一种治疗牛前胃弛缓的药物及其制法与检测方法及用途

摘要

本发明涉及兽药领域，具体涉及一种治疗牛前胃弛缓的药物及其制法与检测方法及用途。该药物是由以下重量份的原料制成的：马蓼1～2重量份，黄开口1～2重量份。该药物制备成散剂、颗粒剂。制法为：干燥的马蓼、黄开口，第一次加11倍量水浸泡1小时，煎煮1小时，第二次加4倍量水煎煮1小时，合并水煎液，滤过，滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉，过筛，混匀，制成散剂。药物质量检测方法的色谱条件为：采用Crosmosil？C18色谱柱；流动相：比例为45：55的甲醇-水；检测波长：245nm；柱温：22℃；流速：1.0mL·min-1；进样量：10μL。本发明所述的药物可用于治疗牛前胃弛缓、牛急性肠炎。本发明药物具有升举牛脾胃中清阳之气，导滞消食的功效，可恢复患牛瘤胃功能，改善患牛临床症状，取得理想的治疗效果。

说明书

技术领域

本发明涉及兽药领域，具体涉及一种治疗牛前胃弛缓的药物及其制备方法、检测方法及用途。

背景技术

牛前胃弛缓，指的是牛前胃的兴奋性下降，且收缩力弱化，导致其瘤胃中内容物的运转速度减缓，菌群失衡，最终导致牛消化障碍和全身机能发生紊乱的疾病，其在畜牧业疾病中较为常见。

牛是反刍动物，共计4个胃，即皱胃、瘤胃、网胃、瓣胃，由于瘤胃、网胃、瓣胃没有胃腺，无法分泌胃液，因而称之为前胃。皱胃能够分泌胃液，和人胃相似，即为“真胃”。牛前胃迟缓，是指牛的前胃运动机能和收缩力弱化，导致消化系统紊乱的疾病，中兽医称其为脾虚慢草。其中，原发性的牛前胃弛缓通常是因饲养管理不当而引发，如草料骤然更换、饲料经霜冻或者混入过多泥沙，致使牛前胃无法在短时间内适应等。继发性牛前胃弛缓通常因瘤胃积食和膨胀等引发。

对于牛前胃弛缓的治疗，临床上通常采取常规西药疗法，通过增强患牛抗病毒与抗炎能力，恢复患牛正常的心肝肾功能。然而其疗效不佳，痊愈速度较慢。而中医药治疗牛前胃迟缓，取得具有一定的治疗优势。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种组方简单合理、疗效好的治疗牛前胃弛缓的药物。

本发明的另一目的是提供该药物的制备方法。

本发明还提供了该药物的质量检测方法。

本发明还提供了该药物的制药用途。

本发明所要解决的技术问题是通过以下的技术方案来实现的。本发明是一种治疗牛前胃弛缓的药物，其特点是：它是由以下重量份的原料制成的：马蓼1～2重量份，黄开口1～2重量份。

在本发明药物中原料药的基源如下：

马蓼为蓼科蓼属植物桃叶蓼PolygonumpersicariaL.的全草。

黄开口为报春花科珍珠菜属植物轮叶过路黄LysimachiaklattianaHa的干燥全草。

本发明药物优选是由以下重量份的原料制成的：马蓼1重量份，黄开口2重量份。

本发明药物再优选是由以下重量份的原料制成的：马蓼2重量份，黄开口1重量份。

本发明药物再优选是由以下重量份的原料制成的：马蓼1重量份，黄开口1重量份。

本发明药物再优选可以制备成散剂、颗粒剂。

本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来实现。本发明还公开了以上所述的治疗牛前胃弛缓的药物的制备方法，其特点是采用如下方法制备：取马蓼、黄开口，混合，加入3～15倍量的水浸泡0.5～2小时，煎煮0.5～2小时，煎煮2～4次，每次0.5～2小时，提取液合并，滤过，滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉，加入辅料，混匀，制成散剂，即得。

以上所述的治疗牛前胃弛缓的药物的制备方法，进一步优选的制备方法是：取干燥的马蓼、黄开口，第一次加11倍量水浸泡1小时，煎煮1小时，第二次加4倍量水煎煮1小时，合并水煎液，滤过，滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉，过筛，混匀，制成散剂，即得。

本发是所述的药物可以采用如下方法检测：采用高效液相色谱法进行欧妥吉素的含量测定：

（1）色谱条件：采用CrosmosilC₁₈色谱柱；流动相：比例为40～60：40～60的甲醇-水；检测波长：240～260nm；柱温：15～25℃；流速：0.5～1.5mL·min^-1；进样量：5～20μL；

