一种快速确定拟引进树种抗寒性的实验方法

摘要

本发明属于树木引种、繁育技术领域，具体涉及一种快速、简单、经济确定拟引进树种能否适应和抵抗栽培地点的寒冷气候的实验方法，该实验方法按下列步骤进行：a.确定实验室；b.引种地最近10年间平均最低温度值和极端低温值的确定；c.栽培地最近10年间平均最低温度值和极端低温值的确定；d.种条采集；e.种条运输；f.降温储藏；g.升温储藏；h.水培；i.观测与记录；j.引种树木受损情况确定；k.引种的判定。本方法有效的提高了引种的效率、可靠性、减少引种的盲目性。

说明书

技术领域

本发明属于树木引种、繁育技术领域，具体涉及一种快速、简单、经济确定拟引进树种能否适应和抵抗栽培地点的寒冷气候的实验方法。

背景技术

全面实施以生态建设为主的林业发展战略，是国家的发展战略，近期内我国每年将完成新造林600万公顷，通过植树造林实施国土生态安全屏障战略、国家木材和粮油安全战略、固碳减排战略、增绿惠民战略和繁荣生态文化战略等五大战略。树木引种是完成这一战略目标的重要举措之一，因为引种的目的是为了丰富当地树种资源，提高林业生产、园林绿化的水平，实现林木速生、优质、丰产，园林绿化的美化和靓化，增加经济效益和改善绿化质量、景观效果，同时扩大树种资源、增加生物多样性，有利于物种平衡和防害减灾。因此，树木引种是各省各地林业和园林部门每年必须做的工作，根据自己的需要引种国内、外包括新品种、新品系、栽培种、野生种等，树木引种就是将其中之一或一批引种到该树种自然分布范围以外的新地区种植，或将野生树种经驯化进行人工栽培。

我国树种的引种有悠久的历史，如热带、亚热带地区的三叶橡胶、咖啡等，温带地区有悬铃木、落叶松等，这些外来树种在我国人工林区已占有几百万公顷的面积，对丰富我国林木遗传资源，增加木材及其他林产品产量及防风固沙、城市绿化等方面，发挥了重要的作用；另一方面我国的一些珍贵优良树种，也被世界各地竞相引种，对促进世界各国间的文化交流及遗传资源的保存利用，也起了很大作用。引种成功与否的核心问题，是植物与环境的关系问题。当被引入新的环境栽培时，植物与环境间的矛盾能够达成新的统一，则引种成功；否则，引种失败。引种能否成功主要由树木的生物学因素、系统发育历史因素和环境中的气候因素三大要素确定，但是决定树木成活的最核心因素是温度，极端低温是树木北引的限制因子，极端高温是树木南引的限制因子，是人为不可控的因素。对于低纬度向高纬度引种，极端低温是树木北引的限制因子，通常引种是在分析以上3个因素后，从原产地引入10-30株苗木，在新的环境栽培，通过1年以上的观察，确定树木能否成活，能否正常越冬，其过程是购买苗木、运输、种植、管理、越冬，观察能否成活，至少1年以上，这种方法时间长、经济支出费用高，人力花费很大，涉及的方方面面问题很多，任何一个环节出现问题都会人为的导致引种失败。鉴于此，针对对低纬度向高纬度引种，本发明研发了一种快速、简单、经济的室内试验方法，确定拟引进树种能否适应和抵抗新栽培地点的寒冷气候，改变了常规引种工作时间长、经济支出费用高，人力花费很大，涉及方方面面问题很多的这些问题，减少了购买苗木、运输、种植、管理、越冬等环节，有效的提高了引种的效率、可靠性、减少引种的盲目性，是一种快速、简单、经济确定拟引进树种能否适应和抵抗新栽培地点的寒冷气候的实验方法。

