一种补肝肾安胎散剂及在制备防治马流产药物中的应用

摘要

本发明公开了一种补肝肾安胎散剂及在制备防治马流产药物中的应用，补肝肾安胎散剂组分按重量份比核计，党参15份-20份、黄芪20份-25份、白术20份-25份、灸甘草5份-8份、当归15份-18份、川芎5份-8份、白芍15份、熟地15份-18份、黄苓12份-15份、砂仁10份-15份、鲜生姜10份-15份、大枣10份-15份、柴胡10份-12份、麦冬10份-15份、茯苓15份-20份、陈皮5份-8份、川续断10份-15份，经称量、粉碎，用开水煎煮或开水冲烫，放凉，根据病情拌料饲喂或胃导管导入，经临床试验证明提供的补肝肾安胎散剂具有补气血和精血、调理脾胃、温肝补肾特性，对于保胎起到良好的作用。

说明书

技术领域

本发明属于兽医药物技术领域，具体说，本发明涉及以中草药为原料制备的马内服药物的技术领域，进一步确切的讲，本发明涉及一种补肝肾安胎散剂及在制备防治马流产药物中应用的技术领域。

背景技术

随着马产业发展，人们越来越倾向于选择对高性能马匹。马产业大省新疆也在积极努力的培育自己的高性能的伊犁马，但由于新疆冬季寒冷而漫长的特点，饲养环境，饲养方式造成流产率高，影响了培育伊犁马的进程。马匹保胎受到诊疗设备的限制不能准确判断病因，保胎所用的西药种类少，疗效单一，治疗效果不理想。

中草药保胎历史渊源沿用至今。安全有效是中药保胎的原则。由于中草药含有丰富的微量元素和维生素、氨基酸等多种营养物质，在治疗的过程中还有营养动物的作用。对于名贵马品种的繁殖与改良不仅防治流产，还可以改善因为饲料单一或不足造成的营养缺乏。通过中草药方剂毒性及生殖毒性的实验，对该中药方剂进行了科学的毒性评价。将安全有效的中草药方剂运用于临床是最总的目标，而临床用药实验是必经之路。

目前现代马产业正在我国处在刚刚发展阶段，缺乏预防马流产的方法和药物，尤其现在高赋加值马的繁育已经提到很高层次，马流产的预防及治疗已经是非常紧迫，而马流产是孕马在怀孕期受到多种因素影响而发生的一种经济损失严重的疾病，由于临床上缺乏有效的预防措施，导致每年都会有一定数量的孕马发生流产，亟需要加以解决和克服。据研究证明马发生马流产时机体免疫机能减弱，临床上也有报道用中草药治疗，但是由于缺乏发病原因和发病机理研究，临床上用药各种各样，效果不一，不对证则效果不显，缺乏针对马流产从根本防治的有效中草药方剂。可见，当前如何更好地依据中药原理，设计一种在制备防治马流产的低毒无残留、无毒副作用治标治本的中药药物具有现实意义和突显其作用。

发明内容

针对目前国内外治疗马流产药物的现状，本发明的目的旨在于提供一种补肝肾安胎散剂及在制备防治马流产药物中的应用，提供一个具有极其有效标本兼治、低毒无残留、多靶点、广效能的特性,具有健脾补肝肾、补气养血、固胎元特性，显著实现防治马流产的中草药方剂，同时具备制备简单，易于操作等特点，具有广泛的实用性。

本发明的解决方案是基于祖国中兽医学对马流产的发病原因及其发病机理的认识及防治原则，根据中兽医学传统有效防治马流产的理论和防治原则，参考现代药理研究成就，从祖国医药宝库中，根据健脾补肝肾、补气养血、固胎元法防治马流产，扶正固本法治急性虚证的“三证三法”的辨证原则，在原有的中兽医药处方基础上又经过多年的临床实践而总结出的配方，筛选出补气血和精血、调理脾胃、温肝补肾的天然中草药，经过多年临床反复试验，研制出一种对马流产见效快，标本兼治，低毒、无残留、无副作用的口服药物。其功效是补气血和精血，保证胎孕期间是冲任二脉气血充足，心肝脾肾气血充盈；调理脾胃，脾为后天之本，胃为五脏之母，脾胃功能正常，保证脾胃运化正常，保证气血生化有源；温肝补肾，是保证肝藏血、肾藏精功能正常，精血充盈。中草药保胎作用范围广，疗效持久，对母体的毒性小。对胎儿的毒副作用小。中草药中含有大量的营养物质，在防治疾病的同时对机体有一定的营养作用。中草药保胎可增强机体抵抗力，避免因抵抗力下降，而易感其他的致病微生物。。在近年经过数十例病马的使用效果极其显著。

