蓖麻饼粕粗提取物在抑制植物病原腐霉菌中的应用

摘要

本发明公开了一种蓖麻饼粕粗提取物在抑制植物病原腐霉菌中的应用，所述的植物病原腐霉菌包括终极腐霉Pythium？ultimum、瓜果腐霉Pythium？aphanidermatum和强雄腐霉Pythium？arrhenomanes。蓖麻饼粕粗提取物的制备，包括：称取一定量粉碎后过80～120目筛的蓖麻饼粕粉，加入蒸馏水，回流提取，趁热过滤并收集滤液，药渣留用；再加入蒸馏水于药渣中，继续回流提取，趁热过滤并收集滤液；合并两次滤液，蒸发浓缩后，获得褐色液体，即得。本发明不仅仅为生产上提供了一种优良的新杀菌剂，而且对蓖麻产业废弃物的利用开辟新的途径。

说明书

技术领域

本发明涉及植物保护领域，具体是一种蓖麻饼粕粗提取物在抑制植物病原腐霉菌中的应用。

背景技术

腐霉菌隶属藻物界卵菌纲霜霉目腐霉科腐霉属，是世界性分布的土壤真菌，腐生能力很强，可以侵染150多种蔬菜瓜果作物的根部和幼苗，引起猝倒、根腐、根茎腐及种子腐烂等多种病害，对农业生产损失严重。其中，由瓜果腐霉（Pythiumaphanidermatum）引起的猝倒病是瓜菜、花卉、药用植物、烟草和豆类、棉花、玉米、高粱等植物幼苗期一种世界范围内的毁灭性病害。有通常在出苗后，茎基部近地面处产生水渍状暗色斑，继而绕茎扩展，逐渐缢缩成细线状，使幼苗地上部因失去支撑能力而折倒，俗称卡脖子病。湿度大时病部或土表会产生白色棉絮状物，即病菌菌丝、孢囊梗和孢子囊。在气候适宜的条件下，短期内就可爆发，蔓延速度极快，严重情况下可导致植物幼苗大面积死亡，造成缺苗甚至毁种，给农业生产带来严重的经济损失。

目前市场上销售的恶霜菌酯、甲霜恶霉灵、甲霜灵锰锌等属于有毒农药（低毒）。

发明内容

本发明的目的在于提供一种安全、易降解、无残留、无污染的蓖麻饼粕粗提取物在抑制植物病原腐霉菌中的应用。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

蓖麻饼粕粗提取物在抑制植物病原腐霉菌中的应用。

作为本发明进一步的方案：所述的植物病原腐霉菌包括终极腐霉Pythiumultimum、瓜果腐霉Pythiumaphanidermatum和强雄腐霉Pythiumarrhenomanes。

作为本发明进一步的方案：所述的蓖麻饼粕粗提取物的制备，包括以下步骤：称取一定量粉碎后过80～120目筛的蓖麻饼粕粉，按照蓖麻饼粕粉：蒸馏水的质量体积比为1g：8～10ml的比例，加入蒸馏水，回流提取1.5～2.5h，趁热过滤并收集滤液，药渣留用；再按照蓖麻饼粕粉：蒸馏水的质量体积比为1g：8～10ml的比例，加入蒸馏水于药渣中，继续回流提取1.5～2.5h，趁热过滤并收集滤液；合并两次滤液，蒸发浓缩后，获得褐色液体，即得。

作为本发明进一步的方案：所述的蓖麻饼粕粗提取物的干物质用量在大于0wt.%、不大于20wt.%的数值范围内。

作为本发明进一步的方案：所述的蓖麻饼粕粗提取物的干物质用量为5～15wt.%。

作为本发明进一步的方案：所述的蓖麻饼粕粗提取物的干物质用量为5wt.%。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

本发明提供了蓖麻饼粕粗提取物在抑制植物病原腐霉菌中的应用。由于该提取物是天然物质，对农作物安全，易于降解，无残留、无污染。因此，本发明不仅仅为生产上提供了一种优良的新杀菌剂，而且对蓖麻产业废弃物的利用开辟新的途径。

