兔血中超氧化物歧化酶的纯化制备方法

摘要

本发明属于生物蛋白技术领域，具体涉及兔血中超氧化物歧化酶的纯化制备方法。该方法主要包括如下工艺步骤：将兔血中加入抗凝剂，离心收集沉淀；将沉淀用生理盐水冲洗，离心，去除血红蛋白；去离子水等倍体积搅拌溶血；向溶血液中加入等倍体积95%预冷乙醇，0.2倍体积的预冷氯仿；搅拌，离心，取上清；上清加热到60℃，保温15分钟，然后速降至室温，离心，取上清；生理盐水中冷却，加入预冷丙酮，搅拌，取沉淀，用去离子水溶解；脱盐层析；沉淀用HAC-NaAC溶液清洗2次后用PBS溶液重溶，再通过0.45um的滤纸过滤；离子交换层析；超滤；SOD洗脱液在4℃的条件下离心，取上清，即为SOD原液。本发明的方法操作简单，提取的超氧化物歧化酶纯度高。