一种妇清雪莲栓中东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素含量的测定方法

摘要

本发明公开了一种妇清雪莲栓中东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素含量的测定方法。包括（1）供试品溶液的制备；（2）东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素成分含量测定：利用高效液相色谱技术测定东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素三种成分含量，对6批供试品溶液进行高效液相色谱测定，得到东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素色谱峰的峰面积，根据标准曲线计算供试品中东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素三种成分的含量，并结合供试品的质量，经计算得到东莨菪内酯的含量为0.569mg/g~0.592mg/g，伞形花内酯的含量为1.034mg/g~1.068mg/g，蛇床子素的含量为8.65mg/g~8.89mg/g。该方法可以对妇清雪莲栓的质量进行评价，该质量检测方法准确、快捷、方便、有效。

说明书

技术领域

本发明属于药品领域，具体地说，涉及一种妇清雪莲栓中三个有效成分的含 量测定方法。

背景技术

妇清雪莲栓是我司自主研发的复方中药新药，治疗妇科阴道外炎症，由雪莲 花、苦参、蛇床子和地肤子四种中药组成，其中雪莲花是名贵的藏药材，其药性 苦、寒，入肝、脾、肾经，具有清热解毒、消肿止痛的功效，用于头部创伤、炭 疽、热性刺痛、妇科病、类风湿性关节炎、中风等症。其中东莨菪内酯和伞形花 内酯是雪莲花中的有效成分。蛇床子是伞形科植物蛇床的干燥成熟果实蛇床子， 其药性辛、苦，温，有小毒，归肾经。具有燥湿祛风、杀虫止痒。温肾壮阳的功 效，用于阴痒带下、湿疹瘙痒、湿痹腰痛、肾虚阳痿、宫冷不孕等症。蛇床子中 蛇床子素是其有效成分之一。因此为了分析测试妇清雪莲栓中东莨菪内酯、伞形 花内酯和蛇床子素三种有效成分的含量，必须建立一种快速、准确的测定方法。

目前，药材和制剂中的东莨菪内酯和伞形花内酯的含量测定方法已有文献报 道，也有文献报道用高效液相方法测定药材蛇床子、独活和中药制剂妇炎灵胶囊 中蛇床子素的含量，但同时测定中药制剂中这三种成分含量的方法尚未见报道。 因此，有必要建立一种科学的含量测定方法同时对妇清雪莲栓中的东莨菪内酯、 伞形花内酯和蛇床子素三种有效成分的含量进行测定，从而对妇清雪莲栓进行质 量控制。(参考文献：[1]谭荣，王毓杰，张雨欣，周礼仕，谭尔，阿萍，张艺.HPLC 测定藏药凤毛菊中茵芋苷、东莨菪内酯和伞形花内酯的含量[J].中国中药杂志, 2014,39(6):1054-1057.[2]杨燕霞，白杨，刘西京，贾强.HPLC法测定雪隆胶囊 中东莨菪素和伞形花内酯的含量[J].广东药学院学报,2009,25(1):37-39.[3]刘 丽霞，赵挺，孙立新.HPLC法测定中药了哥王中伞形花内酯的含量.沈阳药科大 学学报.2010.27(7):563-566.[4]胡爽，郭晏华.HPLC法测定瑞香狼毒中香豆素 类三种成分含量[J].中成药,2011,33(3):530-533.[5]吴蜀瑶，李敏，王佳黎. HPLC测定青蒿植株不同部位的东莨菪内酯含量[J].中国现代中药.2010,12(6), 20-22.[6]苏薇薇，赵洁，林敬明.高效液相色谱法测定水母雪莲中东莨菪内酯、 伞形花内酯的含量[J].第一军医大学学报,2005,25(1):119-120.[7]陈艳平，霍 明，陈艳明，吴启南.RP-HPLC测定蛇床子和妇炎灵胶囊中蛇床子素的含量[J]. 中成药,2003,25(3):196-198.[6]徐以亮，徐海波.HPLC测定独活药材及配方颗 粒中蛇床子素的含量[J].中成药,2005,27(1):105-106.)

