低压离子色谱‑电感耦合等离子体质谱联用同时测定无机锡及有机锡化合物的方法

摘要

本发明提供了一种低压离子色谱‑电感耦合等离子体质谱联用同时测定无机锡及有机锡化合物的方法，使用包括低压泵、六通进样阀、进样环、低压阳离子分离柱和电感耦合等离子体质谱仪的分析仪器，步骤如下：①测绘基线，②测绘试样中的无机锡及有机锡化合物的谱图，③测绘标样中的无机锡及有机锡化合物的谱图，绘制无机锡及有机锡化合物的工作曲线，④计算试样中的无机锡及有机锡化合物的浓度。该方法能够同时测定试样中的总无机锡、一甲基氯化锡、二丁基氯化锡、二苯基氯化锡、三甲基氯化锡以及三丁基氯化锡的浓度。

说明书

技术领域

本发明属于锡化合物的检测分析技术领域，特别涉及低压离子色谱-电感耦合等离子体质谱联用同时测定无机锡及有机锡化合物的方法。

背景技术

有机锡化合物(organotin compounds，OTCs)是一类含锡的有机金属化合物。因不同的有机锡化合物具有防腐、杀菌、防臭等多种功能，而被广泛应用于船舶防污涂料、农药杀虫剂、制革、塑料化工等行业。有机锡是国际公认的有毒污染物，低浓度的有机锡化合物就能产生巨大的毒性，在无氧或无紫外线的条件下，其半衰期可以达到数年。欧盟2009/425/EC对皮革制品中的有机锡总量限制为≤0.1％。纺织品生态标签Oeko-Tex Standard100对不同纺织品中的三丁基锡(TBT)、二丁基锡(DBT)、三苯基锡(TPhT)、二辛基锡(DOT)含量都做了严格的要求。欧盟生态标签Eco-lablel要求纺织品成品和半成品在运输和贮藏过程中都不得使用有机锡化合物；GB/T18885-2009对有机锡化合物在纺织物中的含量也做了严格要求。锡的无机化合物常用于纺织工业，如氯化亚锡在白棉布印染中作为还原剂，水合锡酸、偏锡酸钠、水合氯化锡及氯锡酸铵等用作印染的媒染剂。四价锡(Sn⁴⁺)和二价锡(Sn²⁺)会引起胃肠道急性中毒，因此需要对皮革制品、纺织品以及水体中的无机锡进行要有效的检测与控制。

分析有机锡化合物最常用的方法为气相色谱法和高效液相色谱法，无机锡主要采用原子吸收光谱法进行测定。目前尚无同时测定有机锡化合物和无机锡的方法的报道。例如，于振花等报道了采用高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用同时检测海产品中多种有机锡的方法(于振花，荆淼，王庚，等，高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用同时检测海产品中的多种有机锡[J]，分析化学，第36卷，第8期：1035～1039)，虽然该方法能同时测定三甲基氯化锡(TMT)、二丁基氯化锡(DBT)、三丁基氯化锡(TBT)、二苯基氯化锡(DPhT)和三苯基氯化锡(TPhT)这5种有机锡化合物，但仍然存在以下问题有待改进：(1)该方法无法同时实现对有机锡化合物和无机锡的同时分析，无法满足实际用于中同时测定这两类锡的需要；(2)高效液相色谱仪的价格高昂，且配套使用的色谱柱属于易耗品，价格也相对较高，因而分析成本极高；(3)高效液相色谱采用高压操作，在高压环境中，进样阀等部件的密封性容易出现问题，因而在使用过程中仪器的维护费用也相对较高；(4)该方法采用的高效液相流动相为乙腈-水-乙酸混合液，流动相中含有65％(v/v)的乙腈且有机溶剂的含量高达77％(v/v)，高有机负载容易导致电感耦合等离子体质谱的分析信号不稳定，并且高含量的高毒性乙腈容易对分析操作人员的身体健康造成危害。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供低压离子色谱-电感耦合等离子体质谱联用同时测定无机锡及有机锡化合物的方法，以实现对无机锡和有机锡化合物的同时测定并降低分析成本。

本发明提供的低压离子色谱-电感耦合等离子体质谱联用同时测定无机锡及有机锡化合物的方法，该方法使用包括低压泵、六通进样阀、进样环、低压阳离子分离柱和电感耦合等离子体质谱仪的分析仪器，步骤如下：

