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应用重组胸苷激酶酶法合成2’-脱氧嘧啶核苷酸

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本发明属于生物技术领域，具体涉及一种以DNA重组技术构建高效表达的胸苷激酶的基因工程菌，并涉及利用该基因工程菌所产的胸苷激酶合成2’-脱氧嘧啶核苷酸的方法。本发明的技术方案包括利用重组DNA技术，构建胸苷激酶的表达载体，并转至大肠杆菌，得到高效表达胸苷激酶的基因工程菌。以该工程菌所产的胸苷激酶作为酶源，由胸苷、2’-脱氧尿苷及2’-脱氧-5-氟尿苷合成相应的2’-脱氧核苷酸。利用本发明的方法，具有简单，高效，对环境友好，适合于工业化生产。

著录项

公开/公告号CN104560838A

专利类型发明专利
公开/公告日2015-04-29

原文格式PDF
申请/专利权人丁庆豹;
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申请/专利号CN201310466856.3
发明设计人万群;丁庆豹;
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申请日2013-10-09
分类号C12N1/21;C12N9/12;C12P19/30;C12R1/19;
代理机构
代理人
地址 200237 上海市梅陇路130号实验五楼315室
入库时间 2023-12-18 08:25:28

法律信息

法律状态公告日

法律状态信息

法律状态
2017-05-24

发明专利申请公布后的视为撤回 IPC(主分类):C12N1/21 申请公布日:20150429 申请日:20131009

发明专利申请公布后的视为撤回
2015-04-29

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1. 应用重组胸苷激酶酶法合成2’-脱氧嘧啶核苷酸 [P] . 中国专利： CN104560838A . 2015-04-29
2. 重组枯草芽孢杆菌的应用和利用酶法合成烟酰胺单核苷酸的废水生产四氢嘧啶的方法 [P] . 中国专利： CN113621549A . 2021-11-09
3. Processes for the preparation of D - 1,2,4 - butanotriol trinitrate 1,2,4 - butanotriol, acid (D - 3.4 - diidroxibutanu00d3ico, acid 3 - desoxi - D - gliceropentanu00d3ico, acid (4S) - 2 - amino - 4 - diidroxipentanu00d3ico; D - 1,2,4 - butanotriol trimethylolethane (D - 1,2,4 - butanotriol, D - xylose dehydrogenase, acid. D - xilu00d4nico, desidratase acid, 3 - desoxi - gliceropentanu00d3ico acid, D - 3 - 4 - diidroxibutanu00d3ico,Acid (4S) - 2 - amino - 4 - diidroxipentanu00d3ico; acids nuclu00c9icos encoders of a D - xylose or recombinant for biossu00cdntese of 1,2,4 - butanotriol, caffeic acid (4S) - 2 - amino - 4 - diidroxipentanu00d3ico, acid (D - 3 - 4 - diidroxibutanu00d3ico, caffeic acid (4S) - 2 - amino - 4.5 - diidroxipentanu00d3ico vector knock-out; A 3 - desoxi - D - glicero - pentulossonato aldolase, entity cell recombinant, cu00c9lula recombinant.The process for research of polinucleotu00cddeos candidates encoding enzymes, antibody. [P] . BRPI0714439A2 . 2014-04-08

