涉及血管破坏剂和靶向缺氧的药剂的组合疗法

摘要

本发明提供了用于治疗患者中之增殖性疾病的方法。所述方法包括向有此需要的患者施用以下药剂：a)血管破坏剂和(b)至少一种缺氧靶向剂。优选的组合是BNC105与帕唑帕尼以及BNC105与硼替佐米。

说明书

提交日期

本申请与在2012年6月1日提交的澳大利亚专利申请no.2012902291 相关，并且要求所述澳大利亚专利申请的优先权，其全部内容通过引用并 入本文。

发明领域

本发明一般地涉及新的化学组合以及其在增殖性疾病并且特别是癌 症治疗中使用的方法。

发明背景

通常用化学疗法和/或放射疗法来治疗癌症。尽管这些疗法经常有效 地破坏大量的肿瘤细胞，但是其往往留下许多对该治疗有抗性的肿瘤细 胞。这些抗性细胞可增殖以形成接下来对治疗有抗性的新肿瘤。化疗药物 的已知组合的使用已导致产生多重抗药性(multidrug resistant，′MDR′) 的肿瘤细胞。

增殖性疾病(例如癌症)的模式是多因素的。例如，在过去的四十年 的研究已导致实现了细胞毒剂(或抗增殖剂)，其包括干扰微管装配的抗 代谢剂、能够交联DNA的烷化剂、能够通过阻断DNA复制来干扰DNA 烷化之基于铂的药剂、抗肿瘤抗生素剂、拓扑异构酶抑制剂等。在这样的 疾病的治疗中，可将具有不同机制的药物相组合(例如，组合疗法)以具 有包括有效治疗MDR肿瘤细胞在内的有益效果和最小化的副作用(例如 不期望的细胞毒性)。然而这样的困难是，并非所有已知的抗增殖剂在组 合中提供有用或有益的效果，因而许多实验室的研究目前集中于开发新的 并且有用的抗增殖组合伙伴(combination partner)。

发明内容

本发明人已经发现，血管破坏剂(vascular disrupting agent，VDA) (特别是BNC105)与靶向缺氧(hypoxia)的药剂(特别是帕唑帕尼 (Pazopanib)或硼替佐米(Bortezomib))联合起来使用提供了增殖性疾 病治疗的高效组合。BNC105与帕唑帕尼以及BNC105与硼替佐米的组合 确实已经示出了协同效应。

因此，本发明提供了用于治疗增殖性疾病的药物组合，其包含：(a) VDA，和(b)至少一种其他的靶向缺氧的药剂。

本发明还提供了用于治疗增殖性疾病的方法，其包括向有此需要的患 者施用以下药剂的步骤：(a)VDA，和(b)至少一种其他的靶向缺氧的 药剂。

本发明还提供了以下药剂在制备用于增殖性疾病治疗之药物中的用 途：(a)VDA，和(b)至少一种其他的靶向缺氧的药剂。

本发明还提供了(a)VDA在制备用于增殖性疾病治疗之药物中的用 途，其与(b)至少一种其他的靶向缺氧的药剂组合使用。

本发明还提供了(b)至少一种其他的靶向缺氧的药剂在制备用于增 殖性疾病治疗之药物中的用途，其与(a)VDA组合使用。

本发明还提供了药物组合物，其包含(a)VDA，和(b)至少一种 其他的靶向缺氧的药剂。

认为使用包含：(a)VDA，与(b)至少一种其他的靶向缺氧的药剂 的组合来治疗增殖性疾病的效果要好于单独使用(a)或(b)所达到的效 果。换言之，认为本组合具有累加或协同效应。

附图说明

图1涉及BNC105与肿瘤缺氧靶向剂组合的治疗原理。

图2使用BNC105P、帕唑帕尼或BNC105P+帕唑帕尼处理的具有 RENCA肾肿瘤之小鼠的存活。

图3使用BNC105P、帕唑帕尼或BNC105P+帕唑帕尼处理的具有 RENCA肾肿瘤之小鼠的右肾重量(mg)±SEM。

具体实施方式

除非上下文另有要求，否则贯穿本说明书和随后的权利要求书的词语 “包括(comprise)”以及变体例如“包含”和“含有”将被理解为意指包括所 述的整体或步骤或者整体或步骤的组，但不排除任何其他整体或步骤或者 整体或步骤的组。

本说明书中对任何现有出版物(或从其中得出的信息)或对任何已知 的内容的引用不是并且不应该被视为承认或认可或以任何形式暗示该现 有出版物(或从其中得出的信息)或已知的内容形成本说明书所尽力涉及 之领域的公知常识的部分。

组合伙伴(a)：血管破坏剂(VDA)

本文所使用的术语“血管破坏剂”是指能够破坏脉管系统 (vasculature)，特别是肿瘤脉管系统的任何以及所有化合物。

合适的VDA的实例包括：

合成的化合物

ABT-751(E7010，Abbott)

MPC-6827(Azixa^TM，Myriad Pharmaceuticals)

CYT997(Cytopia)

MN-029(Denibulin，MediciNova/Angiogene)

EPC2407(EpiCept)

天然产物衍生物

考布他汀(Combretastatin)

CA4(Zybrestat^TM，OXiGENE)

Oxi4503(OXiGENE)

AVE8062(AC7700，Sanofi Aventis)

NPI-2358(Nereus Pharmaceuticals)

TZT1027(Soblidotin)。

VDA在癌症治疗中是重要的，主要因为其能够选择性地阻断血液流 经肿瘤。

VDA干扰微管完整性，导致内衬于肿瘤血管之内皮细胞的细胞骨架 发生变化。结果，这些通常扁平的细胞变得更圆，并且失去其细胞与细胞 的接触。这些事件导致肿瘤血管的变窄以及流经血管的血液的最终阻塞。 与这些药剂相关的肿瘤选择性起因于肿瘤脉管系统比正常脉管系统更弱 并且更易于萎陷(collapse)的事实。然而，许多与VDA相关的剂量限制 性毒性是由于健康组织中血流的减少。

在一个实施方案中，VDA作用于秋水仙碱结合位点并且基于环形 (annulated)呋喃(例如苯并呋喃、呋喃并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮等)、苯 并噻吩和吲哚结构骨架，例如在以下中公开的那些：US 7,456,214、US 7,429,681、US 7,071,190、US 6,849,656、US 5,886,025、US 6,162,930、 US 6,350,777、US 5,340,062、WO 06/084338、WO 02/060872、WO 07/087684和WO 08/070908。

在一个实施方案中，VDA选自WO 06/084338、WO 07/087684或者 WO 08/070908中公开的药剂。

在一个实施方案中，VDA选自式(I)化合物及其盐

其中：

X表示O、S、SO、SO₂、Se、SeO、SeO₂或者NR，其中R选自H、 O、任选地经取代的酰基、任选地经取代的烯基、任选地经取代的烷基、 任选地经取代的芳基、任选地经取代的环烯基、任选地经取代的环烷基、 任选地经取代的杂芳基、任选地经取代的杂环基和任选地经取代的磺酰 基；

R^1A和R^1B各自独立地表示H、羧基、氰基、二卤代甲氧基、卤素、 羟基、硝基、五卤代乙基、磷酰基氨基、膦酰基、氧膦基、磺基、三卤代 乙烯基、三卤代甲硫基、三卤代甲氧基、三卤代甲基、任选地经取代的酰 基、任选地经取代的酰氨基、任选地经取代的酰亚氨基、任选地经取代的 酰亚氨基氧基、任选地经取代的酰氧基、任选地经取代的芳烷基、任选地 经取代的芳基烷氧基、任选地经取代的烯基、任选地经取代的烯氧基、任 选地经取代的烷氧基、任选地经取代的烷基、任选地经取代的炔基、任选 地经取代的炔氧基、任选地经取代的氨基、任选地经取代的氨酰基、任选 地经取代的氨基酰氧基、任选地经取代的氨基磺酰基、任选地经取代的氨 基硫代酰基、任选地经取代的芳基、任选地经取代的芳氧基、任选地经取 代的环烯基、任选地经取代的环烷基、任选地经取代的杂芳基、任选地经 取代的杂环基、任选地经取代的氧酰基、任选地经取代的氧基酰氨基、任 选地经取代的氧基酰氧基、任选地经取代的氧基酰亚氨基、任选地经取代 的氧基亚磺酰氨基、任选地经取代的氧基磺酰氨基、任选地经取代的氧基 硫代酰基、任选地经取代的氧基硫代酰氧基、任选地经取代的亚磺酰基、 任选地经取代的亚磺酰氨基、任选地经取代的磺酰基、任选地经取代的磺 酰氨基、任选地经取代的硫基、任选地经取代的硫代酰基、任选地经取代 的硫代酰氨基，或者R^1A和R^1B一起形成任选地经取代的芳基、任选地经 取代的杂环基、任选地经取代的杂芳基、任选地经取代的环烷基或任选地 经取代的环烯基；

R^1C表示C_1-3烷氧基、C_1-3烷基硫基、C_1-3烷基氨基或C_1-3二烷基氨基；

R^1D表示羟基或氨基；

L表示C＝O、O、S、SO、SO₂、Se、SeO、SeO₂、C＝NZ′或NR′， 其中Z′是H、任选地经取代的烷基、任选地经取代的芳基或任选地经取 代的氨基；并且其中R′选自H、O、任选地经取代的酰基、任选地经取代 的烯基、任选地经取代的烷基、任选地经取代的芳基、任选地经取代的环 烯基、任选地经取代的环烷基、任选地经取代的杂芳基、任选地经取代的 杂环基或任选地经取代的磺酰基；