发明内容

本发明的目的在于：提供了一种快速确定拟引进树种抗寒性的实验方法，该方法改变了常规引进树种抗寒性的实验方法，即从引种地引入苗木，在栽培地新的环境栽培，通过1年以上的观察，确定树木能否成活，能否正常越冬的方法。本发明的方法是在分析生物学因素、系统发育历史因素和环境中的气候因素三大要素后，是利用变温冰柜在引种地，通过室内实验方法确定拟引进树种能否适应和抵抗新栽培地点的寒冷气候，利用树木细胞的致死温度、细胞的受损温度和忍耐温度在室内快速确定引种树种在新栽培地可否正常越冬，可否抵御栽培地点的极端低温，采用变温冰柜逐级降温的方法，逐步降低到栽培地点的旬平均最低温度和极端低温，之后利用水培的方法观测引种树木细胞受损情况，确定引种树木细胞是否致死、是否受损和是否可忍耐栽培地点的旬平均最低温度和极端低温，从而确定引种树木从低纬度向高纬度引种，能否适应和忍耐极端低温这个树木北引的限制因子，这种方法改变了常规引种工作时间长、经济支出费用高，人力花费很大，涉及方方面面问题很多的这些问题，减少了购买苗木、运输、种植、管理、越冬等环节，有效的提高了引种的效率、可靠性、减少引种的盲目性，是一种快速、简单、经济确定拟引进树种能否适应和抵抗栽培地点的寒冷气候的实验方法，通过本方法树木引种的成功率可达95%以上，在适应极端低温这个限制因子方面，引种的成功率可达100%。

本发明的技术方案：一种快速确定拟引进树种抗寒性的实验方法，该实验方法按下列步骤进行：

a确定实验室：实验室温度17-27℃，采光正常；具备两台变温冰柜，冰柜的最低温度要求至少能达到栽培地的极端气温值；

b引种地最近10年旬平均最低温度值和极端低温值的确定；

c栽培地最近10年旬平均最低温度值和极端低温值的确定；

d种条采集：入冬后，在引种树木进入休眠期后，采集一年生种条，要求成熟，木质化程度高、无病虫害、芽眼饱满、无机械损伤，种条小头直径大于0.4cm，大头直径小于2cm，长度保持1-1.2m， 20根；

e种条运输：冷藏运输至实验室，期间要保证种条活力和不失水分；

f降温储藏：种条分成两组，分别为A1组和A2组，每组10根密封，密封前每组加一根湿润保湿条，防止冻干；开始降温储藏，起始温度是-1至-3℃，之后每天降低2度，直到引种地最近10年旬平均最低温度值，之后每天降低1度至引种地最近10年的极端低温值；之后每1-2天降低1度至栽培地最近10年旬平均最低温度值，之后每2-3天降低1度至栽培地最近10年的极端低温值；

g升温储藏：在A1降温至栽培地最近10年旬平均最低温度时，2天后取出放入另一个冰柜进行升温，每1-2天升高1度直到引种地最近10年旬平均最低温度值，之后每天升高1度直到-1至-3℃，之后进行裁剪水培；在A2降温至栽培地最近10年的极端低温值时，2天后在原冰柜中升温，每1-2天升高1度直到引种地最近10年旬平均最低温度值，之后每天升高1度直到-1至-3℃，之后进行裁剪水培；

h水培： A1和A2组种条分别裁剪成25-30cm的种穗，每个种穗要求有3-4个芽眼，每个种条裁剪成4个种穗，将种穗1/2浸入水培烧杯中的蒸馏水内，1/2的种穗在蒸馏水之上，每个水培烧杯中可放入5-10个种穗进行水培；

i观测与记录：对A1和A2组水培两天后，开始分别观测和记录芽能否正常膨大和开放的指标；第一种情况：芽能够正常膨大和开放，表明芽眼活力正常未受冻害；第二种情况：芽不能正常膨大和开放，但有膨大和开放现象，或部分芽能够膨大和开放，表明芽受到一定程度的冻害；第三种情况：芽不能正常膨大和开放，并且芽褐变萎缩死亡，表明芽严重冻害死亡，观测和记录不超过20天；