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种妇清雪莲栓中三个有效成分 的含量测定方法，该方法利用高效液相色谱法同时测定了妇清雪莲栓中的东莨菪 内酯、伞形花内酯和蛇床子素三种有效成分的含量，为妇清雪莲栓提供了含量测 定方法的技术支持，保证了妇清雪莲栓含量测定方法的科学性和先进性。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种妇清雪莲栓的质量检测方法，包括如下步骤：

(1)供试品溶液的制备：

以妇清雪莲栓为原料，取妇清雪莲栓10粒，置水浴60℃加热熔化，放冷。 取约1.5g，剪碎，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别加甲醇15ml、15ml、15ml， 超声处理3次，每次20分钟，滤过，合并滤液至50ml量瓶中，并加甲醇至刻度， 摇匀，即为供试品溶液；

(2)东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素三种成分含量测定：

高效液相色谱实验条件如下：C₁₈色谱柱：250mm×4.6mm，5μm；柱温： 40℃；流动相系统Ⅰ：以乙腈为流动相A，以水为流动相B；洗脱梯度：0-17min： 10％-60％A；17-18min：60％-80％A；18-24min：80％A；24-30min：80％-95％ A；30-32min：95％-10％A；32-42min：10％A。洗脱时间：42min；流动相系统 Ⅱ：以乙腈为流动相A，以0.1％冰醋酸水为流动相B；洗脱梯度：0-5min：15％ -32％A；5-20min：32％A；20-21min：32％-75％A；21-40min：75％-90％A； 40-45min：90％-95％A。洗脱时间：45min；紫外检测器检测波长：346nm；流 速：0.8-1.2ml/min；柱温：35-40℃；样品进样量：10μl；

东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素成分含量测定方法如下：取东莨菪内酯 对照品，制成每1ml分别含0.26mg、0.156mg、0.104mg、0.052mg、0.026mg、 0.013mg、0.0104mg、0.0052mg的对照品溶液；取伞形花内酯对照品，制成每1 ml分别含0.25mg、0.15mg、0.10mg、0.05mg、0.025mg、0.0125mg、0.01mg、 0.005mg的对照品溶液；取蛇床子素对照品，制成每1ml分别含3.65mg、2.19mg、 1.46mg、0.73mg、0.365mg、0.1825mg、0.146mg、0.073mg的对照品溶液。

高效液相色谱测定：不同浓度的对照品溶液分别以10μl进样，测得各标准 品溶液的高效液相色谱峰面积；以所得各标准对照品峰面积为纵坐标，各对应标 准对照品浓度为横坐标分别做标准曲线，分别计算得线性回归方程；然后对3 批供试品溶液进行高效液相色谱测定，得到东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素 色谱峰的峰面积，根据标准曲线计算供试品中东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子 素的含量，并结合供试品的质量，经计算得到东莨菪内酯的含量为 0.569mg/g～0.592mg/g，伞形花内酯的含量为1.034mg/g～1.068mg/g，蛇床子素的 含量为8.65mg/g～8.89mg/g。

在上述含量测定方法中，所述步骤(2)的色谱条件中流动相系统Ⅱ：以乙 腈为流动相A，以0.1％冰醋酸水为流动相B；洗脱梯度：0-5min：15％-32％A； 5-20min：32％A；20-21min：32％-75％A；21-40min：75％-90％A；40-45min： 90％-95％A。洗脱时间：45min；

在上述含量测定方法中所述高效液相色谱测定法步骤的色谱条件中流速为 1.0ml/min。

在上述含量测定方法中，所述步骤(2)的色谱条件中色谱柱温为40℃。

在上述含量测定方法中，所述步骤(1)中超声处理的功率为360W，频率 为35kHz。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：本发明利用高效液相色谱同时 对妇清雪莲栓中东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素三种有效成分的含量进行了 测定，该检测方法能准确的测定妇清雪莲栓中东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子 素的含量，可作为妇清雪莲栓的质量检测方法，并为妇清雪莲栓的质量标准提供 参考，方法简单，可操作性强，重现性好，准确度高，是检测妇清雪莲栓中东莨 菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素含量的有效方法。