具体地，本发明提供了一种用于制备防治马流产药物中应用的补肝肾安胎散剂，补肝肾安胎散剂组分按重量份比核计，党参15份-20份、黄芪20份-25份、白术20份-25份、灸甘草5份-8份、当归15份-18份、川芎5份-8份、白芍15份、熟地15份-18份、黄苓12份-15份、砂仁10份-15份、鲜生姜10份-15份、大枣10份-15份、柴胡10份-12份、麦冬10份-15份、茯苓15份-20份、陈皮5份-8份、川续断10份-15份。

进一步，本发明提供了一种用于制备防治马流产药物中应用的补肝肾安胎散剂的制备方法。将党参、黄芪、白术、灸甘草、当归、川芎、白芍、熟地、黄苓、砂仁、鲜生姜、大枣、柴胡、麦冬、茯苓、陈皮、川续断用粉碎机粉碎，把粉剂的中药置于容器内倒入相当中药体积3倍的水，浸泡1小时，先武火煮沸，再用文火煮30分钟并不断的搅拌，将药煮至糊状。冷却待用。

同时，本发明提供了用于防治马腺疫及脓肿的补肝肾安胎散剂的使用方法：选择好以党参、黄芪、白术、灸甘草、当归、川芎、白芍、熟地、黄苓、砂仁、鲜生姜、大枣、柴胡、麦冬、茯苓、陈皮、川续断为确定原料，经称量、粉碎，用开水煎煮或开水冲烫，放凉，根据病情拌料饲喂或胃导管导入。经过长期病马病例验证，本发明提供的用于制备防治防治马流产药物中应用效果显著，无毒、无副作用。

依据已有技术记载的吴鞠通指出“每殒胎五、六月者，责之中焦不能萌胎，宜平日常服小建中汤”，“下焦不足者，天根月窟膏，蒸动命门真火，上蒸脾阳，下固八脉，真精充足，自能固胎矣”。用温补中州脾胃来充填冲任二脉，以补后天养先天来保全胎元。充分说明马流产主要是饲养管理不完善，脾胃功能减弱，肝血肾精不足引起，另外由于天气寒冷，气候骤变，或马匹采食冰冷饲料或水，引发子宫急剧收缩而流产。本发明根据中医理论制定，选用中药党参、黄芪、白术、灸甘草、当归、川芎、白芍、熟地、黄苓、砂仁、鲜生姜、大枣、柴胡、麦冬、茯苓、陈皮、川续断多味中草药，经过采用粉碎经用开水煎煮或开水冲烫，放凉制备获得补肝肾安胎散剂，根据病情拌料饲喂或胃导管导入，具有健脾补肝肾、补气养血、固胎元特性的特性，用于预防和治疗马流产病应用中具有显著的技术效果。

基于中医药传统理论，本发明旨在利用天然中草药，制备的补肝肾安胎散剂为马流产提供有效治疗措施，无毒副作用，具有补气血和精血、调理脾胃、温肝补肾等特性，能够增强马机体抵抗力，无复发，成本低和方便给药的口服药。对于冬春季因饲料不足，质量低下，气候突变造成的应激性流产有疗效，针对新疆地区冬季漫长而寒冷，饲料不足，春季短促且气温多变造成的流产。通过实验将补肝肾安胎散剂与马匹的颗粒饲料混合经口给药，妊娠前后期均进行两个疗程的给药，每天与晚上进行饲喂，每个疗程给药五天。分别采集疗程前、第一疗程结束后和第二疗程结束的血液，从血液生理生化、免疫、内分泌几方面对补肝肾安胎散剂的毒性及保胎疗效进行研究。通过血液生化结果分析证明本发明提供的补肝肾安胎散剂对孕马的肝脏和肾脏没有毒性作用；通过血液生理、免疫细胞及因子、内分泌结果分析可知本发明提供的补肝肾安胎散剂在妊娠前期以抑制细胞免疫、补血为主；妊娠后期则以增强非特异性免疫、活血为主。本发明提供的补肝肾安胎散剂可以调节E2/P孕酮的比值达到保胎的效果。通过临床病例的治疗结果，证明本发明提供的补肝肾安胎散剂在临床应用中对于保胎起到良好的作用。

