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大鲵虹彩病毒主衣壳蛋白的原核表达及多抗制备和应用

摘要

本发明公开了一种大鲵虹彩病毒主衣壳蛋白的原核表达及多抗制备和应用,其步骤是:1)根据GSIV-MCP基因序列,设计引物;2)用EPC细胞培养GSIV,抽提病毒核酸为模板,PCR扩增;3)将纯化的PCR产物插入到PET-32(a),得到重组表达载体;4)重组表达载体转化大肠杆菌感受态细胞,得到重组菌株;5)使用不同IPTG浓度及不同的诱导时间诱导重组菌株,获得最佳诱导条件;6)经过诱导的重组菌株经超声波破碎处理,经蛋白纯化试剂盒纯化,得到纯化的重组蛋白;7)纯化后的重组蛋白采用皮下多点注射法免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体。该多克隆抗体经ELISA效价检测,具有滴度高,特异性强。为GSIV的快速检测试剂盒及大鲵病毒性出血病的防治奠定基础。

著录项

  • 公开/公告号CN102643835A

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2012-08-22

    原文格式PDF

  • 申请/专利号CN201210130004.2

  • 发明设计人 曾令兵;高正勇;张辉;周勇;孟彦;

    申请日2012-04-28

  • 分类号C12N15/34;C12N15/70;C07K14/01;C07K16/08;C07K16/06;G01N33/569;

  • 代理机构武汉宇晨专利事务所;

  • 代理人王敏锋

  • 地址 430223 湖北省武汉市东湖新技术开发区武大园一路8号

  • 入库时间 2023-12-18 07:51:02

法律信息

  • 法律状态公告日

    法律状态信息

    法律状态

  • 2015-01-14

    发明专利申请公布后的驳回 IPC(主分类):C12N15/34 申请公布日:20120822 申请日:20120428

    发明专利申请公布后的驳回

  • 2012-10-03

    实质审查的生效 IPC(主分类):C12N15/34 申请日:20120428

    实质审查的生效

  • 2012-08-22

    公开

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