j引种树木受损情况确定：出现第一种情况表明：引种树木细胞未受损；出现第二种情况表明：引种树木细胞部分受损；出现第三种情况表明：引种树木细胞受损、死亡；

k引种的判定：若A1组出现第一种情况，需要同时考虑A2组出现的情况种类，若A2组出现第一种情况，则可以引种，若A2组出现第二种情况，也可以引种，但引种树种在栽培地极端低温值的环境条件下会出现冻稍现象或在引种树木幼林期出现冻稍现象，需要人为的干预来提高引种树木的抗寒性，以保证越冬，若A2组出现第三种情况，则引种树木虽然可以抵御栽培地最近10年旬的平均最低温度，但栽培地的极端低温是引种树木的致死温度，因此引种的风险很大，可以考虑在栽培地具有特别好的特殊的生态小环境下，少量的引种试验；若A1组出现第二种情况，则引种的风险很大，可以考虑在栽培地具有特别好的，特殊的生态小环境下，少量的引种试验；若A1组出现第三种情况，则建议不引种。

本发明与现有技术相比，具有以下优点和卓著的效果：

（1）常规引进树种抗寒性的实验方法，通常是从引种地引入苗木，在栽培地新的环境栽培，通过1年至10年的观察，确定树木能否成活，能否正常越冬的方法，常规方法时间长，需要1年至10年，引种1-3年通常可以确定引种树种是否能够忍受新栽培环境的旬平均最低温度，经过5-10年的栽培才可以确定引种树种是否能够忍受新栽培环境的极端最低温度，同时经济支出费用高，人力花费很大，涉及方方面面很多问题，存在购买苗木、运输、种植、管理、越冬等等环节。本发明的方法是在分析生物学因素、系统发育历史因素和环境中的气候因素三大要素后，是利用变温冰柜在原产地或在引种地，通过室内实验方法确定拟引进树种能否适应和抵抗新栽培地点的寒冷气候，利用树木细胞的致死温度、细胞的受损温度和忍耐温度在室内快速确定引种树种在新栽培地点可否正常越冬，可否抵御新栽培地点的极端低温，采用变温冰柜逐级降温的方法，逐步降低到新栽培地点的旬平均最低温度和极端低温，之后利用水培的方法观测引种树木细胞受损情况，确定引种树木细胞是否致死、是否受损和是否可忍耐新栽培地点的旬平均最低温度和极端低温，从而确定引种树木从低纬度向高纬度引种，能否适应和忍耐极端低温这个树木北引的限制因子，这种方法改变了常规引种工作时间长、经济支出费用高，人力花费很大，涉及方方面面问题很多的这些问题，减少了购买苗木、运输、种植、管理、越冬等环节，有效的提高了引种的效率、可靠性、减少引种的盲目性，是一种快速、简单、经济确定拟引进树种能否适应和抵抗新栽培地点的寒冷气候的实验方法，通过本方法树木引种的成功率可达95%以上，在适应极端低温这个限制因子方面，引种的成功率可达100%。

（2）本发明与常规引进树种抗寒性的实验方法完全不同，是利用低温处理和水培的方法进行快速判断树木从低纬度向高纬度引种是否可以适应和忍耐新环境条件的极端低温、通过3个月左右的时间即可科学判断引种树种能否适应低温这个树木北引的限制因子，是一种高效、简单、快速判断引种能否成功的方法，是一种独特的实验方法和技术。该方法时间短，不影响来年的正常引种。

具体实施方式

实施例1、本发明所述一种快速确定拟引进树种抗寒性的实验方法实施应用案例，2005年在欧洲考察期间，发现城市绿化树种欧洲椴树是欧洲的4大绿化树种之一， 是非常优秀的绿化树种，但是欧洲温度高，新疆温度低、寒冷，引种风险很大，按常规方法引种存在诸多问题，在此情况下，利用本发明进行快速判断引种能否成功，2005年通过德国留学生在柏林洪堡大学生物实验室进行试验。引种树种：欧洲椴树，引种地点：德国柏林，引种新栽培地点：新疆乌鲁木齐市。具体步骤如下：

a确定实验室：引种人员在调查的基础上，确定在引种地柏林洪堡大学生物实验室进行实验，实验室人员和条件满足拟引进树种抗寒性实验，具有2台变温式冰柜，冰柜的最低温度能够达到新栽培地点的极端气温以下，实验室具有组培室条件，采光正常，温度20-25℃；