R^2A-R^2E各自独立地表示H、羧基、氰基、二卤代甲氧基、卤素、羟 基、硝基、五卤代乙基、磷酰基氨基、膦酰基、氧膦基、磺基、三卤代乙 烯基、三卤代甲硫基、三卤代甲氧基、三卤代甲基、任选地经取代的酰基、 任选地经取代的酰氨基、任选地经取代的酰亚氨基、任选地经取代的酰亚 氨基氧基、任选地经取代的酰氧基、任选地经取代的芳烷基、任选地经取 代的芳基烷氧基、任选地经取代的烯基、任选地经取代的烯氧基、任选地 经取代的烷氧基、任选地经取代的烷基、任选地经取代的炔基、任选地经 取代的炔氧基、任选地经取代的氨基、任选地经取代的氨酰基、任选地经 取代的氨基酰氧基、任选地经取代的氨基磺酰基、任选地经取代的氨基硫 代酰基、任选地经取代的芳基、任选地经取代的芳氧基、任选地经取代的 环烯基、任选地经取代的环烷基、任选地经取代的杂芳基、任选地经取代 的杂环基、任选地经取代的氧酰基、任选地经取代的氧基酰氨基、任选地 经取代的氧基酰亚氨基、任选地经取代的氧基酰氧基、任选地经取代的氧 基亚磺酰氨基、任选地经取代的氧基磺酰氨基、任选地经取代的氧基硫代 酰基、任选地经取代的氧基硫代酰氧基、任选地经取代的亚磺酰基、任选 地经取代的亚磺酰氨基、任选地经取代的磺酰基、任选地经取代的磺酰氨 基、任选地经取代的硫基、任选地经取代的硫代酰基、任选地经取代的硫 代酰氨基或任选地经取代的硫代酰氧基；或者R^2A和R^2B、R^2B和R^2C、 R^2C和R^2D以及R^2D和R^2E中的任何一起形成任选地经取代的芳基、任选 地经取代的杂环基、任选地经取代的杂芳基、任选地经取代的环烷基或任 选地经取代的环烯基；以及

Q表示H、CN、卤素、三烷基甲硅烷基、任选地经取代的烷基、任 选地经取代的烯基、任选地经取代的炔基、任选地经取代的酰基、任选地 经取代的氧酰基、任选地经取代的酰氨基、任选地经取代的氨基酰氨基、 OR″、SR″或NR″R″，其中每个R″独立地表示H、任选地经取代的烷基、 任选地经取代的烯基、任选地经取代的炔基、任选地经取代的芳基、任选 地经取代的杂芳基、任选地经取代的杂环基、任选地经取代的酰基和任选 地经取代的氧酰基，或者NR″′NR″′，其中每个R″′独立地表示H、任选 地经取代的烷基、任选地经取代的烯基、任选地经取代的炔基、任选地经 取代的芳基和任选地经取代的杂芳基。

在一些实施方案中，R^1A-R^1B和R^2A-R^2E独立地选自以下基团：

烷基基团，优选甲基和乙基；

经取代的烷基基团，优选1-羟乙基、1-硫代乙基、甲氧基亚氨基甲基、 乙氧基亚氨基甲基、1-(羟基亚氨基)乙基、1-(羟基亚氨基)丙基、1-肼基乙 基、1-肼基丙基、羟基亚氨基甲基、2-氧代丙基、2-氧代丁基、3-氧代丁 基、3-氧代戊基、硝基甲基、1-硝基甲基和2-硝基乙基；

酰基基团，优选甲酰基、乙酰基、丙酰基、苯甲酰基(任选地被甲基、 甲氧基、卤素、硝基、三氟甲基或氰基取代)；

烷氧基基团，优选甲氧基和乙氧基；

氧酰基(oxyacyl)基团，优选甲氧羰基、乙氧羰基、丙氧羰基、丁 氧羰基、异丁氧羰基；

酰氧基基团，优选乙酰氧基和丙酰氧基(propioxy)；

经取代的芳烷基基团，优选1-羟基苄基，以及1硫代苄基；

亚磺酰基基团，优选甲亚磺酰基、乙亚磺酰基、苯亚磺酰基(任选地 被甲基、甲氧基、卤素、硝基、三氟甲烷或氰基取代)，甲氧基亚磺酰基、 乙氧基亚磺酰基；

磺酰基基团，优选甲磺酰基、乙磺酰基、苯磺酰基(任选被甲基、甲 氧基、卤素、硝基、三氟甲烷或氰基取代)、甲氧基碳(methoxycarbo)、 三氟甲烷；

氧基酰氨基基团，优选甲氧基羰基酰氨基，以及乙氧基羰基酰氨基；

氧基硫代酰基基团，优选甲氧基硫代羰基和乙氧基硫代羰基；

硫代酰氧基基团，优选硫羰乙酰氧基(thionoacetoxy)和硫羰丙酰氧 基；

亚磺酰氨基基团，优选甲亚磺酰氨基、乙亚磺酰氨基，以及苯亚磺酰 氨基(任选地被甲基、甲氧基、卤素、硝基、三氟甲烷或氰基取代)；

氨基基团；

经取代的氨基基团，优选L-缬氨酸、D-缬氨酸、L-丙氨酸、D-丙氨 酸、天冬氨酸和丙氨酰丝氨酸(alanylserine)的残基、N-甲氨基以及N， N′-二甲氨基；

磺酰氨基基团，优选甲磺酰氨基、乙磺酰氨基和苯磺酰氨基(任选地 被甲基、甲氧基、卤素、硝基、三氟甲烷或氰基取代)；

氧基亚磺酰氨基基团，优选甲氧基亚磺酰氨基和乙氧基亚磺酰氨基；

氧基磺酰氨基基团，优选甲氧基磺酰氨基和乙氧基磺酰氨基；

任选地经取代的烯基基团，优选地，1-丙烯基、乙烯基、硝基乙烯基、 氰基乙烯基或者三氟乙烯基和苯乙烯基(任选地被甲基、甲氧基、卤素、 硝基、三氟甲烷或氰基取代)；

炔基基团，优选1-丙炔基、乙炔基或三甲基甲硅烷基乙炔基。

在一个实施方案中，R^2D、R^2C和R^2B是甲氧基并且L是羰基基团 (C＝O)。

因此，在该实施方案中，本发明的VDA由式(Ia)表示

其中：

X表示O、S、SO、SO₂、Se、SeO、SeO₂或者NR，其中R选自H、 O、任选地经取代的酰基、任选地经取代的烯基、任选地经取代的烷基、 任选地经取代的芳基、任选地经取代的环烯基、任选地经取代的环烷基、 任选地经取代的杂芳基、任选地经取代的杂环基和任选地经取代的磺酰 基；

R^1A和R^1B各自独立地表示H、羧基、氰基、二卤代甲氧基、卤素、 羟基、硝基、五卤代乙基、磷酰基氨基、膦酰基、氧膦基、磺基、三卤代 乙烯基、三卤代甲硫基、三卤代甲氧基、三卤代甲基、任选地经取代的酰 基、任选地经取代的酰氨基、任选地经取代的酰亚氨基、任选地经取代的 酰亚氨基氧基、任选地经取代的酰氧基、任选地经取代的芳烷基、任选地 经取代的芳基烷氧基、任选地经取代的烯基、任选地经取代的烯氧基、任 选地经取代的烷氧基、任选地经取代的烷基、任选地经取代的炔基、任选 地经取代的炔氧基、任选地经取代的氨基、任选地经取代的氨酰基、任选 地经取代的氨基酰氧基、任选地经取代的氨基磺酰基、任选地经取代的氨 基硫代酰基、任选地经取代的芳基、任选地经取代的芳氧基、任选地经取 代的环烯基、任选地经取代的环烷基、任选地经取代的杂芳基、任选地经 取代的杂环基、任选地经取代的氧酰基、任选地经取代的氧基酰氨基、任 选地经取代的氧基酰氧基、任选地经取代的氧基酰亚氨基、任选地经取代 的氧基亚磺酰氨基、任选地经取代的氧基磺酰氨基、任选地经取代的氧基 硫代酰基、任选地经取代的氧基硫代酰氧基、任选地经取代的亚磺酰基、 任选地经取代的亚磺酰氨基、任选地经取代的磺酰基、任选地经取代的磺 酰氨基、任选地经取代的硫基、任选地经取代的硫代酰基、任选地经取代 的硫代酰氨基，或者R^1A和R^1B一起形成任选地经取代的芳基、任选地经 取代的杂环基、任选地经取代的杂芳基、任选地经取代的环烷基或任选地 经取代的环烯基；

R^1C表示C_1-3烷氧基、C_1-3烷基硫基、C_1-3烷基氨基或C_1-3二烷基氨基；

R^1D表示羟基或氨基；

R^2A和R^2E独立地表示H、羧基、氰基、二卤代甲氧基、卤素、羟基、 硝基、五卤代乙基、磷酰基氨基、膦酰基、氧膦基、磺基、三卤代乙烯基、 三卤代甲硫基、三卤代甲氧基、三卤代甲基、任选地经取代的酰基、任选 地经取代的酰氨基、任选地经取代的酰亚氨基、任选地经取代的酰亚氨基 氧基、任选地经取代的酰氧基、任选地经取代的芳烷基、任选地经取代的 芳基烷氧基、任选地经取代的烯基、任选地经取代的烯氧基、任选地经取 代的烷氧基、任选地经取代的烷基、任选地经取代的炔基、任选地经取代 的炔氧基、任选地经取代的氨基、任选地经取代的氨酰基、任选地经取代 的氨基酰氧基、任选地经取代的氨基磺酰基、任选地经取代的氨基硫代酰 基、任选地经取代的芳基、任选地经取代的芳氧基、任选地经取代的环烯 基、任选地经取代的环烷基、任选地经取代的杂芳基、任选地经取代的杂 环基、任选地经取代的氧酰基、任选地经取代的氧基酰氨基、任选地经取 代的氧基酰氧基、任选地经取代的氧基酰亚氨基、任选地经取代的氧基亚 磺酰氨基、任选地经取代的氧基磺酰氨基、任选地经取代的氧基硫代酰基、 任选地经取代的氧基硫代酰氧基、任选地经取代的亚磺酰基、任选地经取 代的亚磺酰氨基、任选地经取代的磺酰基、任选地经取代的磺酰氨基、任 选地经取代的硫基、任选地经取代的硫代酰基、任选地经取代的硫代酰氨 基或任选地经取代的硫代酰氧基；以及

Q表示H、CN、卤素、三烷基甲硅烷基、任选地经取代的烷基、任 选地经取代的烯基、任选地经取代的炔基、任选地经取代的酰基、任选地 经取代的氧酰基、任选地经取代的酰氨基、任选地经取代的氨基酰氨基、 OR″、SR″或NR″R″，其中每个R″独立地表示H、任选地经取代的烷基、 任选地经取代的烯基、任选地经取代炔基、任选地经取代的芳基、任选地 经取代的杂芳基、任选地经取代的杂环基、任选地经取代的酰基和任选地 经取代的氧酰基，或者NR″′NR″′，其中每个R″′独立地表示H、任选地 经取代的烷基、任选地经取代的烯基、任选地经取代的炔基、任选地经取 代的芳基和任选地经取代的杂芳基。

