基于不对称AS2-PCR的基因变异检测方法及引物

摘要

本发明公开了一种基于不对称AS2‑PCR的基因变异检测方法，步骤包括：1)提取样本DNA；2)扩增待测基因片段；3)将扩增产物加到不对称AS2‑PCR反应体系中，进行PCR扩增反应和探针外切反应；所述AS2‑PCR反应体系含有2条带荧光标记的通用标签信号探针、2条正向引物、1条反向引物、有外切活性的聚合酶和PCR缓冲液；4)检测反应的荧光信号，计算两个通道的Ct差值，并根据Ct差值判断待测基因SNP。本发明还公开了用于上述方法的不对称AS2‑PCR寡核苷酸引物组及其用途。本发明通过设计不对称AS2‑PCR的引物，克服了传统AS2‑PCR假阳性率高的问题，提高了基因变异检测的准确性。