（2）对照品溶液制备：精密称取干燥至恒重的欧妥吉素对照品适量，加甲醇溶解制成对照品溶液；

（3）供试品溶液的制备：精密称取本发明药物，加甲醇，加热回流，提取液回流溶剂并浓缩至干，残渣加水溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤，正丁醇提取液回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解，摇匀，滤过，取滤液，即得供试品溶液；

（4）测定：分别精密量取上述供试品溶液、对照品溶液各5～20μL，注入高效液相色谱仪，进行检测。

本发明所述的药物优选采用如下方法检测：采用高效液相色谱法进行欧妥吉素的含量测定：

（1）色谱条件：采用CrosmosilC₁₈色谱柱；流动相：比例为45：55的甲醇-水；检测波长：245nm；柱温：22℃；流速：1.0mL·min^-1；进样量：10μL；

（2）对照品溶液制备：精密称取80℃干燥至恒重的欧妥吉素对照品适量，加甲醇溶解制成每1mL含0.2mg的对照品溶液；

（3）供试品溶液的制备：精密称取本发明药物10g，加甲醇40mL，加热回流4h，提取液回流溶剂并浓缩至干，残渣加水10mL溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，每次20mL，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤3次，每次15mL，正丁醇提取液回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解并转移至10mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取滤液，即得供试品溶液；

（4）测定：分别精密量取上述供试品溶液、对照品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，进行检测。

本发明所述的药物可用于制备治疗牛前胃弛缓、牛急性肠炎的药物。本发明药物具有升举牛脾胃中清阳之气，导滞消食的功效，可恢复患牛瘤胃功能，改善患牛临床症状，取得理想的治疗效果。

以下是发明人所做的相关实验。

实验一：本发明药物治疗牛前胃弛缓的临床分析

1资料与方法

1.1临床资料

在此次研究中，选取在2014年6月到2015年5月期间诊治的62头前胃弛缓患牛作为实验对象，所有患牛均确诊为牛前胃弛缓疾病。其中，公牛30头，母牛32头，全部患牛均产生消瘦贫血、精神沉郁和全身衰竭的临床症状。将其按照治疗方式的不同分为观察组31头和对照组31头，两组患牛病情程度及病程等临床资料比较差异均无统计学意义（P＞0.05），具备可比性。

1.2治疗方法

对照组患牛单纯采取西医治疗，即500～1000毫升的林格氏液、250毫升的5%碳酸氢钠、500毫升的5%糖盐水、20毫升的10%安钠咖、20毫升的1%新斯的明、1000毫升的10%葡萄糖、8～10克的康复头孢分组进行1次静脉滴注治疗，以此提升其代谢机能，增强其抗炎和抗毒能力。

观察组患牛采取本发明药物治疗，每次给予本发明药物10g治疗，每日2次，用温水灌服。

本发明药物的制法如下：药物处方：马蓼500g，黄开口500g。制备方法：取干燥的马蓼500g，黄开口500g，第一次加11000mL水浸泡1小时，煎煮1小时，第二次加4000mL，煎煮1小时，合并水煎液，滤过，滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉，加入辅料，混匀，制成散剂，制成1000g。

1.3疗效判定

显效：患牛消瘦贫血、全身衰竭等症状完全消失，正常排便和饮食能力完全恢复。

有效：患牛消瘦贫血、全身衰竭等症状缓解，正常排便和饮食能力改善。

无效：患牛症状和饮食排便能力均未改善，甚至加重。

治疗总有效率=（显效+有效）/总例数100%。

统计两组患牛痊愈时间。

1.4统计学方法

对所有数据资料采用SPSS17.0进行统计分析，计量资料以均数表示，计量资料的比较采用t检验，计数资料的统计分析采用χ²检验，P＜0.05为有统计学意义。

2结果

2.1对比两组患牛治疗总有效率

观察组治疗总有效率为96.77%，对照组治疗总有效率为48.39%，两组患牛比较差异有统计学意义（P＜0.05），具体见表1。

表1两组患牛治疗总有效率对比（n，%）

组别例数显效有效无效总有效率观察组31273196.77对照组31871648.39

2.2对比两组患牛平均痊愈时间

观察组平均痊愈时间为（4.39±2.34）天；对照组平均痊愈时间为（8.47±3.69）天。两组患牛比较差异有统计学意义（P＜0.05）。

3讨论与结论

综上所述，研究结果显示，与采取西医治疗的对照组相比，采取本发明药物治疗的观察组患牛，治疗效果好，且痊愈时间短。由此可见，牛前胃弛缓治疗中，本发明药物治疗的临床疗效确切。