附图说明

图1是实施例6中供试品溶液与东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素标准对 照品的HPLC-UV图谱。1：东莨菪内酯；2：伞形花内酯；3：蛇床子素。

具体实施方式

实施例1：

(1)供试品溶液的制备

以妇清雪莲栓为原料，取妇清雪莲栓10粒，置水浴60℃加热熔化，放冷。 取约1.5g，剪碎，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别加甲醇15ml、15ml、15ml， 超声处理(功率360W，频率35kHz)3次，每次20分钟，滤过，合并滤液至 50ml量瓶中，并加甲醇至刻度，摇匀，即为供试品溶液；

(2)东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素成分含量测定

高效液相色谱实验条件如下：C₁₈色谱柱：250mm×4.6mm，5μm；流动相： 以乙腈为流动相A，以水为流动相B；洗脱梯度：0-17min：10％-60％A；17-18 min：60％-80％A；18-24min：80％A；24-30min：80％-95％A；30-32min：95％-10％ A；32-42min：10％A。洗脱时间：42min；紫外检测器检测波长：346nm；流速： 1.0ml/min；柱温：40℃；样品进样量：10μl；

东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素成分含量测定方法如下：取东莨菪内酯 对照品，制成每1ml分别含0.26mg、0.156mg、0.104mg、0.052mg、0.026mg、 0.013mg、0.0104mg、0.0052mg的对照品溶液；取伞形花内酯对照品，制成每1 ml分别含0.25mg、0.15mg、0.10mg、0.05mg、0.025mg、0.0125mg、0.01mg、 0.005mg的对照品溶液；取蛇床子素对照品，制成每1ml分别含3.65mg、2.19mg、 1.46mg、0.73mg、0.365mg、0.1825mg、0.146mg、0.073mg的对照品溶液。

高效液相色谱测定：不同浓度的对照品溶液分别以10μl进样，测得各标 准品溶液的高效液相色谱峰面积；以所得各标准对照品峰面积为纵坐标，各对应 标准对照品浓度为横坐标分别做标准曲线，分别计算得线性回归方程；然后对供 试品溶液进行高效液相色谱测定，得到东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素色谱 峰的峰面积，根据标准曲线测得供试品中东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素的 含量，并结合供试品的质量，经计算得到东莨菪内酯的含量为 0.563mg/g～0.571mg/g，伞形花内酯的含量为1.041mg/g～1.075mg/g，蛇床子素的 含量为8.718mg/g～8.846mg/g。

实施例2：

(1)供试品溶液的制备

以妇清雪莲栓为原料，取妇清雪莲栓10粒，置水浴60℃加热熔化，放冷。 取约1.5g，剪碎，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别加甲醇15ml、15ml、15ml， 超声处理(功率360W，频率35kHz)3次，每次20分钟，滤过，合并滤液至 50ml量瓶中，并加甲醇至刻度，摇匀，即为供试品溶液；

(2)东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素成分含量测定

高效液相色谱实验条件如下：C₁₈色谱柱：250mm×4.6mm，5μm；流动相： 以乙腈为流动相A，以0.1％冰醋酸水为流动相B；洗脱梯度：0-8min：15％-30％A； 8-23min：30-35％A；23-43min：35％-95％A；洗脱时间：43min；紫外检测器 检测波长：346nm；流速：1.0ml/min；柱温：40℃；样品进样量：10μl；

东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素成分含量测定方法如下：取东莨菪内 酯对照品，制成每1ml分别含0.26mg、0.156mg、0.104mg、0.052mg、0.026mg、 0.013mg、0.0104mg、0.0052mg的对照品溶液；取伞形花内酯对照品，制成每1 ml分别含0.25mg、0.15mg、0.10mg、0.05mg、0.025mg、0.0125mg、0.01mg、 0.005mg的对照品溶液；取蛇床子素对照品，制成每1ml分别含3.65mg、2.19mg、 1.46mg、0.73mg、0.365mg、0.1825mg、0.146mg、0.073mg的对照品溶液。