b调查引种地的10年旬平均最低温度值和极端低温值：通过引种地柏林气象局资料调查和查询，柏林欧洲椴树产地10年旬最低平均温度-16℃，极端低温-21℃；

c调查栽培地点的10年旬平均最低温度值和极端低温值：栽培地为乌鲁木齐市，通过乌鲁木齐市气象局资料调查和查询，栽培地乌鲁木齐市的10年旬平均最低温度-25℃，极端低温-32℃；

d种条采集：2005年11月5号树木已进入休眠期，采集欧洲椴树的一年生种条，种条成熟木质化程度高、无病虫害、芽眼饱满、无机械损伤，种条小头直径大于0.6cm，大头直径1.2cm，长度保持1m，数量20根；

e种条运输：种条采集好后，立即运至柏林洪堡大学生物实验室，保证种条活力和不失水；

f变温冰柜降温储藏：种条运到实验室后，将种条用自来水冲洗干净，分成A1和A2两组，每组10根用塑料布密封，密封前每捆中加一根充分湿润的、和种条等长度的医用保湿纱布条，种条打捆密封好后，放入冰柜降温储藏，起始温度11月6号是-2℃，之后每1天降低2度，经过7天（11月13号）至引种地的10年旬平均最低温度-16℃，之后每1天降低1度，经过5天（11月18号）至引种地的10年极端低温-21℃；之后每2天降低1度，经过8天（11月26号）至栽培地的10年旬平均最低温度-25度，之后每3天降低1度，经过21天（12月17号）至栽培地的10年极端低温-32℃；

g变温冰柜升温储藏：在A1组种条降温到栽培地乌鲁木齐市的10年旬平均最低温度-25度时，2天后（11月28号），取出放入另一个冰柜进行升温储藏，每2天升高1度，18天后（12月16号），升温至引种地的10年旬平均最低温度-16℃，之后每天升高1度，14天后（12月30号），升温至-2℃，1天后（12月31号）拿出种条进行裁剪水培；A2组种条在降温储藏到栽培地（乌鲁木齐市）的10年极端低温-32℃时，2天后（12月19号）在原冰柜中升温储藏，每2天升高1度，32天后（2006年1月20号），升温至引种地的10年旬平均最低温度-16℃，之后每天升高1度，14天后（2006年2月3号），升温至-2℃，1天后（2月4号）拿出种条进行裁剪水培；

h水培：在正常室温20-25℃、采光正常的组培室环境条件下水培，水培采用烧杯，烧杯放入蒸馏水，种条裁剪成长25cm的种穗，每个种穗平均有4个芽眼，每个枝条裁剪成4个种穗，将种穗1/2浸入蒸馏水，1/2的种穗在蒸馏水之上，每个烧杯5个种穗进行水培；将两种种穗，A1和A2分别进行水培和观测，A1和A2分别为8个烧杯，40个种穗；

i观测：对A1和A2两种水培的种穗两天后开始分别观测和记录芽能否正常膨大和开放这个指标：经过18天的观测和记录：A1出现第一种情况，芽能够正常膨大和开放，表明芽眼活力正常未受冻害；A2也出现第一种情况，芽能够正常膨大和开放，表明芽眼活力正常未受冻害；

j引种树木细胞的受损情况确定：第一种情况是引种树木细胞未受损；

k可否引种的确定：根据A1和A2两种水培的结果，确定可以引种，引种树种可以在新栽培、种植环境条件下正常越冬；

通过本发明确定可以引种成功，2006年3月通过外交渠道和检疫部门将欧洲椴树引入到新疆乌鲁木齐市，2000株栽培在乌鲁木齐市不同地点，经过10年栽培、观测、测定，表明该树种能够在乌鲁木齐市正常越冬和生长，目前已开花结果。