实验二：本发明药物的质量检测方法研究

1仪器与试药

1.1仪器

高效液相色谱仪（Agilent110高效液相色谱仪及工作站，G1311Aquat泵，G1314紫外检测器）。

1.2试药

欧妥吉素（otogirin）对照品（中国药品生物制品检定研究院）；本发明中药组合物；中药材（康济连锁药店提供）；甲醇（色谱醇，上海生化工助剂厂）；其他试剂为分析纯。

2方法与结果

2.1处方

马蓼500g，黄开口500g。

2.2制备

取干燥的马蓼500g，黄开口500g，第一次加11000mL水浸泡1小时，煎煮1小时，第二次加4000mL，煎煮1小时，合并水煎液，滤过，滤液浓缩，干燥，粉碎，即得。

2.3欧妥吉素（otogirin）的含量测定

2.3.1HPLC色谱条件

采用CrosmosilC₁₈（250mm×4.6mm，5μm）色谱柱；流动相：比例为45：55的甲醇-水；检测波长：245nm；柱温：22℃；流速：1.0mL·min^-1；进样量：10μL；在该色谱条件下，对照品及样品色谱峰良好，无黄开口阴性对照对测定无干扰。

2.3.2对照品溶液的制备

精密称取80℃干燥至恒重的欧妥吉素对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.2mg的溶液。

2.3.3供试品溶液与阴性对照液的制备

精密称取本发明药物10g，加甲醇40mL，加热回流4h，提取液回流溶剂并浓缩至干，残渣加水10mL溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，每次20mL，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤3次，每次15mL，正丁醇提取液回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解并转移至10mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取滤液即得；另按处方比例制备不含黄开口的阴性对照品，同法制成阴性对照液。

2.3.4标准曲线的绘制

精密称取80℃干燥至恒重的欧妥吉素对照品适量，用甲醇制成10.4，20.8，41.6，83.2，166.4μgmL^-1系列浓度的溶液，分别精密量取上述5种浓度溶液各10μL，注入高效液相色谱仪进行测定。

以峰面积比值与浓度进行线性回归，得回归方程为：A=21.2764C-0.1392，r=0.9999。表明欧妥吉素在10.3～166.5μgmL^-1浓度范围内呈良好的线性关系。

2.3.5稳定性试验

精密吸取供试品溶液10μL，分别于0，1，2，4，8h进样，并计算欧妥吉素含量。结果8h内RSD为0.42%（n=5）。表明样品溶液在8h内稳定。

2.3.6重复性试验

按供试品溶液制备方法平行处理样品5份，依法测定欧妥吉素含量并计算。结果测得欧妥吉素平均含量为0.12mg·g^-1，RSD为1.3%。

2.3.7精密度实验

精密吸取欧妥吉素对照品溶液，重复进样5次，依法测定峰面积。结果RSD为0.21%（n=5）。表明精密度较好。

2.3.8回收率实验

精密称取已知欧妥吉素含量的同一批号的样品6份，按高、中、低浓度分别精密加入适量的欧妥吉素对照品溶液，按样品测定项下操作，依法测定，计算回收率。结果平均回收率为100.3%，RSD为0.41%（n=5）。

2.3.9样品含量测定

分别量取对照品溶液和供试品溶液适量，用微孔滤膜滤过，各进样10μL，按上述色谱条件测定3批样品，平行测定5次。按外标法以峰面积计算供试品溶液欧妥吉素的含量。本品含欧妥吉素应为标示含量的97%～102%，以每1g样品含欧妥吉素计，不得少于0.12mg。3批样品含量分别为100.2%（RSD=1.2%），101.3%（RSD=1.3%），100.6%（RSD=1.4%）。