高效液相色谱测定：不同浓度的对照品溶液分别以10μl进样，测得各标 准品溶液的高效液相色谱峰面积；以所得各标准对照品峰面积为纵坐标，各对应 标准对照品浓度为横坐标分别做标准曲线，分别计算得线性回归方程；然后对供 试品溶液进行高效液相色谱测定，得到东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素色谱 峰的峰面积，根据标准曲线测得供试品中东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素的 含量，并结合供试品的质量，经计算得到东莨菪内酯的含量为 0.571mg/g～0.595mg/g，伞形花内酯的含量为1.024mg/g～1.051mg/g，蛇床子素的 含量为8.578mg/g～8.849mg/g。

实施例3：

(1)供试品溶液的制备

以妇清雪莲栓为原料，取妇清雪莲栓10粒，置水浴60℃加热熔化，放冷。 取约1.5g，剪碎，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别加甲醇15ml、15ml、15ml， 超声处理(功率360W，频率35kHz)3次，每次20分钟，滤过，合并滤液至 50ml量瓶中，并加甲醇至刻度，摇匀，即为供试品溶液；

(2)东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素成分含量测定

高效液相色谱实验条件如下：C₁₈色谱柱：250mm×4.6mm，5μm；流动相：以 乙腈为流动相A，以0.1％冰醋酸水为流动相B；洗脱梯度：0-5min：15％-32％A； 5-20min：32％A；20-21min：32％-75％A；21-40min：75％-90％A；40-45min： 90％-95％A。洗脱时间：45min；紫外检测器检测波长：346nm；流速：0.8ml/min； 柱温：40℃；样品进样量：10μl；

东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素成分含量测定方法如下：取东莨菪内酯 对照品，制成每1ml分别含0.26mg、0.156mg、0.104mg、0.052mg、0.026mg、 0.013mg、0.0104mg、0.0052mg的对照品溶液；取伞形花内酯对照品，制成每1 ml分别含0.25mg、0.15mg、0.10mg、0.05mg、0.025mg、0.0125mg、0.01mg、 0.005mg的对照品溶液；取蛇床子素对照品，制成每1ml分别含3.65mg、2.19mg、 1.46mg、0.73mg、0.365mg、0.1825mg、0.146mg、0.073mg的对照品溶液。

高效液相色谱测定：不同浓度的对照品溶液分别以10μl进样，测得各标 准品溶液的高效液相色谱峰面积；以所得各标准对照品峰面积为纵坐标，各对应 标准对照品浓度为横坐标分别做标准曲线，分别计算得线性回归方程；然后对供 试品溶液进行高效液相色谱测定，得到东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素色谱 峰的峰面积，根据标准曲线测得供试品中东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素的 含量，并结合供试品的质量，经计算得到东莨菪内酯的含量为 0.581mg/g～0.594mg/g，伞形花内酯的含量为1.074mg/g～1.085mg/g，蛇床子素的 含量为8.701mg/g～8.895mg/g。

实施例4：

(1)供试品溶液的制备

以妇清雪莲栓为原料，取妇清雪莲栓10粒，置水浴60℃加热熔化，放冷。 取约1.5g，剪碎，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别加甲醇15ml、15ml、15ml， 超声处理(功率360W，频率35kHz)3次，每次20分钟，滤过，合并滤液至 50ml量瓶中，并加甲醇至刻度，摇匀，即为供试品溶液；

(2)东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素成分含量测定

高效液相色谱实验条件如下：C₁₈色谱柱：250mm×4.6mm，5μm；流动相：以 乙腈为流动相A，以0.1％冰醋酸水为流动相B；洗脱梯度：0-5min：15％-32％A； 5-20min：32％A；20-21min：32％-75％A；21-40min：75％-90％A；40-45min： 90％-95％A。洗脱时间：45min；紫外检测器检测波长：346nm；流速：1.2ml/min； 柱温：40℃；样品进样量：10μl；