实施例2、2005年在欧洲考察期间，欧洲桤木是欧洲的重要速生丰产用材林树种，但是欧洲温度高，新疆温度低、寒冷，引种风险很大，按常规方法引种存在诸多问题，在此情况下，利用本发明进行快速判断引种能否成功，2005年通过德国留学生在洪堡大学生物实验室进行试验。引种树种：欧洲桤木，引种地点：德国柏林，栽培地点：新疆乌鲁木齐市。（注：欧洲桤木的实验和实施例1欧洲椴树实验同步进行）具体步骤如下：

a确定实验室：引种人员在调查的基础上，确定在引种地柏林洪堡大学生物实验室进行实验，实验室人员和条件满足拟引进树种抗寒性实验，具有2台变温式冰柜，冰柜的最低温度能够达到新栽培地点的极端气温以下，实验室具有组培室条件，采光正常，温度20-25℃；

b调查引种地的10年旬平均最低温度和极端低温：通过引种地柏林气象局资料调查和查询，柏林欧洲桤木产地的10年旬最低平均温度-16℃，极端低温-21℃；

c调查栽培地点的10年旬平均最低温度和极端低温：通过栽培地点乌鲁木齐市气象局资料调查和查询，栽培地点乌鲁木齐市的10年旬平均最低温度-25℃，极端低温-32℃；

d引种树种的种条采集：2005年11月5号树木已进入休眠期，采集欧洲桤木的一年生种条，种条成熟木质化程度高、无病虫害、芽眼饱满、无机械损伤，种条小头直径大于0.6cm，大头直径1.2cm，长度保持1m，数量20根；

e种条运输：种条采集好后，立即运至柏林洪堡大学生物实验室，保证种条活力和不失水；

f变温冰柜降温储藏：种条运到实验室后，分成A1和A2两组种条，将种条用自来水冲洗干净，每组10根用塑料布密封，密封前每捆中加一根充分湿润的、和种条等长度的医用保湿纱布条，种条打捆密封好后，放入冰柜降温储藏，起始温度11月6号是-2℃，之后每1天降低2度，经过7天（11月13号）至引种地的10年旬平均最低温度-16℃，之后每1天降低1度，经过5天（11月18号）至引种地的10年极端低温-21℃；之后每2天降低1度，经过8天（11月26号）至栽培地（乌鲁木齐市）的10年旬平均最低温度-25度，之后每3天降低1度，经过21天（12月17号）至栽培地的10年极端低温-32℃；

g变温冰柜升温储藏：在A1组种条降温到栽培地（乌鲁木齐市）的10年旬平均最低温度-25度时，2天后（11月28号），取出放入另一个冰柜进行升温储藏，每2天升高1度，18天后（12月16号），升温至引种地的10年旬平均最低温度-16℃，之后每天升高1度，14天后（12月30号），升温至-2℃，1天后（12月31号）拿出种条进行裁剪水培；A2组种条在降温到栽培地（乌鲁木齐市）的10年极端低温-32℃时，2天后（12月19号）在原冰柜中升温储藏，每2天升高1度，32天后（2006年1月20号），升温至引种地的10年旬平均最低温度-16℃，之后每天升高1度，14天后（2006年2月3号），升温至-2℃，1天后（2月4号）拿出种条进行裁剪水培；

h水培：在正常室温（20-25℃）、采光正常的组培室环境条件下水培，水培采用烧杯，烧杯放入蒸馏水，种条裁剪成长25cm的种穗，每个种穗平均有4个芽眼，每个枝条裁剪成4个种穗，将种穗1/2浸入蒸馏水，1/2的种穗在蒸馏水之上，每个烧杯5个种穗进行水培。将两种种穗，A1和A2分别进行水培和观测。A1和A2分别为8个烧杯，40个种穗；

i观测：对A1和A2两种水培的种穗两天后开始分别观测和记录芽能否正常膨大和开放这个指标：经过15天的观测和记录：A1出现第一种情况，芽能够正常膨大和开放，表明芽眼活力正常未受冻害；A2也出现第一种情况，芽能够正常膨大和开放，表明芽眼活力正常未受冻害；

j引种树木细胞的受损情况确定：第一种情况是引种树木细胞未受损；

k可否引种的确定：根据A1和A2两种水培的结果，确定可以引种，引种树种可以在新栽培、种植环境条件下正常越冬。

通过本发明确定可以引种成功，2006年3月通过外交渠道和检疫部门将欧洲桤木引入到新疆乌鲁木齐市，1000株栽培在乌鲁木齐市不同地点，经过10年栽培、观测、测定，表明该树种能够在乌鲁木齐市正常越冬和生长，目前已开花结果，但是新疆的干热对该树种有一定影响，夏季叶片的叶缘有焦枯现象。

