降低肾损害的格列喹酮复方制剂

摘要

本发明公开了一种降低肾损害的格列喹酮复方制剂，包括主药和辅料，其特征在于，所述主药由格列喹酮20～30％(w/w)、川芎嗪15～25％(w/w)和三七提取物余量组成，所述三七提取物的用量以干燥粉末的质量计；所述三七提取物由三七的根提取获得，提取物包括皂苷、黄酮、氨基酸和多糖四类物质。本发明的格列喹酮复方制剂通过辅以三七提取物和川芎嗪，减少格列喹酮用量，进一步降低格列喹酮对患者肾脏功能的影响，三类药物协同作用，降血糖的同时能够一并保护肾小球的功能，避免肾小球滤过能力下降，以及调节血脂，使其更适用于糖尿病并发肾病的患者。

说明书

技术领域

本发明涉及糖尿病药物制剂技术领域，特别是一种降低肾损害的格列喹酮复方制剂。

背景技术

糖尿病是一组由多病因引起的以慢性高血糖为特征的终身性代谢性疾病。长期血糖增高，大血管、微血管受损并危及心、脑、肾、周围神经、眼睛、足等，据世界卫生组织统计，糖尿病并发症高达100多种，是目前已知并发症最多的一种疾病。糖尿病死亡者有一半以上是心脑血管所致，10％是肾病变所致。

目前常用的口服降糖药物分为促胰岛素分泌剂类、二甲双胍类、α-糖苷酶抑制剂类、噻唑烷二酮衍生物、DDP-4酶抑制剂等；其中促胰岛素分泌剂类又分为磺脲类和非磺脲类(格列奈类)。

大部分磺脲类降糖药物如氯磺丙脲、美吡达、达美康、优降糖等容易引起糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)，糖尿病肾病是2型糖尿病常见的微血管并发症，大约40％的糖尿病患者可发生DN。DN发病隐匿，病情常表现为不可逆。临床特征为蛋白尿，水肿，晚期出现严重肾功能衰竭，甚至尿毒症，是引起糖尿病死亡的重要原因。

相较于其他磺脲类降糖药，格列喹酮对肾功能毒副作用小很多，是唯一不以肾脏排泄为主的磺脲类降糖药。在肝脏内代谢完全，大部分经胆管由粪便排除，经肾排出约为5％。对肾功能的影响较小。

虽然格列喹酮可以最大程度降低对肾的毒副作用，延缓DN的发展。目前对于DN的治疗没有特效方法，一直以来多以干预生活方式、降糖降压、服用血脂调节药物以及阿司匹林抗凝等综合措施以控制血糖、防治高血压。

范丽梅等联合应用格列喹酮与卡托普利对糖尿病肾病进行治疗，发现单独使用格列喹酮，以及格列喹酮与卡托普利联合使用，在治疗后患者血糖、尿蛋白排泄量、血肌酐水平均较治疗前显著降低(P＜0.01)；而加用卡托普利的患者治疗后血肌酐水平以及尿蛋白排泄量均低于单用格列喹酮的患者，差异有高度统计学意义(P＜0.01)，说明格列喹酮与卡托普利联合应用较单用格列喹酮对于糖尿病肾病的治疗效果更佳(范丽梅等，卡托普利联合格列喹酮治疗糖尿病肾病的临床观察，药物与临床，2011年11月第8卷第31期)。

中国专利文献公开号CN1762356A将牛磺酸与格列喹酮组合，制备成治疗II糖尿病、治疗和/或预防与II型糖尿病有关的肾病并发症的联合药物，能够提高单独用药的疗效，减少糖尿病用药的剂量，进而有效的降低了副作用，同时具有治疗和预防糖尿病肾病并发症的作用。

中国专利文献公开号CN1895674A将B族维生素与磺脲类抗糖尿病药物组合，能够一定程度上减少糖尿病并发症的发生。并列举了格列本脲维生素B6组合物，以及格列齐特叶酸组合物能够降低大鼠蛋白尿和血尿程度。

