一步法实时定量荧光PCR检测香石竹斑驳病毒的方法

摘要

本发明公开一步法实时定量荧光PCR检测香石竹斑驳病毒的方法。其主要特征在于靶基因为CarMV分离物CP基因经过克隆后，构建质粒载体，选取正确的质粒载体经线性化体外转录后，计算提纯后ssRNA用10倍梯度稀释，配制拷贝数为2×102‑2×106copies阳性ssRNA制作标准曲线，并设计香石竹斑驳病毒特异性检测的引物对和Taqman荧光探针，设计实验找到最优化条件下引物的退火温度、引物浓度、探针浓度，并采用一步实时定量RT‑PCR检测方法进行定量检测。本发明方法能快速、可靠的检测出香石竹斑驳病毒，并可对所含病毒进行定量。