在另一个实施方案中，R^1A、R^1B、R^2A和R^2E表示H，并且R^1C表示 C_1-3烷氧基。

因此，在该实施方案中，本发明的VDA由式(Ib)表示

其中：

X表示O、S、SO、SO₂、Se、SeO、SeO₂或者NR，其中R选自H、 O、任选地经取代的酰基、任选地经取代的烯基、任选地经取代的烷基、 任选地经取代的芳基、任选地经取代的环烯基、任选地经取代的环烷基、 任选地经取代的杂芳基、任选地经取代的杂环基和任选地经取代的磺酰 基；

R^1C表示C_1-3烷氧基；

R^1D表示羟基或氨基；

Q表示H、CN、卤素、三烷基甲硅烷基、任选地经取代的烷基、任 选地经取代的烯基、任选地经取代的炔基、任选地经取代的酰基、任选地 经取代的氧酰基、任选地经取代的酰氨基、任选地经取代的氨基酰氨基、 OR″、SR″或NR″R″，其中每个R″独立地表示H、任选地经取代的烷基、 任选地经取代的烯基、任选地经取代的炔基、任选地经取代的芳基、任选 地经取代的杂芳基、任选地经取代的酰基和任选地经取代的氧酰基，或者 NR″′NR″′，其中每个R″′独立地表示H、任选地经取代的烷基、任选地 经取代的烯基、任选地经取代的炔基、任选地经取代的芳基和任选地经取 代的杂芳基。

在一个优选的实施方案中，R^1C表示甲氧基。

对于由式I、Ia和Ib表示的化合物，X优选地选自O、S和NR。更 优选地X是O或NR并且最优选地X是O。

因此，在另一个实施方案中，VDA由式II表示

其中：

R^1A和R^1B各自独立地表示H、羧基、氰基、二卤代甲氧基、卤素、 羟基、硝基、五卤代乙基、磷酰基氨基、膦酰基、氧膦基、磺基、三卤代 乙烯基、三卤代甲硫基、三卤代甲氧基、三卤代甲基、任选地经取代的酰 基、任选地经取代的酰氨基、任选地经取代的酰亚氨基、任选地经取代的 酰亚氨基氧基、任选地经取代的酰氧基、任选地经取代的芳烷基、任选地 经取代的芳基烷氧基、任选地经取代的烯基、任选地经取代的烯氧基、任 选地经取代的烷氧基、任选地经取代的烷基、任选地经取代的炔基、任选 地经取代的炔氧基、任选地经取代的氨基、任选地经取代的氨酰基、任选 地经取代的氨基酰氧基、任选地经取代的氨基磺酰基、任选地经取代的氨 基硫代酰基、任选地经取代的芳基、任选地经取代的芳氧基、任选地经取 代的环烯基、任选地经取代的环烷基、任选地经取代的杂芳基、任选地经 取代的杂环基、任选地经取代的氧酰基、任选地经取代的氧基酰氨基、任 选地经取代的氧基酰氧基、任选地经取代的氧基酰亚氨基、任选地经取代 的氧基亚磺酰氨基、任选地经取代的氧基磺酰氨基、任选地经取代的氧基 硫代酰基、任选地经取代的氧基硫代酰氧基、任选地经取代的亚磺酰基、 任选地经取代的亚磺酰氨基、任选地经取代的磺酰基、任选地经取代的磺 酰氨基、任选地经取代的硫基、任选地经取代的硫代酰基、任选地经取代 的硫代酰氨基，或者R^1A和R^1B一起形成任选地经取代的芳基、任选地经 取代的杂环基、任选地经取代的杂芳基、任选地经取代的环烷基或任选地 经取代的环烯基；

R^1C表示C_1-3烷氧基、C_1-3烷基硫基、C_1-3烷基氨基或C_1-3二烷基氨基；

R^1D表示羟基或氨基；

L表示C＝O、O、S、SO、SO₂、Se、SeO、SeO₂、C＝NZ′或NR′， 其中Z′是H、任选地经取代的烷基、任选地经取代的芳基或任选地经取 代的氨基；并且其中R′选自H、O、任选地经取代的酰基、任选地经取代 的烯基、任选地经取代的烷基、任选地经取代的芳基、任选地经取代的环 烯基、任选地经取代的环烷基、任选地经取代的杂芳基、任选地经取代的 杂环基或任选地经取代的磺酰基；

R^2A-R^2E各自独立地表示H、羧基、氰基、二卤代甲氧基、卤素、羟 基、硝基、五卤代乙基、磷酰基氨基、膦酰基、氧膦基、磺基、三卤代乙 烯基、三卤代甲硫基、三卤代甲氧基、三卤代甲基、任选地经取代的酰基、 任选地经取代的酰氨基、任选地经取代的酰亚氨基、任选地经取代的酰亚 氨基氧基、任选地经取代的酰氧基、任选地经取代的芳烷基、任选地经取 代的芳基烷氧基、任选地经取代的烯基、任选地经取代的烯氧基、任选地 经取代的烷氧基、任选地经取代的烷基、任选地经取代的炔基、任选地经 取代的炔氧基、任选地经取代的氨基、任选地经取代的氨酰基、任选地经 取代的氨基酰氧基、任选地经取代的氨基磺酰基、任选地经取代的氨基硫 代酰基、任选地经取代的芳基、任选地经取代的芳氧基、任选地经取代的 环烯基、任选地经取代的环烷基、任选地经取代的杂芳基、任选地经取代 的杂环基、任选地经取代的氧酰基、任选地经取代的氧基酰氨基、任选地 经取代的氧基酰亚氨基、任选地经取代的氧基酰氧基、任选地经取代的氧 基亚磺酰氨基、任选地经取代的氧基磺酰氨基、任选地经取代的氧基硫代 酰基、任选地经取代的氧基硫代酰氧基、任选地经取代的亚磺酰基、任选 地经取代的亚磺酰氨基、任选地经取代的磺酰基、任选地经取代的磺酰氨 基、任选地经取代的硫基、任选地经取代的硫代酰基、任选地经取代的硫 代酰氨基或任选地经取代的硫代酰氧基，或者R^2A和R^2B、R^2B和R^2C、 R^2C和R^2D以及R^2D和R^2E中的任何一起形成任选地经取代的芳基、任选 地经取代的杂环基、任选地经取代的杂芳基、任选地经取代的环烷基或任 选地经取代的环烯基；以及

Q表示H、CN、卤素、三烷基甲硅烷基、任选地经取代的烷基、任 选地经取代的烯基、任选地经取代的炔基、任选地经取代的酰基、任选地 经取代的氧酰基、任选地经取代的酰氨基、任选地经取代的氨基酰氨基、 OR″、SR″或NR″R″，其中每个R″独立地表示H、任选地经取代的烷基、 任选地经取代的烯基、任选地经取代的炔基、任选地经取代的杂环基、任 选地经取代的芳基、任选地经取代的杂芳基、任选地经取代的酰基和任选 地经取代的氧酰基，或者NR″′NR″′，其中每个R″′独立地表示H、任选 地经取代的烷基、任选地经取代的烯基、任选地经取代的炔基、任选地经 取代的芳基和任选地经取代的杂芳基。

在该实施方案中，优选的是，L为羰基基团(C＝O)。此外，优选地 R^2D、R^2C或R^2B的至少一个表示羟基或C_1-3烷氧基基团。更优选地，当 X＝O时，L是羰基基团且R^2D、R^2C和R^2B表示甲氧基。甚至更优选地， 当X＝O时，L是羰基基团，R^2D、R^2C和R^2B表示甲氧基且R^1A、R^1B、R^2A、 R^2E是H。

此外，对于式(I)、(Ia)、(Ib)和(II)的化合物，优选的是Q表示H、 CN、任选地经取代的C_2-4炔基、任选地经取代的C_2-6烯基、任选地经取 代的C_1-4烷基、羟基、任选地经取代的氧酰基、NR″R″、SR″(其中每个 R″独立地为H、任选地经取代的C_1-4烷基、任选地经取代的杂环基、任 选地经取代的杂芳基)、NR″′NR″′(其中每个R″′独立地为H、C_1-3烷 基)、任选地经取代的酰氨基，或者卤素。

在一些实施方案中，Q独立地选自以下基团：

H；

CN；

卤素，优选Br或Cl；

烷基基团，优选甲基、乙基、丙基、丁基；

经取代的烷基基团，优选氨基、氧基酰氨基烷基和氧基磺酰氨基烷 基；

任选地经取代的烯基，优选乙烯、2-烷基乙烯基、2-氧酰基乙烯基、 2-氨酰基乙烯基；

任选地经取代的炔基，优选乙炔基、2-烷基乙炔基；

任选地经取代的氧酰基；

OR"，优选羟基、甲氧基、乙氧基；

NR″R″，优选NH₂，烷基氨基、二烷基氨基、杂芳基氨基、氨基烷 基氨基、羟基烷基氨基、烷氧基烷基氨基、氧酰基烷基氨基、氧酰基氨 基烷基氨基、胍基烷基氨基；

SR"，优选烷基硫基、氨基烷基硫基、杂芳基硫基、氨基烷基硫基、 羟基烷基硫基、烷氧基烷基硫基、氧酰基烷基硫基、氧酰基氨基烷基硫 基、胍基烷基硫基；

肼。

化学定义

“烷基”是指单价烷基基团，其可以是直链或支链的并且优选地具有1 至10个碳原子或者更优选为1至6个碳原子，并且甚至更优选为1至3 个碳原子。这样的烷基基团的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正 丁基、异丁基、正己基等。

“亚烷基”是指二价烷基基团，优选地具有1至10个碳原子并且更优 选为1至6个碳原子，并且甚至更优选为1至3个碳原子。这样的亚烷基 基团的实例包括亚甲基(-CH₂-)、亚乙基(-CH₂CH₂-)，以及亚丙基异构 体(例如，-CH₂CH₂CH₂-和CH(CH₃)CH₂-)等。