①将分析仪器设置为进样状态，在低压泵的驱动下，洗脱液经六通进样阀、低压阳离子分离柱后进入电感耦合等离子体质谱仪中进行分析，经电感耦合等离子体质谱仪的计算机系统处理后得到基线，在基线测绘的同时，试样经六通进样阀进入进样环中并将进样环充满；该步骤中，洗脱液为去离子水；

②将分析仪器转换为分析状态，使用低压泵驱动洗脱液进行梯度洗脱，洗脱液经六通进样阀进入进样环，进样环中的试样在洗脱液的推动下进入低压阳离子分离柱中，试样中的无机锡及有机锡化合物在低压阳离子分离柱中被分离后，在洗脱液的作用下分别进入电感耦合等离子体质谱仪中进行分析，经电感耦合等离子体质谱仪的计算机系统处理后，得到试样中的无机锡及有机锡化合物的谱图；

所述梯度洗脱的程序如下：

在0min至1.5min，以去离子水为洗脱液；在大于1.5min至3min，以pH值调节至6.9～7.0、KCl浓度为0.2wt％～0.3wt％的KCl水溶液为洗脱液；在大于3min至5.5min，以pH值调节至6.9～7.0、KCl浓度为1.9wt％～2.1wt％的KCl水溶液为洗脱液；在大于5.5min至14min，以pH值调节至1.9～2.0、KCl浓度为1.9wt％～2.1wt％的KCl水溶液为洗脱液；

③使用一系列无机锡及有机锡化合物浓度已知的标样代替试样，重复上述步骤①和②的操作，得到一系列标样中的无机锡及有机锡化合物的谱图，分别以各标样中的无机锡及有机锡化合物的浓度为横坐标、分别以标样中的无机锡及有机锡化合物的峰高为纵坐标分别绘制无机锡及有机锡化合物的工作曲线；

④将试样中的无机锡及有机锡化合物的谱图的峰高值带入步骤③所得工作曲线的回归方程中，计算出试样中的无机锡及有机锡化合物的浓度；

所述低压阳离子分离柱的柱填料为表面磺化的低压阳离子交换树脂，无机锡为Sn⁴⁺和Sn²⁺，有机锡化合物为一甲基氯化锡、二丁基氯化锡、二苯基氯化锡、三甲基氯化锡以及三丁基氯化锡中的至少一种，标样中含有Sn⁴⁺以及上述五种有机锡化合物。

由于无机锡及各有机锡化合物与低压阳离子分离柱的柱填料的亲和力的不同，在上述方法的步骤②采用的梯度洗脱条件下，低压阳离子分离柱能够把试样或标样中的一甲基氯化锡、二丁基氯化锡、二苯基氯化锡、三甲基氯化锡和三丁基氯化锡这五种有机锡化合物分开，同时能将无机锡与前述五种有机锡化合物分开，但不能将二价锡(Sn²⁺)与四价锡(Sn⁴⁺)这两种无机锡分开，因此，上述方法测定的无机锡是包括二价锡和四价锡的总无机锡的浓度，同时还能测定一甲基氯化锡、二丁基氯化锡、二苯基氯化锡、三甲基氯化锡和三丁基氯化锡这五种有机锡化合物各自的浓度。步骤②在进行梯度洗脱时，试样或标样中的无机锡及有机锡化合物在低压阳离子分离柱中被分离后，从低压阳离子分离柱中流出的先后顺序依次为：无机锡(IT)、三甲基氯化锡(TMT)、一甲基氯化锡(MeT)、二苯基氯化锡(DPhT)、二丁基氯化锡(DBT)和三丁基氯化锡(TBT)，被低压阳离子分离柱分离后，按照从低压阳离子分离柱中流出的顺序先后进入电感耦合等离子体质谱仪中进行分析，采用上述方法测定包括无机锡、MeT、DBT、DPhT、TMT和TBT的混合标样的谱图如图3所示。

上述方法中，所述低压阳离子分离柱的柱填料的粒径为30～35μm，该柱填料的制备方法：采用悬浮聚合法将苯乙烯二乙烯苯高温聚合形成粒径为30～35μm的苯乙烯二乙烯苯共聚珠体，然后通过高温快速磺化，得到表面磺化的低压阳离子交换树脂，具体制备方法可参见离子色谱分析及应用[M]，张新申编著，四川科学技术出版社，1987年出版，第22-25页。

