 2695型液相色谱仪，Waters 2998光电二极管矩阵检测器(检测波长280nm)，Symmetry C18液相色谱柱(250×4.6mm，5μm)；流动相由A相(0.6％冰乙酸溶液)和B相(乙腈)组成，流动相流速为1mL/min；进样体积10μL；

洗脱程序：第0-1min、B相占流动相的体积百分含量为5％，第1-35min、B相占流动相的体积百分含量由5％线性上升至35％，第35-40min、B相占流动相的体积百分含量为35％，第40-42min、B相占流动相的体积百分含量由35％线性下降至5％，第42-52min、B相占流动相的体积百分含量为5％；

没食子酸标准品的出峰时间为6.39min(没食子酸标准品购自Sigma公司，CAS号149-91-7)，绿原酸标准品的出峰时间为15.77min(绿原酸标准品购自Sigma公司，CAS号327-97-9)，咖啡酸标准品的出峰时间为17.48min(咖啡酸标准品购自Sigma公司，CAS号331-39-5)，阿魏酸标准品的出峰时间为23.87min(阿魏酸标准品购自Sigma公司，CAS号1135-24-6)，儿茶素标准品的出峰时间为12.63min(儿茶素标准品购自Sigma公司，CAS号154-23-4)，原花青素标准品的出峰时间为13.82min(原花青素标准品购自Sigma公司，CAS号4852-22-6)，表儿茶素标准品的出峰时间为16.03min(表儿茶素标准品购自Sigma公司，CAS号490-46-0)，根皮苷标准品的出峰时间为29.04min(根皮苷标准品购自Sigma公司，CAS号60-81-1)。

每克梨膏中的没食子酸含量(μg)、绿原酸含量(μg)、咖啡酸含量(μg)、阿魏酸含量(μg)、儿茶素含量(μg)、原花青素含量(μg)、表儿茶素含量(μg)、根皮苷含量(μg)和总酚含量(μg)的结果见表4。

表4

以上结果表明，‘CSSL-777’梨和‘CSXL-666’梨为原料制备的梨膏的品质均明显优于各自的亲本对照‘砀山酥’梨和‘莱阳慈’梨，其中以‘CSSL-777’梨为原料制备的梨膏品质最优。