实施例3、银杏是非常优秀的绿化、药用和用材树种，属于孑遗植物，从理论上分析，其含有抗寒基因，但是新疆属于高寒地区，引种风险很大，在此情况下，利用本发明进行快速判断引种能否成功，2006年在新疆林科院生物实验室进行试验。引种树种：银杏，引种地点：北京，引种栽培地：新疆乌鲁木齐市新疆林业科学院树木园。

具体步骤按照上述实验方法中介绍的步骤从a到k，根据对A1种条降温到栽培地点10年旬平均最低温度的，和A2种条降温到栽培地点10年极端低温的，两种水培的种穗两天后开始分别观测和记录芽能否正常膨大和开放这个指标：引种树种银杏都发生的是第一种情况，即芽能够正常膨大和开放，表明芽眼活力正常未受冻害； 从银杏两种水培的结果，确定可以引种，引种树种可以在新栽培、种植环境条件下正常越冬；

通过本发明确定可以引种成功，2007年3月15日从北京将银杏引入200株到新疆乌鲁木齐市新疆林业科学院树木园，引入后在冷库（0-3℃）沙埋假植，4月15日200株栽培在乌鲁木齐市新疆林业科学院树木园，经过10年栽培、观测、测定，表明该树种能够在乌鲁木齐市正常越冬和生长，目前已开花结果。

实施例4、美国黑胡桃是非常优秀的绿化和用材树种，不属于孑遗植物，从理论上分析，引种地和新疆高寒气候差异较大，栽培地乌鲁木齐市可能不能生存，引种风险很大，在此情况下，利用本发明进行快速判断引种能否成功，2006年在新疆林业科学院生物实验室进行试验。引种树种：美国黑胡桃，引种地点：北京，栽培地点：新疆乌鲁木齐市，属于二次引种树种。具体步骤如下：

a确定实验室：引种人员在调查的基础上，确定从引种树木的成功引种地北京市进行二次引种美国黑胡桃，实验确定在新疆林业科学院生物实验室进行试验，实验室人员和条件满足拟引进树种抗寒性实验，具有2台变温式冰柜，冰柜的最低温度能够达到新栽培地点的极端气温以下，实验室具有组培室条件，采光正常，温度20-25℃；

b调查引种地的10年旬平均最低温度和极端低温：通过北京气象局资料调查和查询，北京的10年旬最低平均温度-8℃，极端低温-14℃；

c调查栽培地点的10年旬平均最低温度和极端低温：通过乌鲁木齐市气象局资料调查和查询，栽培地的10年旬平均最低温度-25℃，极端低温-32℃；

d引种树种的种条采集：2006年11月1号树木已进入休眠期，采集美国黑胡桃的一年生种条，种条成熟木质化程度高、无病虫害、芽眼饱满、无机械损伤，种条小头直径大于0.6cm，大头直径1.5cm，长度保持1m，数量20根；

e种条运输：种条采集好后，将种条用塑料布密封，冷藏快运至新疆林业科学院的实验室，保证种条活力和不失水；

f变温冰柜降温储藏：11月3号种条运到实验室后，将种条用自来水冲洗干净，分成A1和A2两组，每组10根用塑料布密封，密封前每捆中加一根充分湿润的、和种条等长度的医用保湿纱布条，种条打捆密封好后，放入冰柜降温储藏，起始温度11月3号是-2℃，之后每1天降低2度，经过3天（11月6号）至引种地的10年旬平均最低温度-8℃，之后每1天降低1度，经过6天（11月12号）至引种地的10年极端低温-14℃；之后每2天降低1度，经过22天（12月4号）至栽培地乌鲁木齐市的10年旬平均最低温度-25度，之后每2天降低1度，经过14天（12月18号）至栽培地的10年极端低温-32℃；

