一种外用治疗癌痛的中药复方凝胶及其制备方法

摘要

本发明属于医药技术领域，具体为一种外用治疗癌痛的中药复方凝胶。该复方凝胶中药配方包括穿山龙、延胡索、海风藤、络石藤、川楝子、乳香和没药；该中药复方凝胶的制备方法包括：将中药配方中的各药材粉碎并使用乙醇提取，浓缩减压干燥，以卡波普940（carbopol940）为基质材料制成凝胶，采用LC/MS法对凝胶主要成分的含量进行质量控制。本发明配伍严谨，疗效确切，使用方便，质量稳定，外用安全，可有效治疗癌性疼痛，适于临床使用。

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及外用治疗癌性疼痛的药物组合物及其制备方法，特别是涉及一种以植物中草药为主要原料制成的外用治疗癌性疼痛的中药复方凝胶及其制备方法。    

背景技术

癌痛是恶性肿瘤常见的症状之一，70%～90%的中、晚期癌症患者遭受不同程度的疼痛困扰，严重影响了患者的生活质量。目前癌痛的西医治疗方法主要是在抗肿瘤治疗基础上加药物三阶梯止痛法、生物治疗、神经阻滞治疗等。尽管如此，经过常规治疗仍有36%～50% 的癌症患者忍受的疼痛程度足以影响他们的日常生活，且主要的镇痛药物( 阿片类药物和非甾体类抗炎药物) 因其副作用而使临床应用受限^[1~5]。目前药物是治疗癌性疼痛的有效措施^[6]，三阶梯止痛疗法作用速度快、止痛力强，但长期服用阿片类药物效果欠佳且易产生如便秘、恶心、运动和认知障碍、呼吸抑制、依赖性等不良反应^[7]。 

中医学以其独特的理论体系在治疗癌痛领域发挥了重要作用，特别是经过近20年的迅速发展，形成了口服、外用、静脉给药、吸入给药等多途径治疗方法，同时开展了治疗癌性疼痛的临床随机对照试验研究，结果发现中药具有良好的镇痛效果^[8]。长期大量口服或静脉给药给患者带来不便，且有可能对胃肠道产生不良影响，近年来中医外治法治疗癌性疼痛具有一定优势，通过体表、穴位、直肠、鼻腔等部位直接给药，经过皮肤、经络吸收使药达病所，避免了药物对胃肠道的刺激，提高了药物起效速度及其安全性和患者的依从性；具有止痛抑癌、使用方便、不良反应小、无依赖性、作用柔和等特点。 

目前癌性疼痛治疗领域存在以下问题：（1）西医治疗方法主要是在抗肿瘤治疗基础上加药物三阶梯止痛法、生物治疗、神经阻滞治疗，但是临床疗效并不理想；（2）阿片类药物是治疗癌性疼痛的主要药物，而长期服用阿片类药物易产生如便秘、恶心、运动和认知障碍、呼吸抑制、依赖性等不良反应；（3）中药治疗癌性疼痛的主要给药方式为口服和静脉给药，长期大量口服或静脉给药给患者带来许多不便；（4）癌性疼痛多发生于晚期肿瘤患者，在肿瘤治疗的基础上长期口服或静脉给药，增加了患者的胃肠道负担和身体负荷，影响患者的生活质量；（5）目前中药外用治疗癌性疼痛的药物多为膏剂、散剂和酊剂等传统剂型，限制了中医外治癌痛的发展，需要进行剂型改革。 

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发明内容

本发明目的在于提供一种止痛确切、使用方便、安全可控，适用于各种癌性疼痛治疗的外用中药复方凝胶及其制备方法。 

本发明提供的治疗癌性疼痛的外用中药复方凝胶，其药物组份包括穿山龙、延胡索、海风藤、络石藤、川楝子、乳香和没药。 

上述中药复方凝胶，其组份配方可为：穿山龙40~60克、延胡索20~40克、海风藤20~40克、络石藤20~40克、川楝子6~12克、乳香6~12克和没药6~12克。 

本发明的药复方凝胶也称为龙藤通络凝胶。 

本发明中，中药复方凝胶配方优选如下3个：龙藤通络凝胶1号方、龙藤通络凝胶2号方和龙藤通络凝胶3号方；最优选为龙藤通络凝胶2号方。 

龙藤通络凝胶1号方为：穿山龙（Rhizoma Dioscoreae Nipponicae）40克、延胡索（Rhizoma Corydalis）20克、海风藤（Caulis Piperis Kadsurae）20克、络石藤（Caulis Trachelospermi）20克、川楝子（Fructus Tooesndan）6克、乳香（Boswellia carteri）6克和没药（Commiphora Myrrha）6克。 