附图说明

图1是终极腐霉（Pythiumultimum）的形态特征（其中，1：菌丝膨大体；2：藏卵器、雄器和卵孢子）；

图2是瓜果腐霉（Pythiumaphanidermatum）的形态特征（其中，1：孢子囊和囊泡；2：藏卵器、雄器和卵孢子）；

图3是强雄腐霉（Pythiumarrhenomanes）的形态特征（其中，1：孢子囊；2：藏卵器、雄器和卵孢子）；

图4是蓖麻饼粕粗提取物对终极腐霉（Pythiumultimum）的生长抑制结果图；其中蓖麻饼粕粗提取物的干物质用量左到右依次是0wt.%、15wt.%、10wt.%、5wt.%；

图5是蓖麻饼粕粗提取物对瓜果腐霉（Pythiumaphanidermatum）的生长抑制结果图；其中蓖麻饼粕粗提取物的干物质用量从左到右依次是0wt.%、15wt.%、10wt.%；

图6是蓖麻饼粕粗提取物对强雄腐霉（Pythiumarrhenomanes）的生长抑制结果图；其中蓖麻饼粕粗提取物的干物质用量从左到右依次是0wt.%、15wt.%、10wt.%。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

请参阅图1～4，本发明实施例中，蓖麻饼粕粗提取物在抑制植物病原腐霉菌中的应用，包括以下几个步骤：

一、植物病原腐霉菌的分离与鉴定

采集具有典型腐霉病害症状的植物样本。选取病健交界处材料，用自来水冲洗2～3次，再切成5mm左右的小块，灭菌水冲洗3次，用无菌滤纸吸干表面水分后放入腐霉选择性培养基（NARM）平板上25℃暗培养。待长出菌落后挑取菌丝尖端移于新的NARM培养基上进行纯化、编号保存待鉴定。将纯化菌株接种在CMA平板上，25℃暗培养2～3d，用打孔器在菌落边缘打取菌丝块，移植到新的CMA平板中央，切取5mm的草坪草叶经过灭菌后夹放在菌丝块周围，25℃暗培养。待长出的菌落覆盖草叶之后把草叶放入10ml灭菌池塘水（池塘水：蒸馏水的体积比为=1：2）中25℃暗培养，诱导形成繁殖体后在显微镜下观察并采集图像。获得的3种腐霉：终极腐霉（Pythiumultimum）、瓜果腐霉（Pythiumaphanidermatum）和强雄腐霉（Pythiumarrhenomanes）的形态特征分别如图1、2和3所示。

二、蓖麻饼粕粗提物的制备

称取粉碎后过100目筛的蓖麻饼粕粉100g于1L单口圆底烧瓶中，加入900ml蒸馏水，回流提取2h，趁热过滤并收集滤液。再加入900ml蒸馏水于药渣中，继续回流提取2h，趁热过滤并收集滤液。合并2次提取物，蒸发浓缩后获得褐色液体。

三、毒力测定

毒力测定采用了抑制菌落生长方法。把蓖麻饼粕粗提取物配制成干物质用量分别为20wt.%、15wt.%、10wt.%、5wt.%、0wt.%的系列浓度梯度。将共试菌株分别在CMA培养基上预培养2d后，用直径5mm的打孔器在菌落边缘取菌块，并将菌块接种于含系列药剂浓度的CMA平板上，于25℃黑暗条件下培养，观察菌落生长情况，每个处理重复3次，结果如图4～6所示。由图可以得出：干物质用量为5wt.%～10wt.%的蓖麻饼粕粗提取物就能完全抑制3种腐霉菌的生长。

四、结论

低浓度的蓖麻饼粕粗提取物对植物病原真菌有很强的生长抑制作用。蓖麻饼粕粗提取物在腐霉菌引起的植物病害控制上具有很高的利用价值。用该物质生产农药时，生产工艺简单、原材料资源丰富廉价，大幅度降低成本。而且蓖麻饼粕粗提取物是天然提取物，在环境中很容易降解，能解决目前在农业生产上应用的农药所带来的环境污染问题。

对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。

此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。