“芳基”是指不饱和的芳族碳环基团，其具有单环(例如苯基)或者多 重稠环(例如萘基或蒽基)，优选地具有6至14个碳原子。芳基基团的实 例包括苯基、萘基等。

“亚芳基”是指二价芳基基团，其中所述芳基基团如上所述。

“芳氧基”是指基团芳基-O-，其中所述芳基基团如上所述。

“芳烷基”是指-亚烷基-芳基基团，优选地在亚烷基部分具有1至10 个碳原子并且在芳基部分具有6至10个碳原子。这样的芳烷基基团由苄 基、苯乙基等示例。

“芳基烷氧基”是指基团芳烷基-O-，其中所述芳烷基基团如上所述。 这样的芳基烷氧基基团由苄氧基等示例。

“烷氧基”是指基团烷基-O-，其中所述烷基基团如上所述。实例包括， 甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、 正戊氧基、正己氧基、1，2-二甲基丁氧基等。

“烯基”是指单价烯基基团，其可以是直链或支链的并且优选地具有2 至10个碳原子，更优选为2至6个碳原子并且具有至少1个，优选为1 至2个碳碳双键。实例包括乙烯(-CH＝CH₂)、正丙烯(-CH₂CH＝CH₂)、 异丙烯(-C(CH₃)＝CH₂)、丁-2-烯基(-CH₂CH＝CHCH₃)等。

“烯氧基”是指基团烯基-O-，其中所述烯基基团如上所述。

“亚烯基(Alkenylene)”是指二价烯基基团，优选地具有2至8个碳 原子并且更优选为2至6个碳原子。实例包括亚乙烯基(-CH＝CH-)和 亚丙烯基异构体(例如，-CH₂CH＝CH-和-C(CH₃)＝CH-)等。

“炔基”是指炔基基团，优选地具有2至10个碳原子，更优选为2至 6个碳原子并且具有至少1个，优选为1至2个碳碳三键。炔基基团的实 例包括乙炔基(-C≡CH)、炔丙基(-CH₂C≡CH)、戊-2-炔基 (-CH₂C≡CCH₂-CH₃)等。

“炔氧基”是指基团炔基-O-，其中所述炔基基团如上所述。

“亚炔基”是指二价炔基基团，其优选地具有2至8个碳原子并且更优 选为2至6个碳原子。实例包括亚乙炔基(-C≡C-)、亚丙炔基(-CH₂-C≡C-) 等。

“酰基”是指基团H-C(O)-、烷基-C(O)-、环烷基-C(O)-、芳基-C(O)-、 杂芳基-C(O)-和杂环基-C(O)-，其中烷基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环 基如本文所述。

“氧酰基”是指基团HOC(O)-、烷基-OC(O)-、环烷基-OC(O)-、芳基 -OC(O)-、杂芳基-OC(O)-和杂环基-OC(O)-，其中烷基、环烷基、芳基、 杂芳基和杂环基如本文所述。

“氨基”是指基团-NR＊R＊，其中每个R＊独立地为氢、烷基、环烷基、 芳基、杂芳基和杂环基并且其中烷基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环基各 自如本文所述。

“氨酰基”是指基团-C(O)NR＊R＊，其中每个R＊独立地为氢、烷基、 环烷基、芳基、杂芳基和杂环基并且其中烷基、环烷基、芳基、杂芳基和 杂环基各自如本文所述。

“氨基酰氨基”是指基团-NR＊C(O)NR＊R＊，其中每个R＊独立地为氢、 烷基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环基并且其中烷基、环烷基、芳基、杂 芳基和杂环基各自如本文所述。

“酰氨基”是指基团-NR＊C(O)R＊，其中每个R＊独立地为氢、烷基、 环烷基、芳基、杂芳基和杂环基并且其中烷基、环烷基、芳基、杂芳基和 杂环基各自如本文所述。

“酰氧基”是指基团-OC(O)-烷基、-OC(O)-芳基、-C(O)O-杂芳基和 -C(O)O-杂环基，其中烷基、芳基、杂芳基和杂环基如本文所述。

“氨基酰氧基”是指基团-OC(O)NR＊-烷基、-OC(O)NR＊-芳基、 -OC(O)NR＊-杂芳基和-OC(O)NR＊-杂环基，其中R＊独立地为氢、烷基、 环烷基、芳基、杂芳基和杂环基并且其中烷基、环烷基、芳基、杂芳基和 杂环基各自如本文所述。

“氧基酰氨基”是指基团-NR＊C(O)O-烷基、-NR＊C(O)O-芳基、 -NR＊C(O)O-杂芳基和NR＊C(O)O-杂环基，其中R＊独立地为氢、烷基、 环烷基、芳基、杂芳基和杂环基并且其中烷基、环烷基、芳基、杂芳基和 杂环基各自如本文所述。

“氧基酰氧基”是指基团-OC(O)O-烷基、-O-C(O)O-芳基、-OC(O)O- 杂芳基和-OC(O)O-杂环基，其中烷基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环基 如本文所述。

“酰亚氨基”是指基团-C(NR＊)-R＊，其中每个R＊独立地为氢、烷基、 环烷基、芳基、杂芳基和杂环基并且其中烷基、环烷基、芳基、杂芳基和 杂环基各自如本文所述。

“酰亚氨基氧基”是指基团-O-C(NR＊)-R＊，其中每个R＊独立地为氢、 烷基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环基并且其中烷基、环烷基、芳基、杂 芳基和杂环基各自如本文所述。

“氧基酰亚氨基”是指基团-C(NR＊)-OR＊，其中每个R＊独立地为氢、 烷基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环基，并且其中烷基、环烷基、芳基、 杂芳基和杂环基各自如本文所述。

“环烷基”是指环状烷基基团，其具有单环或多重稠环，优选地并入3 至8个碳原子。这样的环烷基基团包括，通过举例的方式，单环结构例如 环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环辛基等，或者多环结构例如金刚烷 基等。

“环烯基”是指环状烯基基团，其具有单环和至少一个内部不饱和点， 优选地并入4至8个碳原子。合适的环烯基基团的实例包括，例如，环丁 -2-烯基、环戊-3-烯基、环己-4-烯基、环辛-3-烯基等。

“卤”或“卤素”是指氟、氯、溴和碘。

“杂芳基”是指单价芳族杂环基团，其满足芳香性的Hückel标准(即， 包含4n+2π个电子)并且优选地在环内具有2至10个碳原子和1至4个 选自的氧、氮、硒和硫的杂原子(并且包括硫、硒和氮的氧化物)。这种 杂芳基基团可具有单环(例如吡啶基、吡咯基或其N-氧化物或者呋喃基) 或者多重稠环(例如，中氮茚基(indolizinyl)、苯并咪唑基、香豆素基 (coumarinyl)、喹啉基(quinolinyl)、异喹啉基或苯并噻吩基)。

“杂环基”是指单价饱和的或不饱和的基团，其具有单环或多重稠环， 优选在环内有1至8个碳原子和1至4个选自的氮、硫、氧、硒或磷的杂 原子。最优选的杂原子是氮。

杂环基和杂芳基基团的实例包括但不限于唑、吡咯、咪唑、吡唑、 吡啶、吡嗪、嘧啶、哒嗪、中氮茚(indolizine)、异吲哚、吲哚、吲唑、 嘌呤、喹嗪、异喹啉、喹啉、酞嗪(phthalazine)、萘基吡啶、喹喔啉、 喹唑啉、噌啉、蝶啶、咔唑、咔啉、菲啶、吖啶、菲咯啉、异噻唑、吩嗪、 异唑、异噻唑、吩嗪、吩噻嗪、咪唑烷、咪唑啉、哌啶、哌嗪、二氢 吲哚、苯邻二甲酰亚胺、1，2，3，4-四氢异喹啉、4，5，6，7-四氢苯并[b]噻吩、 噻唑、噻二唑、二唑、三唑(oxatriazole)、四唑、噻唑烷、噻吩、苯 并[b]噻吩、吗啉代(morpholino)、哌啶基、吡咯烷、四氢呋喃基、三唑 等。

“亚杂芳基”是指二价杂芳基基团，其中所述杂芳基基团如上所述。

“亚杂环基”是指二价杂环基基团，其中所述杂环基基团如上所述。

“硫代”是指基团H-S-、烷基-S-、环烷基-S-、芳基-S-、杂芳基-S-和 杂环基-S-，其中烷基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环基如本文所述。

“硫代酰基”是指基团H-C(S)-、烷基-C(S)-、环烷基-C(S)-、芳基-C(S)-、 杂芳基-C(S)-和杂环基-C(S)-，其中烷基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环 基如本文所述。

“氧基硫代酰基”是指基团HO-C(S)-、烷基O-C(S)-、环烷基O-C(S)-、 芳基O-C(S)-、杂芳基O-C(S)-和杂环基O-C(S)-，其中烷基、环烷基、芳 基、杂芳基和杂环基如本文所述。

“氧基硫代酰氧基”是指基团HO-C(S)-O-、烷基O-C(S)-O-、环烷基 O-C(S)-O-、芳基O-C(S)-O-、杂芳基O-C(S)-O-和杂环基O-C(S)-O-，其 中烷基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环基如本文所述。

“磷酰基氨基”是指基团-NR＊-P(O)(R＊＊)(OR＊＊＊)，其中R＊表示H、 烷基、环烷基、烯基、或芳基，R＊＊表示OR＊＊＊或者是羟基或氨基并且 R＊＊＊是烷基、环烷基、芳基或芳烷基，其中烷基、氨基、烯基、芳基、 环烷基和芳烷基如本文所述。

“硫代酰氧基”是指基团H-C(S)-O-、烷基-C(S)-O-、环烷基-C(S)-O-、 芳基-C(S)-O-、杂芳基-C(S)-O-和杂环基-C(S)-O-，其中烷基、环烷基、 芳基、杂芳基和杂环基如本文所述。

“亚磺酰基”是指基团H-S(O)-、烷基-S(O)-、环烷基-S(O)-、芳基-S(O)-、 杂芳基-S(O)-和杂环基-S(O)-，其中烷基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环 基如本文所述。

“磺酰基”是指基团H-S(O)₂-、烷基-S(O)₂-、环烷基-S(O)₂-、芳基 -S(O)₂-、杂芳基-S(O)₂-和杂环基-S(O)₂-，其中烷基、环烷基、芳基、杂芳 基和杂环基如本文所述。

“亚磺酰氨基”是指基团H-S(O)-NR＊-、烷基-S(O)-NR＊-、环烷基 -S(O)-NR＊-、芳基-S(O)-NR＊-、杂芳基-S(O)-NR＊-和杂环基-S(O)-NR＊-， 其中R＊独立地为氢、烷基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环基并且其中烷 基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环基各自如本文所述。

