一种OCH1缺陷型抗CD20四价抗体表达毕赤酵母的构建方法

摘要

本发明公开了一种OCH1缺陷型抗CD20四价抗体表达毕赤酵母的构建方法，首先将菌株JC308的编码α-1,6-甘露糖转移酶的OCH1敲除，将改造后的无表达能力的och1与筛选标记连入pPICZαA中，导入野生型毕赤酵母JC308，经同源重组后筛选得到OCH1缺陷型菌株，记作△och1，然后合成的抗CD20四价抗体的序列与毕赤酵母表达质粒pPIC9相连，导入OCH1基因缺陷菌株△och1中即得。本发明中将毕赤酵母α-1,6甘露糖基转移酶(OCH1)基因敲除，可阻止高甘露糖型糖链的形成，从而缩小酵母表达蛋白与人天然蛋白的糖基化差异，保证药用蛋白的安全性。