g变温冰柜升温储藏：在A1组种条降温到栽培地的10年旬平均最低温度-25度时，2天后（12月6号），取出放入另一个冰柜进行升温储藏，每2天升高1度，34天后（2007年1月10号），升温至引种地的10年旬平均最低温度-8℃，之后每天升高1度，6天后（2007年1月16号），升温至-2℃，1天后（2007年1月17号）拿出种条进行裁剪水培；A2种条在降温到栽培地的10年极端低温-32℃时，2天后（12月20号）在原冰柜中升温储藏，每2天升高1度，48天后（2007年2月6号），升温至引种地的10年旬平均最低温度-8℃，之后每天升高1度，6天后（2006年2月12号），升温至-2℃，1天后（2月13号）拿出种条进行裁剪水培；

h水培：在正常室温（20-25℃）、采光正常的组培室环境条件下水培，水培采用烧杯，烧杯放入蒸馏水，种条裁剪成长25cm的种穗，每个种穗平均有4个芽眼，每个枝条裁剪成4个种穗，将种穗1/2浸入蒸馏水，1/2的种穗在蒸馏水之上，每个烧杯5个种穗进行水培。将两种种穗，A1和A2分别进行水培和观测。A1和A2分别为8个烧杯，40个种穗；

i观测：对A1和A2两种水培的种穗两天后开始分别观测和记录芽能否正常膨大和开放这个指标：经过20天的观测和记录：A1出现第一种情况，芽能够正常膨大和开放，表明芽眼活力正常未受冻害；A2出现第二种情况是芽不能正常膨大和开放，但有膨大和开放现象，或部分芽能够膨大和开放，表明芽受到一定程度的冻害；

j引种树木细胞的受损情况确定：第一种情况是引种树木细胞未受损，第二种情况是引种树木细胞部分受损；

k可否引种的确定：：根据A1和A2两种水培的结果，确定可以引种，但存在一定风险，引种树种在栽培地极端低温环境条件下会出现冻稍现象或在引种树种幼林期出现冻稍现象，需要人为的干预来提高引种树木的抗寒性，以保证越冬，即引种树种在栽培地环境条件下引种存在一定风险，可能存在冻稍等现象。

通过本发明确定美国黑胡桃可以引种，但存在一定风险，2007年3月15日从北京将黑胡桃引入200株到新疆乌鲁木齐市新疆林业科学院树木园，引入后在冷库（0-3℃）沙埋假植，4月15日200株栽培在乌鲁木齐市新疆林业科学院树木园，经过10年栽培、观测、测定，表明该树种在3年以内的幼林期，美国黑胡桃存在冻稍现象，秋季提前停止灌溉，抑制树木生长，促进树木提前封顶，提高树木木质化程度，才可使得树木在乌鲁木齐市正常越冬和生长，幼林期树木通过适当包裹也能够保证树木在乌鲁木齐市正常越冬和生长，目前黑胡桃在乌鲁木齐市已开花结果。

实施例5、美国大樱桃是非常优秀的果树品种，不属于孑遗植物，从理论上分析，引种地和新疆高寒气候差异较大，引种新疆乌鲁木齐市可能不能生存，引种风险很大，在此情况下，利用本发明进行快速判断引种能否成功，2006年在引种美国黑胡桃的同时引种美国大樱桃，在新疆林业科学院生物实验室进行实验。引种树种：美国大樱桃，引种地：北京，栽培地：新疆乌鲁木齐市林业科学院树木园，属于二次引种树种。具体步骤如下：

a确定实验室：引种人员在调查的基础上，确定从引种树木的成功引种地北京市进行二次引种美国大樱桃，实验确定在新疆林业科学院生物实验室进行试验，实验室人员和条件满足拟引进树种抗寒性实验，具有2台变温式冰柜，冰柜的最低温度能够达到新栽培地点的极端气温以下，实验室具有组培室条件，采光正常，温度20-25℃；