西药虽然成分明确，作用机理清晰，但缺点是随着药用时间的延长，机体会产生耐药性，最终导致继发性失效，患者不得不换药或者附加其他治疗，给身体造成更沉重的负担，对于疾病的治疗和患者长期的生活质量并没有太大好处。

中国专利文献公开号CN101757253A将格列喹酮与生地、首乌、白术、黄芪、元参、仙鹤草和桑叶的提取物进行组合制备治疗糖尿病的药物，在治疗糖尿病上具有一定的协同效应，但对于肾脏和血管的保护作用并不明显。

发明内容

本发明的目的是开发一种格列喹酮复方制剂，进一步降低格列喹酮对患者肾脏功能的影响，增加复方对肾脏和血管的保护功能，使其更适用于糖尿病并发肾病的患者。

为了实现上述目的，本发明提供了一种降低肾损害的格列喹酮复方制剂，包括主药和辅料，所述主药由格列喹酮20～30％(w/w)、川芎嗪15～25％(w/w)和三七提取物余量组成，所述三七提取物的用量以干燥粉末的质量计；所述三七提取物由三七的根提取获得，提取物包括皂苷、黄酮、氨基酸和多糖四类物质。

三七为五加科植物三七Panax notoginseng(Burk)F.H.Chen的干燥根，又名田七，具有散瘀止血，消肿定痛的作用，是传统止血化瘀的药物。

川穹嗪是从伞形科藁本属植物川芎中分离提纯的生物碱单体，化学名称为四甲基吡嗪，主要适用于缺血性脑血管病。曾经有报道将三七和川穹嗪合用治疗心脑血管疾病。

本发明通过联合格列喹酮和三七提取物达到主要降糖效果，同时加入川穹嗪，在降低血糖的同时保护肾脏组织特别是过滤膜，以改善肾功能；另外三种主药成分联合对于微血管循环也有一定的改善作用。相较于单独添加三七皂苷，同时含有三七的多糖、黄酮和氨基酸等其他提取物成分以后，这种协同效果更加明显，能够有效缓解肾脏和微血管负担，延长患者的高质量生活期。

优选地，上述降低肾损害的格列喹酮复方制剂，所述三七提取物通过以下方法提取获得：

取干燥的三七原料，首先采用减压内部沸腾法对三七中的皂苷、黄酮和氨基酸进行提取，再对药渣进行常压内部沸腾法提取，得到多糖。

优选地，上述降低肾损害的格列喹酮复方制剂，所述减压内部沸腾法的提取条件为：以70％(v/v)乙醇作为解吸剂，解吸30分钟，-0.084MPa下进行减压内部沸腾提取4分钟，药渣再进行一次提取；合并两次提取液，浓缩，干燥，粉碎。

本发明中，对于体积百分比的乙醇，均指乙醇的水溶液。例如，60％(v/v)乙醇，表示乙醇体积占乙醇水溶液总体积的60％。

优选地，上述降低肾损害的格列喹酮复方制剂，所述常压内部沸腾法的条件为：以80％(v/v)乙醇作为解吸剂，按15:1料液比加入到药渣中，解吸30min，然后加入95℃热水提取8min，离心取上清，进行减压浓缩和干燥粉碎。

中药有效成分的提取工艺直接影响药物的有效性，而中药药理的特点是由多成分，多靶点综合发挥作用，因此提取工艺对于药效的影响更加明显。

本发明参考文献“三七有效成分群的高效提取及分离研究”(广西大学硕士学位论文，翁艳英，2010.05.01)中公开的提取工艺，将三七中的皂苷、黄酮、氨基酸和多糖均最大限度提取出来，所得提取物不但符合本发明复方制剂对于三七提取物的成分要求，而且这种提取工艺相较于超声提取、微波提取、超临界萃取等其他方法更为简单方便，成本低廉，非常适合于药厂大批量制造生产。

优选地，以上任一所述降低肾损害的格列喹酮复方制剂，所述主药中按质量百分比计由格列喹酮25％(w/w)、川芎嗪19％(w/w)和三七提取物56％(w/w)组成。该比例下的组合物，被实验验证为最优配比。

