一种蝇类肠道微生物总DNA的提取方法

摘要

一种蝇类肠道微生物总DNA的提取方法，涉及分子生物学实验技术领域。酚氯仿方法是提取细菌DNA的传统方法，但该方法一般用于实验室纯培养细菌的DNA提取。而环境样本由于基质成份和微生物种类都比较复杂，用酚氯仿方法和试剂盒方法提取总DNA，存在细胞裂解率低、DNA损失严重等缺陷，而且提取物中残留的酶抑制物会影响后续PCR扩增和酶反应效果。对此，本发明在样品前处理、操作步骤、试剂溶液等方面进行了改进；本发明采用STE缓冲液对样品进行前处理；使用溶菌酶使革兰氏阳性球菌充分裂解。本发明提取的蝇类肠道微生物总DNA，用于PCR扩增和16SrRNA文库构建，效果优于国产和进口试剂盒。其操作步骤简单，有效降低了操作过程对样品的污染和对DNA分子的破坏。