本发明提供的补肝肾安胎散剂在治疗马流产中散剂组成制备简单，纯中药组分，组成考究，科学合理，无毒副作用，使用方便，一般一个疗程即可痊愈，恶性马流产使用2-3疗程，疗效快，疗效好，药效稳定，技术效果显著。

通过实施本发明具体的发明内容，可以达到以下效果：

(1)本发明选用纯正天然中草药为原料，符合药政法规定。利用各味中草药配伍作用治疗马流产。制备的补肝肾安胎散剂具有补气血和精血、调理胃经、温肝补脾等特性，能够增强马机体抵抗力，无复发，成本低和方便给药的口服药。该药低毒无残留，对机体脏腑器官没有损害作用。应用本发明提供的补肝肾安胎散剂经过临床防治33匹纯血马，20匹怀孕4-5月的英纯血孕马进行两个疗程，每匹马每个疗程给药5天；怀孕9-11月的英纯血孕马同样进行两个疗程的给药，每匹马每个疗程给药5天。33匹马全部顺利产驹，而在往年同等饲养条件下，每年有10％左右流产率。在昭苏县饲养管理相似另外一个马场，流产率也到达10％左右。

(2)本发明提供的补肝肾安胎散剂在制备治疗马流产药物中应用，分别采集疗程前、第一疗程结束后和第二疗程结束的血液，从血液生理生化、免疫、内分泌几方面对补肝肾安胎散剂的毒性及保胎疗效进行研究。通过血液生化结果分析证明本发明提供的补肝肾安胎散剂对孕马的肝脏和肾脏没有毒性作用；通过血液生理、免疫细胞及因子、内分泌结果分析可知本发明提供的补肝肾安胎散剂在妊娠前期以抑制细胞免疫、补血为主；妊娠后期则以增强非特异性免疫、活血为主。本发明提供的补肝肾安胎散剂可以调节E2/P孕酮的比值达到保胎的效果。临床防治33匹纯血马，33匹马全部顺利产驹，没有发生流产。而在往年同等饲养条件下，每年有10％左右流产率。同年在昭苏县饲养管理相似另外一个马场，流产率也到达10％左右。证明本发明提供的补肝肾安胎散剂在临床应用中对于保胎起到良好的作用。

附图说明

图1显示为马血液生理指标变化图。

图2显示为马INF-r含量变化图。

图3显示为马IGF-1、P、E2含量变化图。

图4显示为马P、E2含量变化图。

图5显示为TP、ALB、CHO含量变化图。

具体实施方式

下面，举实施例说明本发明，但是，本发明并不限于下述的实施例。

采用的主要试剂材料及采用现有公知技术方法：马血清IGF-Ⅰ ELISA试剂盒(武汉华美)、马血清INF-r ELISA试剂盒(武汉华美)、马血清孕酮放射免疫法(北京华英生物技术研究所代检)、马血清雌激素放射免疫法(北京华英生物技术研究所代检)；马选用来自新疆伊犁某马场怀孕前中期的英国纯血母马20匹和新疆伊犁某马场怀孕后期的英国纯血母马13匹。

采用的主要设备仪器：全自动血细胞分析仪(深圳市普康电子有限公司)、DNM-9602酶标仪(北京普朗)、高速离心机(德国Hettich)、ST-T-160AC空气浴震培养箱(北京桑翌)、移液器(Eppendorf)、SUNO AB系列全自动生化分析仪(长春赛诺迈德医学技术有限公司)等。

本发明中选用的所有中草药等原辅料都为本领域熟知选用的，但不限制本发明的实施，另外，在下述的说明中，如无特别说明，本发明采用的马腺疫散剂组分、配比中都采用重量份比核计，这种份比配伍也是中药领域常见的方式。

实施例一：用于防治马流产的补肝肾安胎散剂的制备

本发明具体提供了一种用于制备防治马流产药物中应用的补肝肾安胎散剂，按重量份比核计，补肝肾安胎散剂含有党参15份-20份、黄芪20份-25份、白术20份-25份、灸甘草5份-8份、当归15份-18份、川芎5份-8份、白芍15份、熟地15份-18份、黄苓12份-15份、砂仁10份-15份、鲜生姜10份-15份、大枣10份-15份、柴胡10份-12份、麦冬10份-15份、茯苓15份-20份、陈皮5份-8份、川续断10份-15份。