优选地，降低肾损害的格列喹酮复方制剂，其特征在于，所述剂型为胶囊剂。由于格列喹酮复方制剂中含有三七提取物较易吸湿，因此制成胶囊剂既可以延长保存期限又能够充分保留各组分活性，不影响药效。

优选地，上述降低肾损害的格列喹酮复方制剂，所述辅料用量为主药的1.5～3.0倍。为满足改善主药制剂性能，同时保证主药达到有效量，并且避免给患者造成大分量服用造成的抗拒情绪等，辅料用量在1.5～3.0倍于主药的范围最为适宜。

优选地，上述降低肾损害的格列喹酮复方制剂，所述辅料成分包括乳糖和微晶纤维素。辅料的添加主要为了改善主药的制剂性能，由于三七提取物吸湿性较强，所以辅料选择吸湿性极低的乳糖和微晶纤维素，不但能够改善吸湿性，同时也能很好地调整药物粉末的流动性，更加适用于制备胶囊剂。

优选地，上述降低肾损害的格列喹酮复方制剂，制备胶囊时，先将三七提取物制成干燥粉末并与乳糖混合，再加入格列喹酮、川芎嗪和微晶纤维素，灌装硬胶囊。

本发明提供的降低肾损害的格列喹酮复方制剂，具有以下有益效果：

本发明的格列喹酮复方制剂通过辅以三七提取物和川芎嗪，减少格列喹酮用量，进一步降低格列喹酮对患者肾脏功能的影响，三类药物协同作用，降血糖的同时能够一并保护肾小球的功能，避免肾小球滤过能力下降，以及调节血脂，使其更适用于糖尿病并发肾病的患者。

具体实施方式

为了使本技术领域的人员更好地理解本发明方案，下面结合具体实施方式对本发明作进一步的详细说明。

实施例1格列喹酮复方胶囊的制备

秤取干燥的三七根，经粉碎后装入提取容器，按照料液比(质量)5:4倒入70％(v/v)乙醇，作为解吸剂，浸润三七粉，室温解吸30分钟。然后将8倍量温度为45℃的蒸馏水倒入浸润充分的药材，迅速减压至-0.084MPa，使三七粉内部有小气泡冒出，实现内部沸腾提取4分钟，真空过滤。取提取后的滤渣(即药渣)，按照上述第一次提取相同的条件进行第二次提取，仅将蒸馏水量改为滤渣质量的5倍。合并两次三七提取液，进行减压浓缩和干燥粉碎，得提取物Ⅰ。

两次提取后剩余的药渣，按质量15:1的料液比加入80％(v/v)乙醇，静置解吸30min，然后常压下加入95℃热水提取8min，离心取上清，上清液进行减压浓缩和干燥粉碎，得提取物Ⅱ。合并提取物Ⅰ和Ⅱ，组成三七提取物。

秤取格列喹酮、川芎嗪和三七提取物，质量比为25:19:56构成主药，按辅料用量为主药的2.5倍秤取辅料乳糖和微晶纤维素适量。

先将三七提取物制成干燥粉末并与乳糖混合，再加入格列喹酮、川芎嗪和微晶纤维素，灌装硬胶囊。胶囊规格为每粒0.125g，含格列喹酮8.93mg。

购买市售的三七总皂苷，替换上述三七提取物，其余流程完全相同，制备格列喹酮复方胶囊对照品。

实施例2格列喹酮复方胶囊药效检测

1、DN模型复制

选用SPF级雄性SD大鼠作为实验动物，饲喂高能量饮食(高糖高脂饮食)并辅以小剂量腹腔注射链脲佐菌素，诱导非胰岛素依赖性(2型)糖尿病，检测血糖≥16.7mmol/L以上时确定为糖尿病大鼠模型造模成功。糖尿病大鼠模型按照自然病程进展为糖尿病肾病(DN)，检测空腹血糖≥16.7mmol/L，尿蛋白排泄率＞20μg/min，尿量时正常量的150％，确定为糖尿病肾病大鼠模型复制成功。

