在昆虫细胞中表达重组人骨形态发生蛋白的方法

摘要

本发明涉及在昆虫细胞中表达重组人骨形态发生蛋白的方法。所述方法包括以下步骤：将人骨形态发生蛋白(BMP)成熟肽基因片段克隆到改进的昆虫细胞-杆状病毒蛋白质表达载体上，共转染sf9昆虫细胞，制备带有BMP成熟肽基因片段的重组杆状病毒，然后侵染High5昆虫细胞，高效表达BMP成熟肽，再经Ni亲和柱纯化表达的BMP成熟肽。体外细胞碱性磷酸酶活性检测和小鼠体内肌袋包埋诱骨实验表明，表达的BMP2和BMP7均具有异位诱导骨生成的活性。利用昆虫细胞-杆状病毒蛋白质表达系统，每升培养昆虫细胞可获得纯化BMP2或BMP7成熟肽蛋白约40mg，比在CHO细胞中的成本降低至少10倍。