进一步，本发明提供了一种用于制备防治马流产药物中应用的补肝肾安胎散剂的制备方法。选用将党参、黄芪、白术、灸甘草、当归、川芎、白芍、熟地、黄苓、砂仁、鲜生姜、大枣、柴胡、麦冬、茯苓、陈皮、川续断用粉碎机粉碎，把粉剂的中药置于容器内倒入相当中药体积3倍的水，浸泡1小时，先武火煮沸，再用文火煮30分钟并不断的搅拌，将药煮至糊状。冷却待用。

同时，本发明提供了用于防治马流产药的补肝肾安胎散剂的使用方法：选择好以党参、黄芪、白术、灸甘草、当归、川芎、白芍、熟地、黄苓、砂仁、鲜生姜、大枣、柴胡、麦冬、茯苓、陈皮、川续断为确定原料，经称量、粉碎，用开水煎煮或开水冲烫，放凉，根据病情拌料饲喂或胃导管导入。经过长期病马病例验证，本发明提供的用于制备防治马流产药物中应用效果显著，无毒、无副作用。

实施例二：用于防治马流产的补肝肾安胎散剂的制备

按重量份比核计，将采用中主药原料党参15份、黄芪20份、白术20份、灸甘草5份、当归15份、川芎5份、白芍15份、熟地15份、黄苓12份、砂仁10份、鲜生姜10份、大枣10份、柴胡10份、麦冬10份、茯苓15份、陈皮5份、川续断10份，精选去杂物，研磨细粉过40目后放入瓷锅中，加水扮成稀糊状，煎熬10分钟，期间不停搅，也可开水冲烫成稀糊状，放凉鼻胃管投服。1日1次，每天早上最好，7天为一疗程；应用制备的补肝肾安胎散剂具有补气血和精血、调理胃经、温肝补脾等特性，能够增强马机体抵抗力，无复发，成本低和方便给药，证明本发明提供的补肝肾安胎散剂在临床应用中对于保胎起到良好的作用。

实施例三：用于防治马流产的补肝肾安胎散剂的制备

按重量份比核计，将采用中主药原料党参20份、黄芪25份、白术25份、灸甘草8份、当归18份、川芎8份、白芍15份、熟地18份、黄苓15份、砂仁15份、鲜生姜15份、大枣15份、柴胡12份、麦冬15份、茯苓20份、陈皮8份、川续断15份，精选去杂物，研磨细粉过40目后放入瓷锅中，加水扮成稀糊状，煎熬10分钟，期间不停搅，也可开水冲烫成稀糊状，放凉鼻胃管投服。1日1次，每天早上最好，7天为一疗程；应用制备的补肝肾安胎散剂具有补气血和精血、调理胃经、温肝补脾等特性，能够增强马机体抵抗力，无复发，成本低和方便给药，证明本发明提供的补肝肾安胎散剂在临床应用中对于保胎起到良好的作用。

实施例四：用于防治马流产的补肝肾安胎散剂的制备

按重量份比核计，将采用中主药原料党参18份、黄芪22份、白术23份、灸甘草6份、当归17份、川芎6份、白芍15份、熟地16份、黄苓14份、砂仁12份、鲜生姜13份、大枣14份、柴胡11份、麦冬12份、茯苓17份、陈皮6份、川续断12份，精选去杂物，研磨细粉过40目后放入瓷锅中，加水扮成稀糊状，煎熬10分钟，期间不停搅，也可开水冲烫成稀糊状，放凉鼻胃管投服。1日1次，每天早上最好，7天为一疗程；应用制备的补肝肾安胎散剂具有补气血和精血、调理胃经、温肝补脾等特性，能够增强马机体抵抗力，无复发，成本低和方便给药，证明本发明提供的补肝肾安胎散剂在临床应用中对于保胎起到良好的作用。

实施例五：补肝肾安胎散剂用于制备防治马流产药物中的应用

1.用药方法

1.1.本实例中采用的实验复方和实验复方中药就是采用上述实施例一至实施例四提供的补肝肾安胎散剂。

在怀孕的中前期4-5月时，分别在4个月和5个月对母马进行中草药饲喂，每个疗程给药5天。每日晚上入圈后后进行喂药，第1天喂药前半小时、第一个疗程喂药结束后次日早晨及第二个疗程喂药结束后翌日早晨进行血液采集。将各个时间点采集加抗凝剂的血液慢慢的摇匀后，吸取一定量的血液置于全自动血细胞分析仪内测定相关因子。将采集不加抗凝剂的血液4℃过夜，3000r/min离心10min，吸取血清进行生化、IGF-1、INF-r和雌激素、孕酮的检测。将检测结果运用SPSS16.0分析软件进行差异显著性分析。