2、试验用药及分组饲养

参照文献“格列喹酮合滋肾汤治疗2型糖尿病疗效观察”(黄燕林等，浙江中西医结合杂志2008年第18卷第4期：223-224页)，组方为黄芪、生地、元参、熟地、黄精各20g，山萸肉、归身各10g，川连2g，枳壳15g，制首乌12g。加适量水煎煮两次，合并煎煮液共计500ml，浓缩至50ml，得滋肾汤。

DN模型大鼠100只，随机分为以下五组，每组20只，其中模型组不做任何处理，正常饲喂标准饲料。其余各组每天分早、中晚各用药一次，剂量如下：

糖适平组：以格列喹酮质量计算，9.45mg/kg大鼠每天。糖适平为北京万辉双鹤药业有限责任公司生产，规格为1片含格列喹酮30mg；

皂苷对照组：实施例1方法制备的格列喹酮复方胶囊对照品，按照主药质量计算，灌胃9.45mg/kg大鼠每天；

实验组：实施例1方法制备的格列喹酮复方胶囊，按照主药质量计算，每天灌胃9.45mg/kg大鼠每天；

滋肾汤组：灌胃上述方法制备的滋肾汤5.25ml/kg大鼠每天。

另外选择正常的SPF级雄性SD大鼠20只作为正常对照组，饲喂标准饲料。

连续给药12周。

尿液样品收集：将大鼠饲养于代谢笼中，自由饮食，收集容器中加入适量甲苯作为防腐剂，收集24小时尿液，记录24h尿量，注意尿液中不要混入大鼠的血液。量取尿液体积后，4000转/分钟离心10分钟，上清冻存于-20℃待测。

末次给药24h后，各组大鼠处死，采血，3000转/分钟离心，收集血清，-80℃储存备用。

3、各项指标检测结果

常规方法检测尿蛋白、尿肌酐、空腹血糖(FBG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)和血液黏度等生化指标。结果见下表：

表1.尿液各项指标检测结果

组别24h尿量(mL)尿蛋白(g/L)尿肌酐(μmol/L)正常对照15.38±1.82209.46±57.124397.81±1097.36模型组90.21±12.54410.58±67.221291.45±352.12糖适平组55.37±12.84255.24±26.372917.66±319.24皂苷对照组52.38±12.89241.35±65.242721.09±294.14实验组49.37±17.56231.47±58.743351.14±245.22滋肾汤组64.05±14.36249.73±62.452709.21±248.11

表2.血液指标检测结果(mmol/L)

表3.各组大鼠血液样品的全血黏度检测结果(mPa·s)

组别200s^-130s^-15s^-11s^-1正常对照2.24±0.374.98±0.138.35±0.9619.38±0.57模型组87.41±10.26407.28±25.811307.92±419.2241.24±1.87糖适平组2.71±0.574.10±0.516.69±0.9818.37±4.15皂苷对照组2.21±0.834.25±0.229.91±0.2431.18±0.14实验组2.35±0.144.07±0.518.62±0.4729.14±1.96滋肾汤组10.96±0.5434.68±0.6784.87±0.8536.97±8.10

糖尿病的并发症非常多，病因和发病机制十分复杂，目前仍然没有研究清楚，糖尿病以慢性高血糖为主要临床表现，可由不同途径损害肾脏，这些损害可以累及肾脏所有的结构，糖尿病病人一旦发生肾脏损害出现持续性蛋白尿则病情不可逆转往往发展至终末期肾功能衰竭。因此保护肾脏功能，减少降糖药物对肾脏的损害是十分关键的，含有皂苷、黄酮、氨基酸和多糖的三七提取物一方面能够协同格列喹酮降血糖，一方面与川芎嗪联合提高其肾脏保护效果，而且研究发现，不添加黄酮、氨基酸及多糖的三七皂苷，在上述功能上较差，表明综合提取物的各成分之间也有相互作用。

以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。