上述方法中，电感耦合等离子体质谱仪为四级杆型电感耦合等离子体质谱仪。

上述方法中，电感耦合等离子体质谱仪进行分析时，等离子体气流量为0.6～0.8mL/min，雾化气流量为0.7～0.9mL/min，冷却气流量为12～14mL/min，等离子体气、雾化气和冷却气均为氩气，射频功率为1500～1600W。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

1.本发明提供了一种同时测定无机锡及有机锡化合物的新方法，该方法通过分析流路的合理配合和分析参数的合理控制，先利用低压离子色谱以梯度洗脱的方式将试样中的无机锡及有机锡化合物分离，然后利用电感耦合等离子体质谱对分离后的无机锡及有机锡化合物进行测定，实现了无机锡及有机锡化合物的同时测定，解决了现有高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用无法同时测定无机锡及有机锡化合物的不足，能够满足实际用于中同时测定这两类锡的需要。

2.相对于高效液相色谱，本发明所述方法采用的低压离子色谱仪及其配套使用的低压离子色谱柱的价格都相对较低，使用过程中仪器的维护费用也相对较低，将低压离子色谱与电感耦合等离子体质谱联用，有利于有效降低同时分析无机锡及有机锡化合物的成本，该方法以水相0wt％～2.1wt％的KCl水溶液为洗脱液，洗脱液为水相，不会造成电感耦合等离子体质谱的分析信号不稳定，有利于提高测试方法的稳定性，同时，水相的洗脱液不会对分析操作人员的身体健康造成危害，本发明所述方法更加绿色环保。

3.本发明所述方法在0～200μg/L浓度范围内测定无机锡、一甲基氯化锡、二丁基氯化锡、二苯基氯化锡、三甲基氯化锡和三丁基氯化锡这几种锡化合物线性良好，分析无机锡、一甲基氯化锡、二丁基氯化锡、二苯基氯化锡、三甲基氯化锡和三丁基氯化锡的检出限分别为0.04、0.1、0.3、0.5、0.01、0.2μg/L，具有分析灵敏度高和线性范围宽的特点，适用于对低含量的无机锡及有机锡化合物进行直接检测。

4.由于电感耦合等离子体质谱可对多种金属元素进行同时分析测定，因此在使用本发明所述方法在测定试样中的无机锡及五种有机锡化合物的同时，还能对其他金属元素进行测定，具有分析效率高的优势，尤其适用于需要对包括无机锡、有机锡化合物以及其他金属金属元素等多种检测对象进行测定的场合。

附图说明

图1是本发明所述方法处于进样状态的工艺流程图，也是配套的分析仪器的结构示意图；

图2是本发明所述方法处于分析状态的工艺流程图，也是配套的分析仪器的结构示意图；

图3是采用本发明所述方法测定包括无机锡、MeT、DBT、DPhT、TMT和TBT的混合标样的谱图；

图中，1—低压泵、2—六通进样阀、3—进样环、4—低压阳离子分离柱、5—电感耦合等离子体质谱仪，S₁—试样、S₀—标样、E—洗脱液、W—废液。

具体实施方式

下面通过实施例结合附图对本发明所述低压离子色谱-电感耦合等离子体质谱联用同时测定无机锡及有机锡化合物的方法作进一步说明。

实施例1

本实施例中，对标样进行测试，以考察本发明所述方法的线性范围和检出限，步骤如下：

1.标样的配制

配制标准贮备液：分别称取一甲基氯化锡(MeT)、二丁基氯化锡(DBT)、二苯基氯化锡(DPhT)、三甲基氯化锡(TMT)和三丁基氯化锡(TBT)，分别使用丙酮将MeT、DBT、DPhT、TMT和TBT溶解，转入容量瓶中用丙酮定容配制成MeT、DBT、DPhT、TMT和TBT浓度为10mg/L的标准贮备液。

由于Sn⁴⁺比Sn²⁺更稳定，因此在配制无机锡标样时采用四价无机锡盐，称取水溶性无机四价锡盐，用去离子水溶解后转入容量瓶中用去离子水定容配制成Sn⁴⁺浓度为10mg/L的标准贮备液。