1.2后期给药

在怀孕的中后期9-10月时，分别在9个月和10个月对母马进行中草药饲喂，每个疗程给药5天。给药的时间点和血液的采集处理与前期给药的相同。

2.结果

2.1血液生化分析结果

表1：前中期给药生化结果

疗程前第一疗程第二疗程TP(g/L)56.67±2.435^a47.219±3.054^b57.108±4.98^abALB(g/L)36.086±1.79^Bb48.312±3.53^7a58.199±2.983^AaT.Bili(umol/L)3.66±0.105^a3.768±0.132^a3.525±0.107^aD.Bili(umol/L)0.964±0.042^Ca1.307±0.051^A1.059±0.064^BaCRE(umol/L)86.839±2.243^a89.996±1.411^a90.352±2.277^aBUN(mmol/L)6.665±0.189^a6.957±0.192^a6.935±0.168^aCHOL(mmol/L)3.027±0.247^bc3.957±0.356^a2.756±0.336^c

注：同行均值上标中，有相同字母表示差异不显著，P>0.05；大写字母不同表示差异极显著，P<0.01；不同小写字母表示差异显著，P<0.05。

由表1可知：第一治疗过程的总蛋白(TP)含量显著高于治疗前的含量(P<0.05)，第二治疗过程结束后的含量和治疗前相比变化不显著；第一治疗过程与第二治疗过程结果比较变化不明显，第一治疗过程总蛋白的含量下降未低于正常范围。在治疗程结束后白蛋白(ALB)的量均升高，第一治疗过程含量显著高于治疗前，第二治疗过程含量极显著高于治疗前，第一治疗过程和第二治疗过程间比较差异不显著。总胆红素(T.Bili)含量、肌酐(CRE)含量、尿素氮(BUN)含量在各个疗程间比较变化不明显(P>0.05)，所有治疗过程与治疗前比较变化也不明显(P>0.05)。直接胆红素含量在第一疗程结束后极显著高于疗程前和第二疗程(P<0.01)。胆固醇(CHOL)在第一疗程结束后含量显著升高，第二治疗过程结束后显著低于第一治疗过程。

表2：后期给药生化结果

疗程前第一疗程第二疗程TP(g/L)68.45±2.888^Ca79.6±3.947^Ba93.175±1.841^AALB(g/L)35.085±1.296^a32.207±2.335^a32.462±2.227^aT.Bil(umol/L)27.454±4.092^a27.075±4.718^a15.48±4.225^aD.Bil(umol/L)6.061±0.847^a5.446±0.573^a4.823±0.248^aCRE(umol/L)133.787±13.279^a116.566±11.733^a126.65±8.773^aBUN(mmol/L)4.961±0.471^a5.898±0.531^a6.583±0.843^aCHO(mmol/L)2.171±0.363^Ca2.456±0.2^Ba3.902±0.133^A

注：同行均值上标中，字母相同表示差异不显著，P>0.05；大写字母不同表示差异极显著，P<0.01；不同小写字母表示差异显著，P<0.05。

由表2可知：总蛋白(TP)含量在第一、二疗程结束后均升高，第二疗程极显著高于第一疗程和疗程前的含量(P<0.01)，第一疗程和疗程前无明显变化。白蛋白(ALB)的含量在各个疗程与疗程前变化不明显，各个疗程结束后的白蛋白变化不显著(P>0.05)。直接胆红素(D.Bili)和总胆红素(T.Bili)含量各组比较结果P>0.05。各个疗程组间尿素氮(BUN)和肌酐(CRE)的含量比较结果P>0.05。胆固醇(CHO)含量的第二疗程后比疗程前和第一疗程的含量极显著升高(P<0.01)。

2.2血液生理分析结果

表3：前中期给药生理结果

疗程前第一疗程第二疗程白细胞总(10⁹个/L)8.894±0.509^a8.688±0.441^a8.6±0.306^a淋巴细胞比例(％)49.945±3.687^a47.672±2.516^a46.258±2.012^a中间细胞比例(％)9.681±0.761^a12.6±1.684^a8.882±1.198^a粒细胞比例(％)43.025±3.724^a38.227±2.826^a44.858±2.878^a淋巴细胞(10⁹个/L)4.39±0.398^a4.264±0.238^a3.976±0.228^a中间细胞(10⁹个/L)0.93±0.097^a1.072±0.176^a0.77±0.15^a粒细胞数(10⁹个/L)3.933±0.397^a3.294±0.306^a3.851±0.288^a红细胞总(10¹²个/L)6.959±0.315^a7.388±0.362^a7.542±0.202^a血压积(％)35.438±1.794^a36.337±2.384^a37.905±0.921^a血红蛋白(g/L)135.3±4.058^a141.5±4.234^a137.7±3.01^a