“磺酰氨基”是指基团H-S(O)₂-NR＊-、烷基-S(O)₂-NR＊-、环烷基 -S(O)₂-NR＊-、芳基-S(O)₂-NR＊-、杂芳基-S(O)₂-NR＊-和杂环基-S(O)₂-NR＊-， 其中R＊独立地为氢、烷基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环基并且其中烷 基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环基各自如本文所述。

“氧基亚磺酰氨基”是指基团HO-S(O)-NR＊-、烷基O-S(O)-NR＊-、环 烷基O-S(O)-NR＊-、芳基O-S(O)-NR＊-、杂芳基O-S(O)-NR＊-和杂环基 O-S(O)-NR＊-，其中R＊独立地为氢、烷基、环烷基、芳基、杂芳基和杂 环基并且其中烷基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环基各自如本文所述。

“氧基磺酰氨基”是指基团HO-S(O)₂-NR＊-、烷基O-S(O)₂-NR＊-、环 烷基O-S(O)₂-NR＊-、芳基O-S(O)₂-NR＊-、杂芳基O-S(O)₂-NR＊-和杂环基 O-S(O)₂-NR＊-，其中R＊独立地为氢、烷基、环烷基、芳基、杂芳基和杂 环基并且其中烷基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环基各自如本文所述。

“氨基硫代酰基”是指基团R＊R＊N-C(S)-，其中每个R＊独立地为氢、 烷基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环基并且其中烷基、环烷基、芳基、杂 芳基和杂环基各自如本文所述。

“硫代酰氨基”是指基团H-C(S)-NR＊-、烷基-C(S)-NR＊-、环烷基 -C(S)-NR＊-、芳基-C(S)-NR＊-、杂芳基-C(S)-NR＊-和杂环基-C(S)-NR＊-， 其中每个R＊独立地为氢、烷基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环基并且其 中烷基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环基各自如本文所述。

“氨基亚磺酰基”是指基团R＊R＊N-S(O)-，其中每个R＊独立地为氢、 烷基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环基并且其中烷基、环烷基、芳基、杂 芳基和杂环基各自如本文所述。

“氨基磺酰基”是指基团R＊R＊N-S(O)₂-，其中每个R＊独立地为氢、 烷基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环基并且其中烷基、环烷基、芳基、杂 芳基和杂环基各自如本文所述。

在本说明书中，“任选地经取代的”是指基团可以被或者可以不被选自 以下的一个或更多个基团进一步取代或稠合(以便形成稠多环基团)：羟 基、酰基、烷基、烷氧基、烯基、烯氧基、炔基、炔氧基、氨基、氨酰基、 硫代、芳烷基、芳基烷氧基、芳基、芳氧基、酰氨基、氰基、卤素、硝基、 磺基、膦酰基、磷酰基氨基、氧膦基、杂芳基、杂芳氧基、杂环基、杂环 氧基、氧酰基、肟、肟醚、腙、-NHC(NH)NH₂、氧基酰氨基、氧基磺酰 氨基、氨基酰氧基、三卤代甲基、三烷基甲硅烷基、五氟乙基、三氟甲氧 基、二氟甲氧基、三氟甲硫基、三氟乙烯基、一烷基氨基和二烷基氨基、 一(经取代的烷基)氨基和二(经取代的烷基)氨基、一芳基氨基和二芳 基氨基、一杂芳基氨基和二杂芳基氨基、一杂环基氨基和二杂环基氨基， 以及具有选自烷基、芳基、杂芳基和杂环基等之不同取代基的不对称二经 取代的胺类。

任选地经取代的氨基基团还可包括氨基酸和肽残基。

可通过已知方法来制备式I、Ia、Ib或者II的VDA，所述方法包括 在WO 02/060872和WO 07/087684中公开的那些，其通过引用并入本文。

在另一个优选的实施方案中，用于本组合疗法的VDA是式(III)的化 合物或其盐、溶剂化物或前药

可通过在PCT/AU2007/000101(WO 07/087684)中描述的合成方法 来制备式(III)的化合物(2-甲基-7-羟基-3-(3，4，5-三甲氧基苯甲酰基)-6-甲 氧基苯并呋喃)。

已观察到式I、Ia、Ib、II或III的化合物是有效的微管蛋白聚合抑 制剂(tubulin polymerisation inhibitor，TPI)。式I、Ia、Ib、II和III的 化合物的一个重要方面是特定的C-6和C-7取代基与C-2Q-基团(尤其 是C-2甲基)一起的组合，其相比于其他结构上相关的TPI化合物显示 出更高的效力和选择性。当用VDA攻击时，这些化合物中的选择性不是 简单的依赖于肿瘤脉管系统对萎陷的倾向，而是依赖于VDA区分肿瘤内 皮细胞与正常内皮细胞的能力。见于健康组织中的正常内皮细胞处于“休 眠”状态而肿瘤内皮细胞处于“活化”状态。大多数VDA区别不了这两种 状态，例如，考布他汀A4(CA4)对休眠和活化的内皮细胞是同样有效 的。然而，式I、Ia、Ib、II以及特别是III的化合物示出相对于正常内 皮细胞(休眠)对肿瘤内皮细胞(活化)的选择性。

可以理解的是，本发明的VDA和式I、Ia、Ib、II或III的化合物可 作为其可药用盐向对象施用。合适的可药用盐包括但不限于可药用的无机 酸的盐，所述无机酸例如盐酸、硫酸、磷酸、硝酸、碳酸、硼酸、氨基磺 酸和氢溴酸，或者可药用的有机酸的盐，所述有机酸例如乙酸、丙酸、丁 酸、酒石酸、马来酸、羟基马来酸、富马酸、马来酸、柠檬酸、乳酸、粘 酸、葡糖酸、苯甲酸、琥珀酸、草酸、苯乙酸、甲磺酸、甲苯磺酸、苯磺 酸、水杨酸对氨基苯磺酸(salicyclic sulphanilic)、天冬氨酸、谷氨酸、 依地酸(edetic)、硬脂酸、棕榈酸、油酸、月桂酸、泛酸、鞣酸、抗坏血 酸和戊酸。

碱式盐包括但不限于，与可药用的阳离子形成的那些，所述阳离子例 如钠离子、钾离子、锂离子、钙离子、镁离子、铵离子和烷基铵离子。特 别地，本发明在其范围内包括阳离子的盐，例如钠盐或钾盐，或磷酸基团 的烷基酯(例如甲基、乙基)。

还可理解的是，作为本发明VDA的前药的任何化合物或者式I、Ia、 Ib、II和III的化合物也在本发明的范围和精神中。术语“前药”以其最广 泛的含义使用并且涵盖在体内转化为本发明的化合物(例如，式I、Ia、 Ib、II和III的化合物)的那些衍生物。本领域技术人员可很容易地想到 这样的衍生物，并且包括，例如这样的化合物：其中游离羟基(例如在 C-7位或R^1D)转化为酯，例如乙酸酯或磷酸酯，或者其中游离氨基(例 如在C-7位或R^1D)转化为酰胺(例如，α-氨基酸酰胺)。酯化(例如， 酰化)化合物的方法是本领域公知的并且可包括在合适的催化剂或碱的存 在下，用适当的羧酸、酸酐或氯化物处理化合物。特别优选的前药是磷酸 二钠酯(disodium phosphate ester)。本发明的化合物的磷酸二钠酯(特 别是式III化合物的C-7磷酸二钠酯)可有助于增加化合物的溶解性。例 如，这将可使得化合物在良性载剂(像盐水)中递送。可根据在Pettit，G. R.等，Anticancer Drug Des.，1995，10，299.中描述的方法来制备磷酸二钠 酯。通常描述前药(及其制备)的另一些文献包括：Design of Prodrugs，1985， H.Bundgaard(Elsevier)；The Practice of Medicinal Chemistry，1996， Camille G.Wermuth等，Chapter 31(Academic Press)；和A Textbook of  Drug Design and Development，1991，Bundgaard等，第5章，(Harwood  Academic Publishers)。

式I、Ia、Ib、II和III的化合物(或者其盐或前药)可以是作为游 离化合物或作为溶剂化物(例如，水合物)的结晶形式并且认为这两种形 式均在本发明的范围内。溶剂化的方法通常是本领域中已知的。

组合伙伴(b)：缺氧靶向剂

肿瘤中的缺氧诱导导致包括CXCL12、MMP-9、Hif1a、VEGFA、 p-mTOR、PERK、p-eIF2α、GLUT1在内的许多分子和其他缺氧激活剂 的上调。

因此，抑制或靶向由肿瘤缺氧上调的一个或更多个分子的任何药剂均 由本文所使用的“缺氧靶向剂”的含义所涵盖。

合适的缺氧靶向剂优选地选自盐酸瑞他霉素(Retaspimycin HCl)、 格尔德霉素(Geldanamycin)衍生物、Sunitib、帕唑帕尼、地磷莫司 (Ridaforolimus)、硼替佐米、2-去氧葡萄糖、氯尼达明(Lonidamine)、 伊马替尼(Imatinib)、与或不与Chk1抑制剂一起的TH-302、PR-104、 CXCR4-SDF-1靶向药剂、BMS-936564和替拉扎明(Tirapazamine)。

任何缺氧靶向组合伙伴的适应性经常依赖于递送的方式，然而，特别 优选的药剂是帕唑帕尼和硼替佐米。药剂的优选组合是BNC105与帕唑帕 尼以及BNC105与硼替佐米。通常BNC105将以磷酸盐的形式使用。

增殖性疾病

本文所用术语“增殖性疾病”广义地涵盖任何肿瘤性疾病，所述肿瘤性 疾病包括潜在的恶性(癌前期的)或恶性(癌的)的那些。因此，该术语 涵盖肿瘤的治疗。

因此，术语“肿瘤”通常用于定义任何恶性癌或癌前期细胞生长，并且 可包括白血病和癌，例如黑素瘤、结肠癌、肺癌、卵巢癌、皮肤癌、乳腺 癌、胰腺癌、咽癌、脑癌、前列腺癌、CNS和肾癌以及其他癌症。

在一个优选的实施方案中，组合可用于治疗肿瘤，特别是以下肿瘤： 乳腺癌、脑胶质母细胞瘤、结肠腺癌、肺癌、卵巢腺癌、胰腺癌、前列腺 癌、肾细胞腺癌和咽鳞状细胞癌。

在一个优选的方面，本发明提供了(a)和(b)的组合用于治疗肾癌， 特别是转移的肾细胞癌。

(a)和(b)的组合

不希望受限于任何特定的理论，推测VDA在高度血管化的肿瘤中诱 导缺氧，其可驱动血管发生/存活应答。组合伙伴(b)靶向多种缺氧应答 途径。因此，当与组合伙伴(a)组合时，使用针对肿瘤缺氧的组合伙伴 (b)抑制可通过限制诱导血管发生/存活应答产生有益的累加或协同效 应。

