一种新型抗凝剂白纹伊蚊唾液腺aegyptin相似蛋白ALP的表达制备方法和应用

摘要

本发明涉及一种新型抗凝剂白纹伊蚊唾液腺aegyptin相似蛋白ALP的表达制备方法，步骤如下：(1)优化合成ALP成熟肽DNA；(2)重组质粒pPICZαA-ALP的构建；(3)重组蛋白ALP的表达和纯化。本发明方法利用pPICZαA载体的毕赤酵母表达系统(pPICZαA-ALP X33)表达的ALP蛋白能够正确分泌表达，经纯化后具有抗凝血活性，在体外能够显著延长凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)和活化部分凝血活酶时间(APTT)，可作为一种新型抗凝剂使用，为进一步研究其作为预防和治疗血栓栓塞性等血管性疾病的新型抗凝剂的可行性奠定了研究基础，因此，本发明方法如果被广泛证明并运用于临床将具备积极的社会效益和可观的经济效益。