注：同行均值上标中，有相同字母表示差异不显著，P>0.05；大写字母不同表示差异极显著，P<0.01；不同小写字母表示差异显著，P<0.05。

由表3可知：血液的各个生理指标第一和第二疗程和疗程前结果进行比较分析变化不明显(P>0.05)。通过分析均值化发现：经过两个疗程后，白细胞的数目减少；淋巴细胞的比率降低，总数减少；中间细胞比例在第一疗程上升，但第二疗程降低并低于疗程前，中间细胞总数变化与其相同；粒细胞比例在第一疗程结束后降低，第二疗程又升高且高过疗程前，粒细胞总数的变化与粒细胞比例变化相似，但所有疗程结束后，粒细胞总数低于疗程前的；血细胞压积和红细胞数目在疗程结束后都升高了；血红蛋白也呈上升趋势，但第一疗程的血红蛋白数高于第二疗程。

表4：后期给药生理结果

疗程前第一疗程第二疗程白细胞总数(10⁹个/L)9.44±0.746^a10.461±0.51^a10.16±0.481^a淋巴细胞比例(％)29.41±1.829^b24.776±1.362^Bc34.716±1.408^Aa中间细胞比例(％)11.8±1.204^Ab15.915±0.661^Aa5.04±0.352^B粒细胞比例(％)58.79±2.314^a59.284±1.479^a58.816±1.398^a淋巴细胞(10⁹个/L)2.72±0.159^a2.661±0.094B^a3.5±0.258^Aa中间细胞(10⁹个/L)1.08±0.087^Ba1.646±0.094^A0.65±0.143^Cb粒细胞数(10⁹个/L)5.011±0.268^Bb6.153±0.273^Aa5.866±0.238^a红细胞总(10¹²个/L)9.384±0.65^a8.817±0.239^a8.488±0.382^a血压积(％)53.79±4.249^a47.346±0.857^a42.883±1.9^a血红蛋白(g/L)151.4±14.422^a131.77±3.37^a139.5±5.566^a

注：同行均值上标中，有相同字母表示差异不显著，P>0.05；不同大写字母表示差异极显著，P<0.01；不同小写字母表示差异显著，P<0.05。

由表4可知：白细胞数目疗程前后差异比较不显著(P>0.05)，第一疗程白细胞数目增多，第二疗程白细胞总数较第一疗程减少，但较疗程前有轻微的增多。淋巴细胞比例在第一疗程显著降低(P<0.05)，在第二疗程极显著高于第一疗程(P<0.01)，显著高于疗程前(P<0.05)；淋巴细胞数在第一疗程略微减少(P>0.05)；第二疗程的淋巴细胞总数显著高于第一疗程的总数(P<0.05)，但和疗程前比较变化不明显(P>0.05)。第一疗程的中间细胞比例明显高于疗程前的(P<0.05)，第二疗程的中间细胞比例与疗程前及第一疗程的比例相比极显著低(P<0.01)；中间细胞总数变化趋势与中间细胞比例的相一致：第一疗程明显高于疗程前和第二疗程的(P<0.01)，第二疗程低于疗程前(P<0.05)。粒细胞比例在疗程前后差异不明显(P>0.05)，但粒细胞总数在第一疗程极显著多于疗程前(P<0.01)，第二疗程的粒细胞总数显著高于疗程前(P<0.05)，两个疗程后整体都高于疗程前的。红细胞总数、血细胞压积、血红蛋白的含量在所有疗程呈现下降趋势，但结果比较差异不显著(P>0.05)。

2.3细胞因子及激素分析结果

表5：前中期给药细胞因子和激素结果

疗程前第一疗程第二疗程孕酮(ng/ml)1.302±0.052^bc1.365±0.072^ac1.095±0.071^a雌激(pg/ml)74.829±9.387^bc70.853±7.332^ca103.13±8.297^aIGF-1(ng/ml)23.017±7.119^a14.771±6.407^a34.718±3.052^aINF-r(pg/ml)8.53±0.7^a7.663±0.554^a8.149±0.586^a