因此，本发明提供了治疗肿瘤的方法，其包括施用与有效量的(b) 至少一种缺氧靶向剂组合之有效量的(a)VDA。

“有效量”意指当施用于需要这种治疗的哺乳动物(特别是人)时，每 个组合伙伴的量足够实现对特定增殖性疾病的治疗。因此，例如，组合伙 伴(a)的化合物(或其可药用盐、溶剂化物或前药)的治疗有效量对于 协同或增强缺氧靶向剂的活性是足量的(或反之亦然)以便减轻或缓解靶 向的疾病。

这可包括至少部分地实现所期望的效果，或者延迟所治疗的特定疾病 (例如，肿瘤)的发作，或者抑制其进展，或者一起阻止或逆转其发作或 进展。

在患有增殖性疾病的患者中的临床研究(例如开放标签的剂量递增 (dose escalation)研究)可包括为了证明组合之活性成分的协同作用而 进行的研究。可通过本领域技术人员已知的这些研究结果直接地确定有益 和/或协同效应。这些研究还能比较使用活性成分的单一疗法以及本发明 的组合的效果。优选地，组合伙伴(a)的剂量可递增直至到达最大耐受 剂量(MTD)为止，而药剂(b)以固定剂量施用。或者，组合伙伴(a) 以固定剂量施用而药剂(b)的剂量递增。每个患者可每日或间歇性接受 药剂(a)的剂量。在这样的研究中可确定治疗的功效：例如，通过每9 周进行症状分数评估，在6、12、18或24周之后。

施用本发明的药物组合不仅可产生有益的效果，例如，累加或协同治 疗效果(例如对于缓解症状、延迟症状的进展或抑制症状)，而且还可进 一步产生出人意料的有益效果。这样的其他效果可包括与只应用一种用于 本发明之组合中的药物活性成分的单一疗法相比较少的副作用、改善的生 活质量或降低的发病率。

本发明的另一个益处是可使用较低剂量的组合的活性成分。所需剂量 不仅更小，而且也可以不那么频繁地施加，这可降低副作用的发生率或严 重程度。

术语“施用”涉及向单个患者同时施用组合伙伴，并且旨在包括治疗方 案，其中药剂不一定通过相同的施用途径或在相同的时间来施用。因此， 组合伙伴(a)和(b)可一起、一前一后或者分开地以一个组合的单位剂 型或两个分开的单位剂型施用。所述单位剂型还可以是固定的组合，例如 包含伙伴(a)(或者其盐、溶剂化物或前药)和伙伴(b)二者的药物组 合物。

特别地，可同时或以任何顺序依序地施用本发明之组合的每个组合伙 伴的治疗有效量，并且组分可分开或作为固定组合施用。

例如，根据本发明的预防或治疗增殖性疾病的方法可包括：(i)施用 以游离或可药用盐形式的伙伴(a)；和(ii)施用以游离或可药用盐形式 的伙伴(b)，同时或以任何顺序依序地，以联合的治疗有效量，优选地以 协同有效量，例如，以对应于本文所述量的日剂量或间歇剂量。本发明之 组合的单独组合伙伴可在治疗过程中于不同时间分开施用或者以分开或 单个组合形式同时施用。此外，术语施用还涵盖了在体内转化为像这样的 组合伙伴的组合伙伴之前药的使用。本发明因此应理解为包括所有这样的 同时或交替治疗方案并且相应地解释术语“施用”。

因此，应理解的是，组合伙伴可呈现为用于增殖性疾病治疗(例如， 肿瘤治疗)的“药盒的部分”。所述药盒可包括用于共施用的在其中分开提 供组合伙伴的包装以及用于特殊治疗的说明书。

在本发明的组合中使用的每个组合伙伴的有效剂量可根据所使用的 特定化合物或药物组合物、施用的方式、治疗的病症、所治疗病症的严重 程度而变化。因此，根据包括施用途径以及患者的肾和肝功能的多种因素 来选择本发明之组合的剂量方案。普通医师可容易地确定或开出所需之有 效量的单个活性成分以缓解、对抗或阻止病症的进展。

组合伙伴(a)和(b)的日剂量当然将根据多种因素(例如所选择的 化合物、待治疗的特定病症和期望的效果)来变化。然而通常，以以下剂 量施用药剂(a)获得满意的结果：以每天约0.05mg/kg至20mg/kg，特 别地以每天1mg/kg至20mg/kg，例如以每天0.4mg/kg至16mg/kg的日 剂量率，作为单次剂量或分次剂量。可通过任何常规途径，特别是肠内， 例如，经口(例如，以片剂、胶囊剂、饮用溶液剂的形式)或者肠胃外(例 如，以可注射的溶液剂或混悬剂的形式)来施用组合伙伴(a)和伙伴(b)。 因此，用于经口施用的合适单位剂型包含约0.02mg至50mg活性成分， 通常为0.1mg至30mg和2mg至25mg，4mg至20mg，例如，组合伙 伴(a)或(b)，以及一种或更多种可药用稀释剂或载体。

组合伙伴(b)可以以0.5mg至1000mg的日剂量范围向人施用。因 此，用于经口施用的合适单位剂型包含约0.1mg至500mg活性成分，优 选5mg/天至50mg/天，更优选5mg/天至20mg/天，并且最优选约7mg/ 天至12mg/天，以及一种或更多种可药用稀释剂或载体。递送已知缺氧靶 向剂的方法和施用方案对于熟练的临床医生将是已知的。

例如，施用方案可包括在第1天和第8天(21天周期的)通过静脉 内(I.V.)以指定剂量水平添加TPI(例如式III的化合物)，其中缺氧靶 向剂以经口日剂量(例如，约10mg/天)施用。在该实施方案中，式(III) 的化合物可以以4mg/m²至16mg/m²的水平给药。

本发明的药物组合的施用不仅产生有益效果，例如，累加或协同治疗 效果(例如，对于抑制肿瘤生长)，而且产生了进一步出人意料的有益效 果，例如，与只应用一种用于本发明之组合中的药物活性成分的单一疗法 相比较少的副作用、改善的生活质量或降低的发病率。

另一个益处是可使用较低剂量的本发明之组合的活性成分，例如，所 需剂量不仅经常更小，而且也可以不那么频繁地施加，或者可使用以降低 副作用的发生率。这与待治疗患者的期望和要求相一致。

可将伙伴(a)和(b)的组合单独地或一起与一种或更多种可药用载 体和任选地一种或更多种其他常规药物助剂组合，并以片剂、胶囊剂、胶 囊型片剂(caplet)等形式肠内(例如经口)施用，或者以无菌可注射溶 液剂或混悬剂的形式肠胃外(例如腹膜内或静脉内)施用。可通过常规手 段来制备肠内和肠胃外组合物。

根据本发明，用于分开施用组合伙伴(a)和伙伴(b)或者用于以固 定组合(即，组合物)施用的药物组合物可以以本领域已知的方式制备并 且是适于肠内(例如经口或直肠)和肠胃外向哺乳动物(温血动物)，特 别是人施用的那些，其包含治疗有效量的至少一种单独的药理学活性组合 伙伴，例如，如上所述的，或者与一种或更多种可药用载体或稀释剂(尤 其是适合于肠内或胃肠外施加的)组合。

合适的药物组合物包含，例如约0.1％至约99.9％，优选地约1％至 约60％的活性成分。

组合物可包含任何合适的载体、稀释剂或赋形剂。这些包括所有常规 的溶剂、分散介质、填料、固体载体、包衣、抗真菌剂和抗菌剂、皮肤渗 透剂、表面活性剂、等渗剂和吸收剂等。可以理解的是，本发明的组合物 还可包含其他补充的生理活性剂。

从与组合物的其他成分相容的意义上来说，载体必须是药学上“可用 的”并且对于对象无害。组合物包括适于经口、直肠、鼻、表面(包括口 腔和舌下)、阴道或肠胃外(包括皮下、肌内、静脉内和皮内)施用的那 些。组合物可常规地以单位剂型呈现并且可通过药学领域公知的任何方法 来制备。这样的方法包括将活性成分与构成一种或更多种辅助成分的载体 联合的步骤。通常，通过将活性成分均匀地且密切地与液体载体或细碎的 固体载体或两者相联合，然后(如果必要)，将产品成形来制备所述组合 物。

适于经口施用的本发明的组合物可呈现为分散单位(discrete unit)， 例如，各含有预定量之活性成分的胶囊剂、小药囊剂(sachet)或片剂； 为散剂或颗粒剂；为溶液剂或在水性或非水性液体中的混悬剂；或者为水 包油液体乳剂或油包水液体乳剂。活性成分还可呈现为大丸剂(bolus)、 药糖剂或糊剂。

可通过任选地与一种或更多种辅助成分压制或模制来制成片剂。压制 片剂可通过在合适的机器中压制任选地与粘合剂(例如惰性稀释剂)、防 腐剂、崩解剂(例如淀粉羟乙酸钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、交联羧甲基纤 维素钠)、表面活性剂或分散剂相混合的自由流动形式(例如散剂或颗粒 剂)的活性成分来制备。模制片剂可通过在合适的机器中模制用惰性液体 稀释剂润湿之粉末状化合物的混合物来制备。所述片剂可任选地进行包衣 或刻痕，并且可这样配制以便提供在其中使用之活性成分的缓慢或控制释 放，例如，不同比例的羟丙基甲基纤维素以提供期望的释放谱。片剂可任 选地提供有肠溶包衣，以在肠部分(而非胃)提供释放。

适于在口中表面施用的组合物包括锭剂，其包含在矫味基质(通常为 蔗糖和阿拉伯胶或黄蓍胶)中的活性成分；软锭剂，其包含在惰性基质(例 如明胶和甘油或蔗糖和阿拉伯胶)中的活性成分；以及漱口剂，其包含在 合适的液体载体中的活性成分。

