一种基于miRNA/shRNA转录加工机制转录sgRNA的方法

摘要

本发明公开了一种基于miRNA/shRNA转录加工机制转录sgRNA的方法，包括如下步骤：(1)根据目的选取基因，分别设计至少二miRNA/shRNA的基因序列和至少一sgRNA的基因序列；(2)将该至少二miRNA/shRNA的基因序列顺序排列，并将一sgRNA的基因序列连接于二miRNA/shRNA之间，形成一多顺反子；(3)将多顺反子置于RNA聚合酶启动子下游，并置于载体上导入具有miRNA的动物细胞或植物细胞中以转录形成pri-miRNA/shRNA-sgRNA；(4)上述pri-miRNA/shRNA-sgRNA在上述动物细胞或植物细胞中被RNase？III加工成pre-miRNA/shRNA-sgRNA，在此过程中，sgRNA和pre-miRNA/shRNA分别释放出来。