一种新型的构建CRISPR/Cas9 KnockOut载体的方法

陈恒玲; 许杰; 黄玉连; 林显光

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一种新型的构建CRISPR/Cas9 KnockOut载体的方法

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利用CRISPR/Cas9系统这一基于细菌核酸酶Cas9的新型基因编辑工具,可以在原核细胞和真核细胞中实现基因敲除的功能.首先使用CRISPR设计工具设计靶点,退火来制备sgRNA双链,用Bsm BⅠ酶切割gRNA质粒,构建Lenti CRISPRv2的重组质粒.通过U6启动子上的LKO1.5引物对每个菌落序列进行了测序验证,结果表明利用此新方法可以成功构建CRISPR/Cas9系统的Knock Out载体.

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来源
《中南民族大学学报：自然科学版》 |2018年第3期|68-71|共4页
作者
陈恒玲; 许杰; 黄玉连; 林显光;
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作者单位

中南民族大学生物医学工程学院;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类分子生物学;
关键词
CRISPR/cas9系统; 基因敲除; 载体构建; Spata49;

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