适于向皮肤表面施用的组合物可包含溶解或混悬在任何合适的载体 或基质中的化合物并且可以是洗剂、凝胶剂、乳膏剂、糊剂、软膏剂等形 式。合适的载体包括矿物油、丙二醇、聚氧乙烯、聚氧丙烯、乳化蜡、脱 水山梨醇单硬脂酸酯、聚山梨酯60、十六烷基酯蜡、鲸蜡硬脂醇、2-辛基 十二烷醇、苯甲醇和水。透皮贴剂也可用于施用本发明的化合物。

用于直肠施用的组合物可呈现为具有合适基质的栓剂，所述合适基质 包括，例如可可脂、甘油、明胶或聚乙二醇。

适于阴道施用的组合物可呈现为阴道栓剂(pessary)、棉塞、乳膏剂、 凝胶剂、糊剂、泡沫剂或喷雾制剂，除活性成分之外其含有本领域已知是 适当的这样的载体。

适于肠胃外施用的组合物包括水性和非水性等渗无菌注射液，其可含 有使组合物与预期接受者的血液等渗的抗氧化剂、缓冲剂、杀菌剂和溶质； 以及水性和非水性无菌混悬剂，其可包括悬浮剂和增稠剂。所述组合物可 以存在于单位剂量或多剂量密封容器(例如安瓿和小瓶)中，并且可以储 存在冷冻干燥(冻干)条件下，仅需要在临用前添加无菌液体载体(例如 注射用水)。临时注射溶液和混悬剂可以由先前描述种类的无菌散剂、颗 粒剂和片剂来制备。

优选的单位剂量组合物是含有活性成分之日剂量或单位、日亚剂量 (如上文所述)，或其适当部分的那些。

应理解的是，除了上面特别提及的活性成分之外，考虑到所讨论的组 合物的类型，本发明的组合物还可包含本领域中常规的其他药剂，例如适 于经口施用的那些可包括这样的试剂例如粘合剂、甜味剂、增稠剂、矫味 剂、崩解剂、包衣剂、防腐剂、润滑剂和/或延时剂。合适的甜味剂包括 蔗糖、乳糖、葡萄糖、阿斯巴甜或糖精。合适的崩解剂包括玉米淀粉、甲 基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、黄原胶、皂土、海藻酸或琼脂。合适的矫味 剂包括薄荷油、冬青油、樱桃、橙子或覆盆子矫味料。合适的包衣剂包括 丙烯酸和/或甲基丙烯酸和/或其酯的聚合物或共聚物、蜡、脂肪醇、玉米 蛋白、虫胶或麸质。合适的防腐剂包括苯甲酸钠、维生素E、_α-生育酚、 抗坏血酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯或亚硫酸氢钠。合适的 润滑剂包括硬脂酸镁、硬脂酸、油酸钠、氯化钠或滑石。合适的延时剂包 括单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。

本领域技术人员将理解的是，除具体描述的那些之外，可以对本文描 述的本发明进行变化和修改。应理解的是，本发明包括落入本发明精神和 范围内的所有这样的变化和修改。本发明也包括在本说明书中单独或共同 地提及或指出的所有步骤、特征、组合物和化合物，并且包括任何两个或 更多个所述步骤或特征的任何以及所有组合。

现在将参照下述实施例描述本发明的某些实施方案，实施例只用于说 明的目的，而不旨在限制前面一般性描述的范围。

实施例

合成方法

2-溴-7-乙酰氧基-3-(3，4，5-三甲氧基苯甲酰基)-6-甲氧基苯并呋喃的制备

步骤1：2-叔丁基二甲基甲硅烷基-3-(叔丁基二甲硅烷氧基亚甲基)-6-甲氧 基-7-异丙氧基苯并呋喃(Larock偶联)

将2-异丙氧基-3-甲氧基-5-碘苯酚(4.41mmol)、1-(叔丁基二甲基甲 硅烷基)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)丙炔(1.5g，5.28mmol)、氯化锂(189 mg，4.45mmol)和碳酸钠(2.34g，22.08mmol)在无水二甲基甲酰胺 (5mL)中的混悬液，在100℃通过抽真空并用氮气回填进行脱氧4次。 添加乙酸钯(135mg，0.60mmol)，并将反应容器用氮气脱气两次。然后 将反应混合物在此温度下搅拌4h(tlc)并通过在真空下蒸馏除去溶剂。 将残留物溶解在乙酸乙酯(75mL)中，充分搅拌，过滤并用三乙胺(5mL) 处理。将溶液在硅胶(10g)上浓缩并通过快速色谱法(硅胶，洗脱剂＝ 己烷/二乙醚/三乙胺；95％∶5％∶1％)纯化，以得到为黄色油状物的标题 化合物(1.45g，96％)；

¹H NMR(300 MHz，CDCl₃)δ7.24(d，1H，J＝8.45Hz)，6.88(d，1H，J＝8.47Hz)，4.80(s，2H，CH₂)， 4.73(m，1H)，3.88(s，3H，OMe)，1.36(d，6H，J＝6.17Hz)，0.94(s，9H)，0.92(s，9H)，0.35 6H)，0.12(s，6H)。

步骤2：2-叔丁基二甲基甲硅烷基-3-甲酰基-6-甲氧基-7-异丙氧基苯并呋喃

向在甲醇(100mL)中的2-叔丁基二甲基甲硅烷基-3-(叔丁基二甲硅 烷氧基亚甲基)-6-甲氧基-7-异丙氧基苯并呋喃(2.69mmol)溶液添加浓盐 酸(200μL)并且搅拌30分钟进行反应(用tlc监测)，用三乙胺(2mL) 猝灭并通过在真空下蒸馏除去溶剂。将残留物溶解在二氯甲烷(20mL) 中，用水(10mL)洗涤，经硫酸镁干燥，真空下浓缩并用甲苯(20mL) 共蒸馏。将粗产物溶解在无水二氯甲烷(4mL)中，并添加至科林试剂 (在无水二氯甲烷(30mL)中的三氧化铬(1.01g)，吡啶(1.65mL)) 的搅拌溶液。将混悬液搅拌10分钟，过滤并用二乙醚(20mL)洗涤残 留物。将滤液在二氧化硅(10g)上浓缩并通过快速色谱法(硅胶，洗脱 剂＝己烷/二乙醚/三乙胺(90∶9∶1)纯化以得到为浅黄色油状物的标题化合 物(503mg，48％)；

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ10.25(s，1H，CHO)，7.79(d，1H，J＝8.45 Hz)，6.98(d，1H，J＝8.46Hz)，4.65(m，1H)，3.89(s，3H，OMe)，1.35(d，6H，J＝6.17Hz)， 0.97(s，9H)，0.45(s，6H)。

步骤3：2-叔丁基二甲基甲硅烷基-3-(3，4，5-三甲氧基苯甲酰基)-6-甲氧基-7- 异丙氧基苯并呋喃

在-78℃于氮气下，向在无水四氢呋喃(1mL)中的3，4，5-三甲氧基碘 苯(377mg，1.27mmol)的搅拌溶液添加正丁基锂(795μL，1.59mmol， 在环己烷中的2M溶液)并将反应混合物在该温度下搅拌40分钟。在此 时间后，将在无水四氢呋喃(1mL)中的2-叔丁基二甲基甲硅烷基-3-甲 酰基-6-甲氧基-7-异丙氧基苯并呋喃(1.07mmol)溶液通过注射器吸移管 逐滴添加至反应物。将反应混合物在-60℃搅拌20分钟，然后使其升温至 0℃，搅拌10分钟，用饱和氯化铵溶液(2mL)猝灭，并用乙酸乙酯(20 mL)稀释。将有机层用水(10ml)洗涤，经硫酸镁干燥并在真空下除去 溶剂以得到残留物，所述残留物用甲苯共蒸馏。将粗产物(908mg)溶解 在无水四氢呋喃(10mL)中并添加2，3-二氯-5，6-二氰基-1，4-苯醌(900mg， 1.59mmol)处理。将反应混合物在室温下搅拌16小时(用tlc监测)，然 后加载到二氧化硅上(10g)并通过快速色谱法纯化(硅胶，洗脱剂＝己 烷/二乙醚/三乙胺，90∶9∶1)以得到为浅黄色油状物的标题化合物(498mg， 69％)；

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.14(s，2H，苯甲酰基Hs)，6.81(d，1H，J＝8.64Hz)， 6.77(d，1H，J＝8.64Hz)4.74(m，1H)，3.93(s，3H，OMe)，3.86(s，3H，OMe)，3.78(s，6H，2x OMe)，1.39(d，6H，J＝6.14Hz)，1.01(s，9H)，0.26(s，6H)。

步骤4：2-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-7-乙酰氧基-3-(3，4，5-三甲氧基苯甲 酰基)-6-甲氧基苯并呋喃

在室温于氮气下向在无水DCM(2mL)中的2-(叔丁基二甲硅烷氧 基)-7-异丙氧基-3-(3，4，5-三甲氧基苯甲酰基)-6-甲氧基-苯并呋喃(160mg， 0.31mmol)的搅拌溶液添加固体三氯化铝(83mg，0.62mmol)并将反 应混合物搅拌15分钟(用tlc监测)。将反应用氯化铵饱和溶液猝灭，用 二氯甲烷提取并经硫酸镁干燥。通过蒸馏除去溶剂并且将残留物通过用甲 苯共沸除去水进行干燥。将粗产物溶解在吡啶(2mL)中，添加乙酸酐 (1mL)并将反应混合物在室温下搅拌2小时。将溶剂在真空下蒸馏， 将残留物加载到硅胶(1g)上并通过柱色谱法(硅胶，洗脱剂，己烷∶ 二乙醚；80∶20)纯化(134mg，84％)；

¹HNMR (300MHz，CDCl₃)δ7.14(s，2H，苯甲酰基Hs)，6.98(d，1H，J＝8.72Hz)，6.85(d，1H，J＝ 8.72Hz)，3.93(s，3H，OMe)，3.86(s，3H，OMe)，3.80(s，6H，2x OMe)，2.41(s，3H)，0.99(s， 9H)，0.25(s，6H)。

步骤5：2-溴-7-乙酰氧基-3-(3，4，5-三甲氧基苯甲酰基)-6-甲氧基苯并呋喃

在室温于氮气下向1，2-二氯乙烷(1mL)中的2-叔丁基二甲基甲硅 烷基-7-乙酰氧基-3-(3，4，5-三甲氧基苯甲酰基)-6-甲氧基苯并呋喃(120mg， 0.44mmol)的搅拌溶液逐滴添加溴(12μL，0.44mmol)并将反应混合物 在该温度下搅拌10分钟。在此时间后，将反应用饱和硫代硫酸钠溶液猝 灭，用乙酸乙酯(20mL)提取，经硫酸镁干燥并通过在真空下蒸馏除去 溶剂。将粗产物通过硅胶柱色谱法(洗脱剂＝己烷∶二乙醚；8∶2-7∶3) 纯化以得到为无色结晶固体的标题化合物(91mg，81％)；