b调查引种地的10年旬平均最低温度和极端低温：通过北京气象局资料调查和查询，北京产地的10年旬最低平均温度-8℃，极端低温-14℃；

c调查引栽培地的10年旬平均最低温度和极端低温：通过乌鲁木齐市气象局资料调查和查询，引种栽培地的10年旬平均最低温度-25℃，极端低温-32℃；

d引种树种的种条采集：2006年11月1号树木已进入休眠期，采集美国大樱桃的一年生种条，种条成熟木质化程度高、无病虫害、芽眼饱满、无机械损伤，种条小头直径大于0.5cm，大头直径1.2cm，长度保持1m，数量20根；

e种条运输：种条采集好后，将种条用塑料布密封，冷藏快运至新疆林业科学院的实验室，保证种条活力和不失水；

f变温冰柜降温储藏：11月3号种条运到实验室后，将种条用自来水冲洗干净，分成A1和A2两组，每组10根用塑料布密封，密封前每组中加一根充分湿润的、和种条等长度的医用保湿纱布条，种条打捆密封好后，放入冰柜降温储藏，起始温度11月3号是-2℃，之后每1天降低2度，经过3天（11月6号）至引种地的10年旬平均最低温度-8℃，之后每1天降低1度，经过6天（11月12号）至引种地的10年极端低温-14℃；之后每2天降低1度，经过22天（12月4号）至栽培地乌鲁木齐市的10年旬平均最低温度-25度，之后每2天降低1度，经过14天（12月18号）至栽培地的10年极端低温-32℃；

g变温冰柜升温储藏：在A1种条降温到栽培地的10年旬平均最低温度-25度时，2天后（12月6号），取出一捆种条放入另一个冰柜进行升温储藏，每2天升高1度，34天后（2007年1月10号），升温至引种地的10年旬平均最低温度-8℃，之后每天升高1度，6天后（2007年1月16号），升温至-2℃，1天后（2007年1月17号）拿出种条进行裁剪水培；A2种条在降温到栽培地的10年极端低温-32℃时，2天后（12月20号）在原冰柜中升温储藏，每2天升高1度，48天后（2007年2月6号），升温至引种地的10年旬平均最低温度-8℃，之后每天升高1度，6天后（2006年2月12号），升温至-2℃，1天后（2月13号）拿出种条进行裁剪水培；

h水培：在正常室温（20-25℃）、采光正常的组培室环境条件下水培，水培采用烧杯，烧杯放入蒸馏水，种条裁剪成长25cm的种穗，每个种穗平均有4个芽眼，每个枝条裁剪成4个种穗，将种穗1/2浸入蒸馏水，1/2的种穗在蒸馏水之上，每个烧杯5个种穗进行水培；将两种种穗，A1和A2分别进行水培和观测。A1和A2分别为8个烧杯，40个种穗；

i观测：对A1和A2两种水培的种穗两天后开始分别观测和记录芽能否正常膨大和开放这个指标：经过15天的观测和记录：A1出现第二种情况，是芽不能正常膨大和开放，但有膨大和开放现象，或部分芽能够膨大和开放，表明芽受到一定程度的冻害；A2出现第三种情况，是芽不能正常膨大和开放，并且芽褐变萎缩死亡，表明芽严重冻害死亡；

j引种树木细胞的受损情况确定：第二种情况是引种树木细胞部分受损，第三种情况是引种树木细胞受损、死亡；

k可否引种的确定：根据A1和A2两种水培的结果，确定不能引种，引种存在很大风险，因为引种树种不能在栽培地正常越冬。

通过本发明确定美国大樱桃不能引种，引种存在很大风险，因为引种树种不能在栽培地正常越冬。2007年3月15日从北京将大樱桃引入50株到新疆乌鲁木齐市新疆林业科学院树木园栽植试验，引入后在冷库（0-3℃）沙埋假植，4月15日50株栽培在乌鲁木齐市新疆林业科学院树木园，经过3年栽培、观测、测定，表明该树种地上部分每年冬季由于冻害死亡或地上50%-70%的部分死亡，无法在乌鲁木齐市正常越冬和生长。通过全株包裹保护，勉强能够在乌鲁木齐市越冬和生长，稍有不慎全株死亡。