东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素成分含量测定方法如下：取东莨菪内酯 对照品，制成每1ml分别含0.26mg、0.156mg、0.104mg、0.052mg、0.026mg、 0.013mg、0.0104mg、0.0052mg的对照品溶液；取伞形花内酯对照品，制成每1 ml分别含0.25mg、0.15mg、0.10mg、0.05mg、0.025mg、0.0125mg、0.01mg、 0.005mg的对照品溶液；取蛇床子素对照品，制成每1ml分别含3.65mg、2.19mg、 1.46mg、0.73mg、0.365mg、0.1825mg、0.146mg、0.073mg的对照品溶液。

高效液相色谱测定：不同浓度的对照品溶液分别以10μl进样，测得各标 准品溶液的高效液相色谱峰面积；以所得各标准对照品峰面积为纵坐标，各对应 标准对照品浓度为横坐标分别做标准曲线，分别计算得线性回归方程；然后对供 试品溶液进行高效液相色谱测定，得到东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素色谱 峰的峰面积，根据标准曲线测得供试品中东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素的 含量，并结合供试品的质量，经计算得到东莨菪内酯的含量为 0.554mg/g～0.589mg/g，伞形花内酯的含量为1.031mg/g～1.098mg/g，蛇床子素的 含量为8.671mg/g～8.996mg/g。

实施例5：

(1)供试品溶液的制备

以妇清雪莲栓为原料，取妇清雪莲栓10粒，置水浴60℃加热熔化，放冷。 取约1.5g，剪碎，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别加甲醇15ml、15ml、15ml， 超声处理(功率360W，频率35kHz)3次，每次20分钟，滤过，合并滤液至 50ml量瓶中，并加甲醇至刻度，摇匀，即为供试品溶液；

(2)东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素成分含量测定

高效液相色谱实验条件如下：C₁₈色谱柱：250mm×4.6mm，5μm；流动相：以 乙腈为流动相A，以0.1％冰醋酸水为流动相B；洗脱梯度：0-5min：15％-32％A； 5-20min：32％A；20-21min：32％-75％A；21-40min：75％-90％A；40-45min： 90％-95％A。洗脱时间：45min；紫外检测器检测波长：346nm；流速：1.0ml/min； 柱温：35℃；样品进样量：10μl；

东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素成分含量测定方法如下：取东莨菪内酯 对照品，制成每1ml分别含0.26mg、0.156mg、0.104mg、0.052mg、0.026mg、 0.013mg、0.0104mg、0.0052mg的对照品溶液；取伞形花内酯对照品，制成每1 ml分别含0.25mg、0.15mg、0.10mg、0.05mg、0.025mg、0.0125mg、0.01mg、 0.005mg的对照品溶液；取蛇床子素对照品，制成每1ml分别含3.65mg、2.19mg、 1.46mg、0.73mg、0.365mg、0.1825mg、0.146mg、0.073mg的对照品溶液。

高效液相色谱测定：不同浓度的对照品溶液分别以10μl进样，测得各标 准品溶液的高效液相色谱峰面积；以所得各标准对照品峰面积为纵坐标，各对应 标准对照品浓度为横坐标分别做标准曲线，分别计算得线性回归方程；然后对供 试品溶液进行高效液相色谱测定，得到东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素色谱 峰的峰面积，根据标准曲线测得供试品中东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素的 含量，并结合供试品的质量，经计算得到东莨菪内酯的含量为 0.585mg/g～0.598mg/g，伞形花内酯的含量为1.074mg/g～1.096mg/g，蛇床子素的 含量为8.702mg/g～8.956mg/g。

实施例6：

(1)供试品溶液的制备

以妇清雪莲栓为原料，取妇清雪莲栓10粒，置水浴60℃加热熔化，放冷。 取约1.5g，剪碎，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别加甲醇15ml、15ml、15ml， 超声处理(功率360W，频率35kHz)3次，每次20分钟，滤过，合并滤液至 50ml量瓶中，并加甲醇至刻度，摇匀，即为供试品溶液；