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.40(d，1H，J＝8.70Hz)， 7.14(s，2H，苯甲酰基-Hs)，6.98(d，1H，J＝8.75Hz)，3.94(s，3H，OMe)，3.89(s，3H，OMe)， 3.86(s，6H，2x OMe)，2.43(s，3H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl_s)δ187.95(CO)，167.71， 152.75，149.54，147.49，142.59，131.92，131.80，123.91，121.84，119.89，117.72，109.89， 106.92，60.69，56.61，56.00，20.09。

实施例1

2-甲基-7-羟基-3-(3，4，5-三甲氧基苯甲酰基)-6-甲氧基苯并呋喃(BNC105) 的制备

制备A

在90℃下，向在1，4-二氧六环(2mL)中的2-溴-7-乙酰氧基-3-(3，4，5- 三甲氧基苯甲酰基)-6-甲氧基苯并呋喃(20mg，0.042mmol)，甲基硼酸 (40mg，0.67mmol)的搅拌溶液添加四-三苯基膦钯(11mg，0.01mmol)， 接着添加在蒸馏水(0.5mL)中的碳酸氢钠(40mg，0.48mmol)溶液。 在5分钟之后，反应混合物变红。在2小时(tlc)之后，将反应混合物升 温至室温并添加饱和氯化铵(2mL)，并且用二氯甲烷(20mL)稀释。 分离有机层并用水洗涤，经硫酸镁干燥并通过在真空下蒸馏除去溶剂。残 留物用PTLC(洗脱剂＝二氯甲烷/甲醇，1∶1)纯化以得到为蓬松白色固体 的标题化合物(在反应期间乙酸裂解(acetate cleaved))；(3mg，19％)。

制备B(Negishi偶联)

在0℃下，向在无水THF(1.5mL)中的锌-溴(592mg，2.63mmol) 的搅拌溶液添加甲基锂溶液(在二乙醚中的1.6M溶液，2.6mL，4.15 mmol)并将反应混合物搅拌2小时。添加固体2-溴-7-乙酰氧基-3-(3，4，5- 三甲氧基苯甲酰基)-6-甲氧基-苯并呋喃(300mg，0.63mmol)，在真空下 除去乙醚并向静止的混悬液添加二氯双(三苯基膦)钯催化剂(21mg)和 催化量的碘化亚铜。将反应混合物在室温下搅拌36小时(用tlc监测)， 用饱和氯化铵溶液猝灭并用二氯甲烷(10mL)提取，经硫酸镁干燥并且 在真空下蒸馏溶剂，通过硅胶柱(洗脱剂＝己烷/乙酸乙酯；8∶2)纯化产 物。将产物在甲醇中结晶(106mg，46％)；

¹H NMR(300MHz， CDCl3)δ7.09(s，2H，苯甲酰基Hs)，6.93(d，1H，J＝8.54Hz)，6.83(d，1H，J＝8.56Hz)， 5.70(bs，1H，OH)，3.93(s，3H，OMe)，3.92(s，3H，OMe)，3.83(s，6H，2x OMe)，2.54(s，3H， 2-Me)。

实施例2

6-甲氧基-2-甲基-3-(3，4，5-三甲氧基苯甲酰基)苯并呋喃-7-基磷酸二钠酯的 制备

步骤1：6-甲氧基-2-甲基-3-(3，4，5-三甲氧基苯甲酰基)苯并呋喃-7-基磷酸 二苄酯：

在0℃于氮气氛下，向在2.5ml无水乙腈中的0.081g(0.22mmol) (7-羟基-6-甲氧基-2-甲基苯并呋喃-3-基)(3，4，5-三甲氧基苯基)甲酮，0.086g (0.261mmol)四溴化碳和0.063mL(0.283mmol)亚磷酸二苄酯的混合 物逐滴添加0.046mL无水三乙胺。将所得混合物在室温下搅拌2小时， 然后用乙酸乙酯稀释至20ml，用盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤并 减压蒸发至干燥。将残留物通过快速柱色谱法纯化(二氯甲烷/乙酸乙酯， 9∶1)以得到为无色泡沫状物的标题化合物，(0.13g，94％)；

¹H NMR(CDCl₃)δ2.42(s， 3H，Me-2)；3.83(s，1H，OMe)；3.93(s，3H，OMe)；5.33(m，4H，CH₂Ph)；6.89(d，CH 芳族的，J＝8.7Hz)；7.21(dd，1H，CH芳族的，J＝8.72Hz；J＝1.2Hz)；7.08(s，2H， CH芳族的)；7.29-7.43(m，10H，CH芳族的)。

步骤2：6-甲氧基-2-甲基-3-(3，4，5-三甲氧基苯甲酰基)苯并呋喃-7-基磷酸二 钠酯：

在-5℃于氮气氛下，向在1mL无水乙腈中的0.122g(0.193mmol) 来自步骤1之产物的搅拌溶液添加0.075mL(0.58mmol)三甲基溴硅烷。 将得到的混合物在0℃搅拌1小时，然后在真空中蒸发至干。将残余物用 无水甲醇稀释至5mL并且通过添加甲醇钠使溶液的pH升至约10。在减 压下蒸发所得混合物，然后将固体残留物用无水异丙醇(4×1.5mL)和无 水乙醇(3×1.5mL)洗涤并在真空下干燥以得到0.062g(65％产率)为 无色固体的标题化合物；

¹H NMR(D₂O)δ2.37(s，3H，Me-2)；3.76(s，6H，OMe)；3.79(s，3H，OMe)；3.82(s，3H， OMe)；4.66(s，H₂O)；6；93(d，1H，CH芳族的，J＝8.6Hz)；7.04(d，1H，CH芳族的J ＝8.6Hz)；7.10(s，2H，CH芳族的)。

生物学数据

BNC105P通过破坏肿瘤脉管系统表现出增加了肿瘤缺氧。这种效应 在大范围的肿瘤中得到了证明，所述肿瘤包括MDA MB-231乳腺癌、 Calu-6肺癌、Colo205结肠癌和DU-145前列腺癌。就MDA-MB-231肿 瘤而言，BNC105P示出引起血管发生生长因子VEGF的释放、肿瘤内皮 细胞的破坏、血管完整性的损害并且增加了细胞凋亡。

BNC105诱导了RENCA肾肿瘤中的血管关闭以及增加了GLUT1、 HIF-1α、PERK、eIF2a和VEGF。在由BNC105诱导的RENCA肾肿瘤 的血管关闭中，BNC105诱导缺氧、CXCL12和MMP-9增加以及炎性免 疫应答和诱导的趋化性(chemotaxis)。

这些发现促使本发明人检验涉及BNC105和一系列肿瘤缺氧靶向剂 的组合疗法。该方法背后的基本原理总结于图1中。

BNC105与帕唑帕尼的组合疗法

基于由BNC105抗肿瘤作用所引起的组织学变化的研究，确定了＞95 ％的肿瘤块变得坏死，而周边区域保持生存。在生存区域中观察到许多驱 动肿瘤恢复之蛋白质表达的增加。其中有血管发生生长因子VEGF。本发 明人寻求研究BNC105与VEGF/VEGFR2信号转导通路的抑制剂相组合 的潜在治疗的益处。

帕唑帕尼是酪氨酸激酶抑制剂，其抑制经过VEGF家族受体的信号 传导并且已被FDA批准用于肾癌的第一线治疗中。随着安全治疗方案的 建立，本发明人检验了在涉及携带肾肿瘤之小鼠的RENCA模型中共施用 BNC105和帕唑帕尼的抗癌作用。用一个周期的BNC105(16mg/kg/剂量， 在21天周期的第2天和第9天)，同时接受每日经口施用的帕唑帕尼(第 1天至第21天；30mg/kg)来处理小鼠。在21天标记处终止处理并监测 动物的总存活(overall survival)。基于所获得的数据，将BNC105处理 与帕唑帕尼组合导致动物存活之相当大的且统计学上的显著增加(图2)。

在处理(帕唑帕尼30mg/kg，每日经口(p.o.)，BNC10516mg/kg， 第2天和第9天静脉内(i.v.))的第10天对具有RENCA(VHL野生型) 原位肿瘤的Balb/c小鼠肾脏进行称重。相比于用BNC105或帕唑帕尼分 别单独处理的21％和19％的抑制，用BNC105和帕唑帕尼同时处理导致 47％的肿瘤生长抑制。这些结果在图3中示出。

如由这些结果所证明的，用BNC105+帕唑帕尼处理RENCA原位肿 瘤导致肿瘤生长抑制和总存活高于用帕唑帕尼或BNC105单独处理的动 物。这表明BNC105和帕唑帕尼的组合疗法比BNC105或帕唑帕尼的单 一疗法更加有效。

BNC105和硼替佐米的组合疗法

在单剂量静脉内32mg/kg BNC105P后24小时收集来自具有肿瘤的 Balb/c小鼠之福尔马林固定的石蜡包埋的的RENCA(VHL野生型)原 位肿瘤切片示出未折叠蛋白响应标记PERK(Cell signalling#5683)的上 调和eIF2α(Cell signalling#5324)的磷酸化。(在苏木精上的坚牢红检 测)

在处理(硼替佐米0.5mg/kg，第1天、第5天、第8天静脉内，BNC105 32mg/kg，第2天和第9天静脉内)的第9天BNC105给药之后4小时， 对具有RENCA原位肿瘤的Balb/c小鼠肾脏进行照相。使用TUNEL测 定(Roche)对福尔马林固定的和石蜡包埋的切片进行染色以使细胞坏死 可见。使用每个药物的单一疗法看到非常少量的肿瘤坏死。从用硼替佐米 +BNC105组合处理的小鼠提取的肿瘤中看到明显增加的坏死，可视化为 增加的TUNEL染色。

相比于用硼替佐米或BNC105单独处理的动物，用BNC105+硼替佐 米处理RENCA肿瘤导致增加的肿瘤坏死。这证明了使用BNC105硼替 佐米组合疗法相比于BNC105或硼替佐米单一疗法的一个明显优势。