龙藤通络凝胶3号方为：穿山龙（Rhizoma Dioscoreae Nipponicae）60克、延胡索（Rhizoma Corydalis）40克、海风藤（Caulis Piperis Kadsurae）40克、络石藤（Caulis Trachelospermi）40克、川楝子（Fructus Tooesndan）12克、乳香（Boswellia carteri）12克和没药（Commiphora Myrrha）12克。 

龙藤通络凝胶2号方为：穿山龙（Rhizoma Dioscoreae Nipponicae）50克、延胡索（Rhizoma Corydalis）30克、海风藤（Caulis Piperis Kadsurae）30克、络石藤（Caulis Trachelospermi）30克、川楝子（Fructus Tooesndan）9克、乳香（Boswellia carteri）9克和没药（Commiphora Myrrha）9克。 

本发明提供的治疗癌性疼痛的外用中药复方凝胶制备方法如下： 

（1）提取：将中药配方中的所述7味药材，粉碎后以体积浓度为60-80%乙醇回流提取，提取次数为2~3次，每次加乙醇量为总体积的6~10倍量，提取时间分别为1~3h., 提取液合并，回收乙醇，浓缩，减压干燥至稠，得药物提取浸膏； 

（2）制剂：称取处方量的卡波普940均匀分散于适量蒸馏水中，溶胀过夜；将药物提取浸膏以乙醇溶解，在搅拌状态下加入卡波普940中；再依次加入氮酮、丙二醇、甘油，搅拌至混合均匀，卡波普940、蒸馏水、药物提取浸膏、丙二醇、甘油和氮酮的量比关系为：0.6~1.0：80.0~90.0：6.0~8.0：3.0~5.0：1.0~3.0：1.0~3.0；缓慢滴加三乙醇胺；调pH值至6.0~6.5，搅拌均匀，即得所述中药复方凝胶制剂 。

质量控制：采用LC/MS法对配方中延胡索的主要成分延胡索乙素的含量进行测定：色谱柱：XTerraR MS C₁₈column，2.1mm×150 mm，5μm，；流动相：甲醇：水 （85:15，v/v）；流速：0.3mL/min；柱温：40℃；进样量：5μL；运行时间：3min。 质谱条件：离子源为ESI源；负离子模式检测；扫描方式为多反应监测（MRM）；用于定量分析的离子为m/z=165；毛细管电压4000V；干燥气流速8L/min；干燥气温度350℃；雾化器压力40psi；裂解器电压105eV；碰撞能量为33。 

使用方法：使用时清洁皮肤，用棉签沾取凝胶涂于患处皮肤，涂搽面积约大于痛处皮肤1cm，剂量为0.5g/cm²，1日2次。 

本发明提供的中药复方凝胶，是发明人根据多年临床经验总结出的外用治疗癌性疼痛的经验方。癌性疼痛包括各种由于肿瘤的发生、发展导致的疼痛，尤其是骨癌性疼痛。 

附图说明

图1. 龙藤通络凝胶1号、2号和3号方对骨癌痛大鼠机械痛的影响（均数±标准差，n=10）。 

图2.  龙藤通络凝胶1号、2号和3号方对骨癌痛大鼠热痛的影响（均数±标准差，n=10）。 

图3.  龙藤通络凝胶2号方的UPLC指纹图谱。 

图4. 不同剂量龙藤通络凝胶2号方或空白凝胶对大鼠体质量的影响（n=10）。 

图5. 不同剂量龙藤通络凝胶2号方或空白凝胶外用42天对大鼠组织病理的影响（HE染色，放大倍数：400x）。A: 龙藤通络凝胶2号方, 0.5 g/cm²/day， B: 龙藤通络凝胶2号方, 1 g/cm²/day， C: 空白凝胶；1：脾脏，2：肝脏，3：肾脏，4：心脏，5：皮肤。三组大鼠的病理组织相似，均无组织损伤。 

图6.  Walker-256乳腺癌细胞对大鼠胫骨骨质的破坏。A：胫骨注射癌细胞造模后第0天（造模前），B：胫骨注射癌细胞造模后第21天。肿瘤细胞被注射到大鼠胫骨骨髓腔，放大倍数：400x。 

图7. 龙藤通络凝胶2号方对骨癌痛大鼠体重的影响。 

图8. 龙藤通络凝胶2号方对骨癌痛大鼠机械痛的影响（均数±标准差，n=10）。 

图9. 龙藤通络凝胶2号方对骨癌痛大鼠热痛觉过敏的影响（均数±标准差，n=10）。 

图10. 龙藤通络凝胶2号方对血清Ⅰ型胶原吡啶交联终肽（ICTP）水平的影响（均数±标准差，n=5）。 

图11. 龙藤通络凝胶2号方对血清骨特异性碱性磷酸酶（BAP）水平的作用（均数±标准差，n=5）。 

图12. A：大鼠胫骨的抗酒石酸酸性磷酸酶染色。胫骨病理组织在胫骨注射3.5×10⁵ Walker 256乳腺癌细胞造模后第0（a, c, e）和21（b, d, f）天取材，a 和 b为假手术组（胫骨注射PBS代替癌细胞），c 和 d 为空白凝胶组，e 和 f 是龙藤通络凝胶2号方组；B: 三组大鼠胫骨的破骨细胞活性。肿瘤细胞导致破骨细胞增多，龙藤通络凝胶2号方能够降低破骨细胞数目。 

