抗鹅CD4胞外区单克隆抗体及其在检测禽类外周血中CD4+T淋巴细胞中的应用

摘要

本发明公开了抗鹅CD4胞外区单克隆抗体及其在检测禽类外周血中CD4+T淋巴细胞中的应用。本发明利用携带鹅CD4胞外区的原核表达载体pET-30a-CD4ex，采用大肠杆菌RosettaTM(DE3)pLysS表达鹅CD4胞外区基因，得到重组蛋白rGopET-30a-CD4ex。以重组蛋白rGopET-30a-CD4ex为免疫原，免疫三次BALB/c小鼠，加强免疫后，经重组蛋白rGopET-30a-CD4ex筛选获得1株稳定分泌抗鹅CD4胞外区单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为5A9，保藏号是：CGMCC？NO.11192。研究表明，由该杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体能与纯化的重组鹅CD4胞外区蛋白rGopET-30a-CD4ex反应，同时也能够与分离的鹅、鸭以及鸡外周血淋巴细胞发生特异性反应。因此，本发明的提出为检测禽类外周血中CD4+T淋巴细胞提供了一种新的、有效的技术手段。