在测试当天，用去离子水将标准贮备液配制1#～8#混合标样，1#混合标样为去离子水，2#混合标样中MeT、DBT、DPhT、TMT、TBT和Sn⁴⁺的浓度均为5μg/L，3#混合标样中MeT、DBT、DPhT、TMT、TBT和Sn⁴⁺的浓度均为10μg/L，4#混合标样中MeT、DBT、DPhT、TMT、TBT和Sn⁴⁺的浓度均为20μg/L，5#混合标样中MeT、DBT、DPhT、TMT、TBT和Sn⁴⁺的浓度均为50μg/L，6#混合标样中MeT、DBT、DPhT、TMT、TBT和Sn⁴⁺的浓度均为100μg/L，7#混合标样中MeT、DBT、DPhT、TMT、TBT和Sn⁴⁺的浓度均为150μg/L，8#混合标样中MeT、DBT、DPhT、TMT、TBT和Sn⁴⁺的浓度均为200μg/L。

2.洗脱液的配制

将KCl用去离子水配制成KCl浓度分别为0.2wt％和2wt％的KCl水溶液，然后用盐酸调节两种浓度的KCl水溶液的pH值至6.9～7.0范围、将2wt％的KCl水溶液的pH至调节至1.9～2.0范围。

3.绘制工作曲线

采用图1和图2所示工艺流程设计的分析仪进行测试，其中图1为进样状态，图2为分析状态。该分析仪器包括低压离子色谱色谱仪和电感耦合等离子体质谱仪5，低压离子色谱仪包括低压泵1、六通进样阀2、进样环3和低压阳离子分离柱4，其中，低压泵1为四通道恒流泵，泵流量为0.4～2.0mL/min，工作压力为2×10⁵～3×10⁵Pa，进样阀3为六通自动进样阀；低压阳离子分离柱4的内径为5mm、有效柱长为60mm，低压阳离子分离柱4的柱填料是粒径为30～35μm的表面磺化的低压阳离子交换树脂，该柱填料的交换容量为0.02mmol/g，该柱填料的制备方法：采用悬浮聚合法将苯乙烯二乙烯苯高温聚合形成粒径为30～35μm的苯乙烯二乙烯苯共聚珠体，然后通过高温快速磺化，得到表面磺化的低压阳离子交换树脂，具体制备方法可参见离子色谱分析及应用[M]，张新申编著，四川科学技术出版社，1987年出版，第22-25页。

电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)5为四级杆型ICP-MS，包括雾化器、射频工作线圈、矩管、截取锥和四级杆质谱等部件，该ICP-MS自带计算机处理系统，用于控制分析过程和处理分析数据。ICP-MS对标样进行分析时的工作参数为：射频(RF)功率：1500W、冷却气流量(Ar)13mL/min、等离子体气流量(Ar)0.7mL/min、雾化气流量(Ar)0.86mL/min。

低压离子色谱仪的低压阳离子分离柱4的出口通过硅胶管直接与ICP-MS的雾化器入口连接，ICP-MS不需要蠕动泵辅助进样，低压离子色谱仪控制带有时间控制器的六通进样阀2，试样或标样通过低压泵进入进样环3，当进样环中充满试样或标样时，六通进样阀自动将洗脱液输入进样环，将试样或标样推入低压阳离子分离柱，经低压阳离子分离柱分离后，样品通过ICP-MS的十字雾化器雾化，随后通过等离子体等离子化后进入四级杆质谱。在进样阀切换的同时打开ICP-MS的进样开关，ICP-MS开始自动采集数据，经ICP-MS分析后的样品以废液W的形式进入与质谱系统相连的废液溶液中。

①将分析仪器设置为进样状态，在低压泵1的驱动下，洗脱液E经六通进样阀2、低压阳离子分离柱4后进入电感耦合等离子体质谱仪5中进行分析，经电感耦合等离子体质谱仪的计算机系统处理后得到基线，在基线测绘的同时，1#混合标样S₀经六通进样阀2进入进样环3中并将进样环充满，充满进样环后，多余的1#混合标样作为废液W排入废液容器中；该步骤中，洗脱液为去离子水。