注：同行均值上标中，字母相同表示差异不显著，P>0.05；大写字母不同表示差异极显著，P<0.01；小写字母不同表示差异显著，P<0.05。

由表5可知：孕酮在第二疗程结束后有明显下降，第一疗程后孕酮的含量增多，但P>0.05。雌激素的含量在第二疗程明显升高(P<0.05)，在第一疗程呈降低趋势，但趋势不明显(P>0.05)。IGF-1和INF-r的含量在疗程前后变化不显著(P>0.05)，IGF-1在第一疗程有所降低，但在第二疗程又升高并高于疗程前的；INF-r在整体呈下降趋势，虽然，第二疗程有所升高并未高过疗程前的。

表6：后期给药细胞因子和激素分析结果

疗程前第一疗程第二疗程孕酮(ng/ml)0.62±0.065^a0.876±0.128^Aa0.525±0.11^Ba

雌激素(pg/ml)357.88±37.969^a189.5±54.196^bd134.97±50.614^cdIGF-1(ng/ml)76.241±13.62^a103.09±14.462^a118.28±19.772^aINF-r(pg/ml)19.101±1.004^a19.824±0.998^a17.608±0.525^a

注：同行均值上标中，字母相同表示差异不显著，P>0.05；大写字母不同表示差异极显著，P<0.01；小写字母不同表示差异显著，P<0.05。

由表6可知：在第一个治疗过程孕酮有所升高，但P>0.05。第二个治疗过程孕酮含量下降并低于疗程前，第二治疗过程和第一治疗过程后比较孕酮含量变化显著(P<0.05)。雌激素在第一明显降低(P<0.05)，第二治疗过程下降更明显(P<0.01)。IGF-1在第一和第二疗程含量均上升，INF-r在第一疗程略微升高，但第二疗程降低并低于疗程前的。

3.结论

安全有效是中药保胎的原则。实验复方保胎中药具有养肝肾、补血等功能，通过血清的生化检测，对肝功能及肾脏功能进行检查。妊娠期孕马给药后，进行血清检查，评价实验复方中药对孕马的肝和肾的毒性作用。对妊娠孕马给药前后，血液白细胞、红细胞、血压积及血红蛋白等血常规的检测、雌激素和孕酮及相关细胞因子水平的检测，研究实验复方的保胎机制。实验复方中药在妊娠前期用药后，母体血清中白蛋白的含量呈现直线升高的趋势，但总蛋白的含量没有明显的升高。在母体没有造成失水过多的疾病的前提下，血液中白蛋白含量升高，说明肝脏蛋白合成代谢增强，有利于母体内难溶于体液的分子量较小的有机物和无机盐离子的运输。直接胆红素含量在第一疗程急剧升高，但第二疗程又降至疗程前，这可能是机体自我调节的生理过程。肌酐和尿素氮是检查肾脏功能的重要指标，根据实验数据的分析得到本实验复方对妊娠前期的孕马的肾脏没有毒性作用，通过白蛋白含量及其作用机制，可知中药方剂可以起到保护肾脏的功能。胆固醇含量变化发现第一疗程含量急剧升高并超过正常范围，第二疗程含量又下降并未低于正常范围，这可能因为中药对机体的调节作用造成的。妊娠后期检查肝功和肾功均正常，总蛋白及胆固醇含量的升高均有利于缓解妊娠后期胎儿营养需要的压力。

血液生理结果显示如下，结合参见附图1至5：妊娠后期给药结果分析发现淋巴细胞比例整体呈现显著升高，第一疗程明显降低可能与机体的自我调节有关；中间细胞数显著减少，粒细胞数和淋巴细胞数升高较明显，但粒细胞在白细胞所占比例变化不大，中间细胞比例下降及淋巴细胞比率增多，说明淋巴细胞较粒细胞增多更明显。造成机体妊娠期的免疫水平不同，中药的调节作用不同。红细胞总数、血压积、血红蛋白含量疗程前后比较差异不显著。由分析结果可知中药方剂对E2和P的作用较显著。妊娠前期所有治疗结束后E2显著增多，P显著降低；E2/P的比值升高可以提高胚胎着床率；妊娠后期所有疗程结束后E2和P都降低，但E2/P的比值变化不大，有利于维持后期妊娠。复方中药对IGF-1和INF-r的作用效果不显著。INF-r在妊娠前后期治疗结束后均呈现减少；IGF-1在妊娠前后期疗程结束后均呈现一定幅度的升高，复方中药对孕马的细胞因子可能有一定作用，实验的疗程较短，未能达到显著作用。实验复方通过提高淋巴细胞数量及粒细胞数量使得白细胞数目增多，增强孕马免疫力，可以提高由于环境的变化和营养不良引起的免疫力降低对机体带来的危害。该复方可以升高妊娠前期孕马的E2/P的比值升高，这与前期胚胎着床的激素要求相一致；妊娠后期的激素的比值变化不大，但E2的含量在用药后显著减少。E2能使子宫收缩运动增强，使子宫内膜增生、宫颈口松弛、分泌粘液，有促进分娩的作用，尤其在妊娠后期。该复方降低E2的含量，抑制子宫的收缩活性，起到保胎作用，提高妊娠率。实验复方对孕马的妊娠前后期均有保胎作用。

