一种用于CRISPR/Cas9技术的同源臂载体构建方法

摘要

本发明公开了一种用于CRISPR/Cas9技术的同源臂载体构建方法。本发明提供了一种将外源DNA分子利用CRISPR/Cas9同源重组到待编辑DNA片段的试剂盒，包括同源重组DNA片段或表达所述同源重组DNA片段的表达盒或重组载体、CRISPR/Cas？9系统或表达CRISPR/Cas？9系统的表达盒或重组载体；所述CRISPR/Cas？9系统包括SgRNA和Cas？9或Cas？9的mRNA。本发明方法涉及对sgRNA识别序列的选择、对同源臂载体上特定位点进行修饰和使用Gibson？assembly方法快速构建载体，在使用CRISPR/Cas9技术建立转基因动物模型过程中，具有广泛的用途。