②将分析仪器转换为分析状态，使用低压泵1驱动洗脱液进行梯度洗脱，洗脱液E经六通进样阀2进入进样环3，进样环中的1#混合标样S₀在洗脱液E的推动下进入低压阳离子分离柱4中，1#混合标样S₀中的Sn⁴⁺及五种有机锡化合物在低压阳离子分离柱4中被分离后，从低压阳离子分离柱中流出的先后顺序依次为：Sn⁴⁺、TMT、MeT、DPhT、DBT和TBT，这六种锡化合物在洗脱液的作用下分别进入电感耦合等离子体质谱仪中进行分析，经电感耦合等离子体质谱仪的计算机系统处理后，得到1#混合标样中的Sn⁴⁺、TMT、MeT、DPhT、DBT和TBT的谱图；与此同时，在低压泵1的驱动下，1#混合标样S₀经进样阀后以废液W的形式排入废液容器中；

该步骤中，梯度洗脱的程序如下：

在0min至1.5min，以去离子水为洗脱液；在大于1.5min至3min，以pH值调节至6.9～7.0、KCl浓度为0.2wt的KCl水溶液为洗脱液；在大于3min至5.5min，以pH值调节至6.9～7.0、KCl浓度为2.0wt％的KCl水溶液为洗脱液；在大于5.5min至14min，以pH值调节至1.9～2.0、KCl浓度为2.0wt％的KCl水溶液为洗脱液。

③依次使用2#～8#混合标样S₀代替1#混合标样，重复上述步骤①和②的操作，得到一系列标样中的Sn⁴⁺、TMT、MeT、DPhT、DBT和TBT的谱图。

分别以各标样中的Sn⁴⁺、TMT、MeT、DPhT、DBT和TBT的浓度为横坐标、分别以标样中的Sn⁴⁺、TMT、MeT、DPhT、DBT和TBT的峰高为纵坐标分别绘制Sn⁴⁺、TMT、MeT、DPhT、DBT和TBT的工作曲线，Sn⁴⁺、TMT、MeT、DPhT、DBT和TBT的工作曲线的回归方程和回归方程的相关系数R分别如表1所示，各回归方程中，H为峰高(cps)，C为Sn⁴⁺、TMT、MeT、DPhT、DBT或TBT的浓度(μg/L)。

表1 Sn⁴⁺和各有机锡化合物回归方程及回归方程的相关系数

由表1可知，在0～200μg/L范围内，Sn⁴⁺、MeT、DBT、DPhT、TMT和TBT的回归方程的线性良好，相关系数R均大于0.995。由于在步骤②的洗脱条件下，低压阳离子分离柱不能将四价锡和二价锡分开，而本实施例采用的标样中的无机锡仅为Sn⁴⁺，因此本实施例中绘制的Sn⁴⁺的工作曲线的回归方程实际上也是总无机锡的回归方程，在后续的实际样品测试中，直接采用本实施例确定的Sn⁴⁺的回归方程计算试样中总无机锡的浓度。

4.检出限

将步骤3中①和②中的1#混合标样S₀替换为2#混合标样S₀，按照步骤3中①和②的操作重复测定2#混合标样7次，计算检出限，结果表明本发明所述方法分析Sn⁴⁺、MeT、DBT、DPhT、TMT和TBT的检出限分别为0.04、0.1、0.3、0.5、0.01、0.2μg/L。

实施例2

本实施例中，采用本发明所述方法测定实际皮革样品中的总无机锡、MeT、DBT、DPhT、TMT和TBT。

1.样品准备

取皮革样品4块，各样品均按照以下操作进行处理：

将皮革样品剪切为1cm×1cm的小块并混匀，准确称取0.500g剪切后的样品置于聚焦微波合成系统的样品管中，加入10.0mL酸性人工汗液(该人工汗液的配制方法：将L-组氨酸盐酸盐0.5g，氯化钠5g，水合磷酸二氢钠2.2g，用去离子水配成1L溶液并用盐酸溶液调节pH值至5.5)在75℃萃取6min，萃取后取上清液用于后续分析。4块样品经前述萃取操作后得到的上清液分别编号为1#试样、2#试样、3#试样和4#试样。

2.洗脱液的配制

将KCl用去离子水配制成KCl浓度分别为0.2wt％和2wt％的KCl水溶液，然后用盐酸调节两种浓度的KCl水溶液的pH值至6.9～7.0范围、将2wt％的KCl水溶液的pH至调节至1.9～2.0范围。