实施例六：补肝肾安胎散剂在防治马流产中的应用

1.病案介绍

2014年5月，昭苏县伊犁马繁育中心的一匹英纯血母马，年龄12岁，怀孕10个月。膘情中等，有异嗜行为，疑似微量元素缺乏。有流产记录，妊娠前期多次表现腹痛。

2.临床检查

精神沉郁，食欲减退，频频表现举尾动作，喜卧，外阴部有大量的分泌物流出，臀部肌肉松弛，阴门微张。

3.治疗与结果

中草药方剂制成粉剂煎煮后与颗粒饲料混合，每日下午进行喂药，连续五天。用药第三天后，精神好转，食欲增加，翘尾动作减少，阴道外部的分泌物流量减少，阴门关闭。五天给药结束，阴门无分泌物。超出预产期7天，产下健康马驹。

4.疗效分析

采集该病例马匹给药前、给药三天后、给药五天后的血液进行血液生理，血清中蛋白、激素及细胞因子水平检测及肝功和肾功进行检查。

由附图1提供生理结果柱状图可知：在用药三天和五天后孕马的白细胞数降低，淋巴细胞数量和粒细胞数量减少，中间细胞数增多，但淋巴细胞比例与中间细胞比例增加，粒细胞比例下降。白细胞总数减少，粒细胞比例和数量均减少、淋巴细胞数量减少，降低机体的炎症反应，有利于维持妊娠。中间细胞比例和数量升高，使机体的非特异性免疫增强，增强抵抗力。红细胞总数、血压积和血红蛋白量减少，血液被稀释，血流速度发生改变，改善妊娠结局。

参见附图2、3和4可知，E2含量减少，P含量增多，P能够降低子宫收缩活性，而E2能够让子宫内膜产生增生、松弛宫颈口、增加宫颈粘液的分泌量、质地变稀处于分娩状态，所以升高的P可以降低子宫的收缩活性，抑制胎儿被排出体外。INF-r含量降低，IFG-Ⅰ含量升高，使胎儿在母体内能够得到充足的营养成分，有利于生长发育，改善妊娠结局及胎儿的生长。

由附图5可知：一疗程后血清中的白蛋白的量增多，但总蛋白的量没有明显变化；说明肝脏蛋白合成代谢增强，有利于母体内难溶性小分子有机物和无极离子的运输。胆固醇的含量在用药三天后升高，但用药五天后又降低。总蛋白及胆固醇含量的升高均有利于缓解妊娠后期胎儿营养需要的压力。

实施例七：补肝肾安胎散剂在防治马流产中的应用

观察对象：

将上述药物临床防治马流产进行验证共收集完整的33例，进行统计分析，疗效满意。其中孕期在4-5个月的马20匹，9-10月13匹，共价使用药物4次，一天一副，每个疗程5天。没有发生流产病例。

治疗方法：

将上述实施例一至实施例四提供的中草药方剂用粉碎机粉碎，把粉剂的中药置于容器内倒入相当中药体积3倍的水，浸泡1小时，先武火煮沸，再用文火煮30分钟并不断的搅拌，将药煮至糊状制备获得补肝肾安胎散剂。冷却待用。

糊状药物与料拌一起，每日晚上入圈后进行饲喂。

临床验证结果：

1.疗效标准：

有效：通过中前期和中后期各两个疗程，共计四个疗程用药，没有发生流产，具有良好预防作用；对于临床出现流产症状的能很好的治疗，孕马完成妊娠过程，正常分娩。

无效：孕马流产。

2.结果：通过上述系列实施例及经过上述临床验证得出如下结论

33匹英纯血孕马通过中前期和中后期各两个疗程，共计四个疗程用药，没有发生流产，具有良好预防作用；对于临床出现流产症状的能很好的治疗，孕马完成妊娠过程，正常分娩，有效率近100％。证明本发明提供的补肝肾安胎散剂在临床应用中对于保胎起到良好的作用。