一种固定化山梨醇脱氢酶及其固定化方法与应用

摘要

本发明公开了一种固定化山梨醇脱氢酶及其固定化方法与应用，以孔径适配的介孔材料SBA15为载体，并在适宜的pH条件下，固定游离的山梨醇脱氢酶得到山梨醇脱氢酶的固定化酶；以制备得到的固定化山梨醇脱氢酶为催化剂，在1.5~100 g/L的底物(山梨醇或D‑半乳糖醇或L‑艾杜糖醇)浓度下，添加20 U~300 U的NADH氧化酶和0.05~0.5 mmol/L的NAD+，在pH 8.0~9.0，20~30℃、180~280 rpm条件下反应3~12 h，得到D‑果糖(或D‑塔格糖或L‑山梨糖)，反应结束后过滤回收山梨醇脱氢酶可重复使用5次仍保留75%的催化活性。本发明中通过计算机模拟进行固定化条件优化，固定化效率高，蛋白固载量达到545 mg/g。