机译： D-1,2,4-丁酸三硝酸丁酯1,2,4-丁酸的制备方法（D-3.4-diidroxibutan u00d3ico，酸3-脱氧-D-gliceropentan u00d3ico，酸（4S）-2 -氨基-4-diidroxipentan u00d3ico; D-1,2,4-丁三醇三羟甲基乙烷（D-1,2,4-丁三醇，D-木糖脱氢酶，酸.D-xil u d00nico，desidratase酸，3-脱氧- gliceropentan u00d3ico酸，D-3-4-二溴代丁烷 u00d3ico，酸（4S）-2-氨基-4-diidroxipentan u00d3ico; D-木糖或重组体的酸nucl u00c9icos编码器，1,2 ，4-丁三醇，咖啡酸（4S）-2-氨基-4-二溴代西an丹 u00d3ico，酸（D-3-4-diidroxibutan u00d3ico，咖啡酸（4S）-2-氨基-4.5-diidroxipentan u00d3ico -out; A 3-去氧-D -glicero-戊糖醛酸钠醛缩酶，实体细胞重组体，c9重组体。研究编码酶，抗体的多核苷酸候选物的方法。
4. A compound comprising a modified oligonucleotide with a nucleobase sequence consisting of 20 linked nucleosides according to EP-B1-2563920 claim 1 (SEQ ID NO: 80), wherein the modified oligonucleotide comprises: a gap segment consisting of ten linked deoxynucleosides; a 5 'wing segment consisting of five linked nucleosides; and a 3 'wing segment consisting of five linked nucleosides; wherein the gap segment is positioned between the 5 'wing segment and the 3' wing segment, wherein each nucleoside of each wing segment comprises a 2'-O-methoxyethyl sugar; wherein each cytosine of the modified oligonucleotide is a 5-methyl cytosine, and wherein each internucleoside linkage of the modified oligonucleotide is a phosphorothioate linkage; and in particular inotersen; and derivatives thereof, such as salts thereof, including sodium salts, as protected by EP-B1-2563920. [P] . NL300963I9 . 2019-01-16

机译： 6.一种化合物，其包含具有根据20的EP-B1-2563920（SEQ ID NO：80）的具有由20个连接的核苷组成的核碱基序列的修饰的寡核苷酸，其中所述修饰的寡核苷酸包含：由十个连接的脱氧核苷组成的缺口片段;和由五个连接的核苷组成的5'翼区段; 3'翼段由五个连接的核苷组成;其中所述间隙片段位于5'侧翼片段和3'侧翼片段之间，其中每个侧翼片段的每个核苷包含2'-O-甲氧基乙基糖;其中修饰的寡核苷酸的每个胞嘧啶是5-甲基胞嘧啶，并且其中修饰的寡核苷酸的每个核苷间键是硫代磷酸酯键;特别是inotersen;及其衍生物，例如由EP-B1-2563920保护的其盐，包括钠盐。
5. A compound comprising a modified oligonucleotide with a nucleobase sequence consisting of 20 linked nucleosides according to EP-B1-2563920 claim 1 (SEQ ID NO: 80), wherein the modified oligonucleotide comprises: a gap segment consisting of ten linked deoxynucleosides; a 5 'wing segment consisting of five linked nucleosides; and a 3 'wing segment consisting of five linked nucleosides; wherein the gap segment is positioned between the 5 'wing segment and the 3' wing segment, wherein each nucleoside of each wing segment comprises a 2'-O-methoxyethyl sugar; wherein each cytosine of the modified oligonucleotide is a 5-methyl cytosine, and wherein each internucleoside linkage of the modified oligonucleotide is a phosphorothioate linkage; and in particular inotersen; and derivatives thereof, such as salts thereof, including sodium salts, as protected by EP-B1-2563920. [P] . NL300963I1 . 2019-01-08

机译： 6.一种化合物，其包含具有根据20的EP-B1-2563920（SEQ ID NO：80）的具有由20个连接的核苷组成的核碱基序列的修饰的寡核苷酸，其中所述修饰的寡核苷酸包含：由十个连接的脱氧核苷组成的缺口片段;和由五个连接的核苷组成的5'翼区段; 3'翼段由五个连接的核苷组成;其中所述间隙片段位于5'侧翼片段和3'侧翼片段之间，其中每个侧翼片段的每个核苷包含2'-O-甲氧基乙基糖;其中修饰的寡核苷酸的每个胞嘧啶是5-甲基胞嘧啶，并且其中修饰的寡核苷酸的每个核苷间键是硫代磷酸酯键;特别是inotersen;及其衍生物，例如由EP-B1-2563920保护的其盐，包括钠盐。