一种利用磁感应蛋白作为纯化标签实现外源蛋白一步纯化与固定化的方法，应用及通用载体

摘要

本发明提供一种利用磁感应蛋白作为纯化标签实现外源蛋白一步纯化与固定化的方法，应用及通用载体。该方法包括：1)以pET‑28a(+)为载体质粒，向其中插入磁感应蛋白基因，构建一通用载体；2)将外源蛋白基因插入通用载体中，构建重组表达质粒，再将其导入宿主细胞，获得重组菌株；以及3)培养重组菌株，诱导外源蛋白表达，收集产物，向其中投入纳米铁珠，实现外源蛋白的一步分离纯化与固定化。该通用载体从5’至3’依次包括：T7启动子、磁感应蛋白基因、凝血酶切割位点、linker、多克隆位点以及T7终止子。本发明提供了一种操作简单的、效率提高的以及成本降低的一步实现外源蛋白纯化与固定化的方法及应用。