具体实施方式

以下进一步描述本发明的具体技术方案，以便于本领域的技术人员进一步地理解本发明，而不构成对其权利的限制。

实施例1，一种治疗牛前胃弛缓的药物，该药物是由以下重量份的原料制成的：马蓼1重量份，黄开口2重量份。可以用于治疗牛前胃弛缓，还可以用于治疗牛急性肠炎。

实施例2，一种治疗牛前胃弛缓的药物，该药物是由以下重量份的原料制成的：马蓼2重量份，黄开口1重量份。

实施例3，一种治疗牛前胃弛缓的药物，该药物是由以下重量份的原料制成的：马蓼1重量份，黄开口1重量份。

实施例4，实施例1或2或3所述的治疗牛前胃弛缓的药物药物，该药物制备成散剂、颗粒剂。

实施例5，实施例1－3所述的治疗牛前胃弛缓的药物的制备方法：取马蓼、黄开口，混合，加入3～15倍量的水浸泡0.5～2小时，煎煮0.5～2小时，煎煮2～4次，每次0.5～2小时，提取液合并，滤过，滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉，加入辅料，混匀，制成散剂，即得。

实施例6，实施例1－3所述的治疗牛前胃弛缓的药物的制备方法：取干燥的马蓼、黄开口，第一次加11倍量水浸泡1小时，煎煮1小时，第二次加4倍量水煎煮1小时，合并水煎液，滤过，滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉，过筛，混匀，制成散剂或颗粒剂，即得。

实施例7，实施例6所述的制备方法制得的治疗牛前胃弛缓的药物药物的检测方法，采用高效液相色谱法进行欧妥吉素的含量测定：

（1）色谱条件：采用CrosmosilC₁₈色谱柱；流动相：比例为40～60：40～60的甲醇-水；检测波长：240～260nm；柱温：15～25℃；流速：0.5～1.5mL·min^-1；进样量：5～20μL；

（2）对照品溶液制备：精密称取干燥至恒重的欧妥吉素对照品适量，加甲醇溶解制成对照品溶液；

（3）供试品溶液的制备：精密称取本发明药物，加甲醇，加热回流，提取液回流溶剂并浓缩至干，残渣加水溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤，正丁醇提取液回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解，摇匀，滤过，取滤液，即得供试品溶液；

（4）测定：分别精密量取上述供试品溶液、对照品溶液各5～20μL，注入高效液相色谱仪，进行检测。

实施例8，实施例6所述的制备方法制得的治疗牛前胃弛缓的药物药物的检测方法，采用高效液相色谱法进行欧妥吉素的含量测定：

（1）色谱条件：采用CrosmosilC₁₈色谱柱；流动相：比例为45：55的甲醇-水；检测波长：245nm；柱温：22℃；流速：1.0mL·min^-1；进样量：10μL；

（2）对照品溶液制备：精密称取80℃干燥至恒重的欧妥吉素对照品适量，加甲醇溶解制成每1mL含0.2mg的对照品溶液；

（3）供试品溶液的制备：精密称取本发明药物10g，加甲醇40mL，加热回流4h，提取液回流溶剂并浓缩至干，残渣加水10mL溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，每次20mL，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤3次，每次15mL，正丁醇提取液回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解并转移至10mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取滤液，即得供试品溶液；

（4）测定：分别精密量取上述供试品溶液、对照品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，进行检测。

实施例9：一种治疗牛前胃弛缓的药物：

处方：马蓼50g，黄开口50g

制备方法：取干燥的马蓼50g、黄开口50g第一次加1100mL水浸泡1小时，煎煮1小时，第二次加400mL，煎煮1小时，合并水煎液，滤过，滤液浓缩，干燥，得本发明药物。

实施例10：治疗牛前胃弛缓的硬胶囊剂

药物处方：马蓼500g，黄开口500g。

制备方法：取干燥的马蓼500g，黄开口500g，第一次加11000mL水浸泡1小时，煎煮1小时，第二次加4000mL，煎煮1小时，合并水煎液，滤过，滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉，加入辅料，混匀，制成散剂，制成1000g。

采用高效液相色谱法对欧妥吉素（otogirin）进行含量测定：

（1）色谱条件：采用CrosmosilC₁₈色谱柱；流动相：比例为45：55的甲醇-水；检测波长：245nm；柱温：22℃；流速：1.0mL·min^-1；进样量：10μL；

（2）对照品溶液制备：精密称取80℃干燥至恒重的欧妥吉素对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.2mg的溶液；

（3）供试品溶液的制备：精密称取本发明药物10g，加甲醇40mL，加热回流4h，提取液回流溶剂并浓缩至干，残渣加水10mL溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，每次20mL，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤3次，每次15mL，正丁醇提取液回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解并转移至10mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取滤液，即得供试品溶液；

（4）测定：分别精密量取上述供试品溶液、对照品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，进行检测，检测结果为欧妥吉素的含量为0.1457mg/g。

此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。