(2)东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素成分含量测定

高效液相色谱实验条件如下：C₁₈色谱柱：250mm×4.6mm，5μm；流动相：以 乙腈为流动相A，以0.1％冰醋酸水为流动相B；洗脱梯度：0-5min：15％-32％A； 5-20min：32％A；20-21min：32％-75％A；21-40min：75％-90％A；40-45min： 90％-95％A。洗脱时间：45min；紫外检测器检测波长：346nm；流速：1.0ml/min； 柱温：40℃；样品进样量：10μl；

东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素成分含量测定方法如下：取东莨菪内酯 对照品，制成每1ml分别含0.26mg、0.156mg、0.104mg、0.052mg、0.026mg、 0.013mg、0.0104mg、0.0052mg的对照品溶液；取伞形花内酯对照品，制成每1 ml分别含0.25mg、0.15mg、0.10mg、0.05mg、0.025mg、0.0125mg、0.01mg、 0.005mg的对照品溶液；取蛇床子素对照品，制成每1ml分别含3.65mg、2.19mg、 1.46mg、0.73mg、0.365mg、0.1825mg、0.146mg、0.073mg的1～8号对照品溶 液

1.线性关系考察：

精密量取1～8号对照品溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图， 以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。结果见表1-表3，从结果可 知，东莨菪内酯标准曲线相关系数R²＝0.99953，采用的方法在0.0052mg/ml～0.26 mg/ml范围内线性良好。

表1 东莨菪内酯线性试验结果(浓度范围为0.0052mg/ml～0.26mg/ml)

表2 伞形花内酯线性试验结果(浓度范围为0.0050mg/ml～0.250mg/ml)

表3 蛇床子素线性试验结果(浓度范围为0.073mg/ml～3.65mg/ml)

2.精密度试验：

取同一批样品，取1份，精密称取1.5g，按照“实施例6”项下供试品溶液 制备操作，按“实施例6”色谱条件分析，连续进样6次，测定样品中东莨菪内 酯、伞形花内酯和蛇床子素的峰面积，东莨菪内酯峰面积的RSD为0.43％，伞 形花内酯峰面积的RSD为0.39％，蛇床子素峰面积的RSD为0.26％，说明精密 度良好。

3.稳定性试验：

取同一批样品，取1份，精密称取1.5g，按照“实施例6”项下供试品溶液 制备操作，按“实施例6”色谱条件分析，分别于0小时、2小时、4小时、8 小时、12小时注入液相色谱仪，记录色谱图，从结果可知，样品溶液在12小时 内进行测定，东莨菪内酯峰面积的RSD为0.16％，伞形花内酯峰面积的RSD为 0.33％，蛇床子素峰面积的RSD为0.25％，无明显差异，相对稳定。

4.加样回收率：

取同一批样品，精密称取0.75g，共6份，每份样品中加入混合对照品溶液 1.0ml(加入对照品的量东莨菪内酯为0.65mg，伞形花内酯为0.45mg，蛇床子素 为8.05mg)，按照“实施例6”项下供试品溶液制备操作，即得。按照“实施例 6”项下的色谱条件分析，计算回收率，结果东莨菪内酯的回收率为95.33～96.84％， 测定结果的RSD为0.54％，伞形花内酯的回收率为97.28～103.9％，测定结果的 RSD为2.2％，蛇床子素的回收率为98.39～100.5％，测定结果的RSD为0.76％， 说明方法准确度高。

表4 妇清雪莲栓中东莨菪内酯含量测定的回收率试验

表5 妇清雪莲栓中伞形花内酯含量测定的回收率试验

表6 妇清雪莲栓中蛇床子素含量测定的回收率试验

5.样品测定：

取6个批号的样品，按照“实施例6”项下供试品溶液制备操作，按“实施 例6”色谱条件分析，得到样品中东莨菪内酯、伞形花内酯和蛇床子素的含量， 结果见表7。

表7 6批样品的测定结果