3.试样谱图绘制

采用图1和图2所示工艺流程设计的分析仪进行测试，其中图1为进样状态，图2为分析状态。该分析仪器包括低压离子色谱色谱仪和电感耦合等离子体质谱仪5，低压离子色谱仪包括低压泵1、六通进样阀2、进样环3和低压阳离子分离柱4，其中，低压泵1为四通道恒流泵，泵流量为0.4～2.0mL/min，工作压力为2×10⁵～3×10⁵Pa，进样阀3为六通自动进样阀；低压阳离子分离柱4的内径为5mm、有效柱长为60mm，低压阳离子分离柱4的柱填料是粒径为30～35μm的表面磺化的低压阳离子交换树脂，该柱填料的交换容量为0.02mmol/g，该柱填料的制备方法：采用悬浮聚合法将苯乙烯二乙烯苯高温聚合形成粒径为30～35μm的苯乙烯二乙烯苯共聚珠体，然后通过高温快速磺化，得到表面磺化的低压阳离子交换树脂，具体制备方法可参见离子色谱分析及应用[M]，张新申编著，四川科学技术出版社，1987年出版，第22-25页。

电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)5为四级杆型ICP-MS，包括雾化器、射频工作线圈、矩管、截取锥和四级杆质谱等部件，该ICP-MS自带计算机处理系统，用于控制分析过程和处理分析数据。ICP-MS对标样进行分析时的工作参数为：射频(RF)功率：1500W、冷却气流量(Ar)13mL/min、等离子体气流量(Ar)0.7mL/min、雾化气流量(Ar)0.86mL/min。

低压离子色谱仪的低压阳离子分离柱4的出口通过硅胶管直接与ICP-MS的雾化器入口连接，ICP-MS不需要蠕动泵辅助进样，低压离子色谱仪控制带有时间控制器的六通进样阀2，试样或标样通过低压泵进入进样环3，当进样环中充满试样或标样时，六通进样阀自动将洗脱液输入进样环，将试样或标样推入低压阳离子分离柱，经低压阳离子分离柱分离后，样品通过ICP-MS的十字雾化器雾化，随后通过等离子体等离子化后进入四级杆质谱。在进样阀切换的同时打开ICP-MS的进样开关，ICP-MS开始自动采集数据，经ICP-MS分析后的样品以废液W的形式进入与质谱系统相连的废液溶液中。

①将分析仪器设置为进样状态，在低压泵1的驱动下，洗脱液E经六通进样阀2、低压阳离子分离柱4后进入电感耦合等离子体质谱仪5中进行分析，经电感耦合等离子体质谱仪的计算机系统处理后得到基线，在基线测绘的同时，1#试样S₁经六通进样阀2进入进样环3中并将进样环充满，充满进样环后，多余的1#试样作为废液W排入废液容器中；该步骤中，洗脱液为去离子水。

②将分析仪器转换为分析状态，使用低压泵1驱动洗脱液进行梯度洗脱，洗脱液E经六通进样阀2进入进样环3，进样环中的1#试样在洗脱液E的推动下进入低压阳离子分离柱4中，1#试样中的总无机锡、MeT、DBT、DPhT、TMT和TBT在低压阳离子分离柱4中被分离后，在洗脱液的作用下分别进入电感耦合等离子体质谱仪中进行分析，经电感耦合等离子体质谱仪的计算机系统处理后，得到1#试样中的总无机锡、MeT、DBT、DPhT、TMT和TBT的谱图；与此同时，在低压泵1的驱动下，1#试样经进样阀后以废液W的形式排入废液容器中；

该步骤中，梯度洗脱的程序如下：

在0min至1.5min，以去离子水为洗脱液；在大于1.5min至3min，以pH值调节至6.9～7.0、KCl浓度为0.2wt的KCl水溶液为洗脱液；在大于3min至5.5min，以pH值调节至6.9～7.0、KCl浓度为2.0wt％的KCl水溶液为洗脱液；在大于5.5min至14min，以pH值调节至1.9～2.0、KCl浓度为2.0wt％的KCl水溶液为洗脱液。

③依次使用2#～4#试样S₁代替1#试样，重复上述步骤①和②的操作，得到各试样中总无机锡、MeT、DBT、DPhT、TMT和TBT的谱图。

④将1#、2#、3#和4#试样中的总无机锡、MeT、DBT、DPhT、TMT和TBT的谱图的峰高值带入实施例1所得Sn⁴⁺(也就是总无机锡)及有机锡化合物的工作曲线的回归方程中，计算出试样中的总无机锡、MeT、DBT、DPhT、TMT和TBT的浓度，结果如表2所示。

表2 1#～4#试样分析结果