图13.  A：大鼠胫骨的碱性磷酸酶染色。胫骨病理组织在胫骨注射3.5×10⁵ Walker 256乳腺癌细胞造模后第0（a, c, e）和21（b, d, f）天取材，a 和 b为假手术组（PBS代替癌细胞），c 和 d 为空白凝胶组，e 和 f 是龙藤通络凝胶2号方组。B：三组大鼠胫骨的成骨细胞活性。肿瘤细胞导致成骨细胞增多，龙藤通络凝胶2号方能够降低成骨细胞数目。 

具体实施方式

本发明配方是由主药穿山龙，配伍行气止痛药延胡索、川楝子，藤类药海风藤、青风藤以及树脂类药乳香、没药组成。现就其成份的药理作用予以阐述。 

穿山龙：根据中医理论，具有舒筋活血，通络止痛之功； 

延胡索、川楝子：有行气止痛的作用，现代药理研究表明延胡索具有镇痛、镇静、安定和催眠作用；

海风藤、络石藤：依据中医取象比类的理论，藤类药物具有通络止痛的良好效果；

乳香、没药：具有行气活血，消肿止痛的作用。

全方共奏行气活血、通络止痛之功。 

“不通则痛”和“不荣则痛”是癌性疼痛主要的病因病机。本虚标实为癌痛的病理特征，全身虚，局部实，多是因虚而得癌病，因实而致癌痛。风寒闭阻、热毒内蕴、痰湿结聚、气滞血瘀、阴阳亏虚等为癌痛的基本病机,它们常相互影响、相互转化，互为因果而成虚实夹杂、寒热相间的证候。中医药外治法主要的组方思路为：理气行气、活血化瘀、解毒散结、通络止痛，是中药治疗癌痛最常用的方法之一。该方行气活血、通络止痛、寒热并用，符合癌性疼痛的病机和外治组方思路。 

综上所述，为该配方外用治疗癌性疼痛取得确切疗效提供了理论依据。 

发明人经多年对龙藤通络凝胶进行质量控制和安全性评价，并对其外用治疗大鼠骨癌痛模型进行实验研究，结果表明龙藤通络凝胶质量稳定可靠，龙藤通络凝胶1号、2号和3号方均可以减轻骨癌痛大鼠机械痛和热痛，且以龙藤通络凝胶2号方疗效最佳。龙藤通络凝胶2号方能够降低骨癌痛大鼠外周血中Ⅰ型胶原吡啶交联终肽（ICTP）和骨特异性碱性磷酸酶（BAP）的水平，抑制破骨细胞和成骨细胞活性。病理学和生化检查研究表明龙藤通络凝胶2号方外用安全，未见明显毒副作用。这些研究为该配方治疗癌性疼痛取得良好疗效提供了实验依据，具体实验数据见表1、表2、表3和说明书附图。 

表1. 不同剂量的龙藤通络凝胶2号方对大鼠心肌酶谱的影响 

P>0.05，差异无统计学意义。

表2. 不同剂量的龙藤通络凝胶2号方对大鼠肝功能的影响 

P>0.05，差异无统计学意义。

表3. 不同剂量的龙藤通络凝胶2号方对大鼠肾功能的影响 

P>0.05，差异无统计学意义。

本发明对龙藤通络凝胶1号、2号和3号方对骨癌痛大鼠机械痛的影响（均数±标准差，n=10）进行研究。造模后每天分别给予龙藤通络凝胶1号、2号和3号方外用，第0（造模前）、5、11、17和21天进行机械痛觉测试，癌细胞能够显著降低骨癌痛大鼠模型侧机械痛觉缩足阈值，与空白凝胶相比，龙藤通络凝胶1号、2号和3号方均能够改善骨癌痛大鼠机械痛觉，龙藤通络凝胶2号方能够明显改善骨癌痛机械痛觉，疗效最佳。**P<0.01 vs空白凝胶组，*P<0.05 vs空白凝胶组。参见图1。 

本发明对龙藤通络凝胶1号、2号和3号方对骨癌痛大鼠热痛觉的影响（均数±标准差，n=10）进行研究。造模后每天分别给予龙藤通络凝胶1号、2号和3号方外用，第0（造模前）、4、10、16和20天进行热痛觉测试，癌细胞能够显著降低骨癌痛大鼠模型侧热痛觉缩足阈值，与空白凝胶相比，龙藤通络凝胶1号、2号和3号方均能够改善骨癌痛大鼠热痛觉，龙藤通络凝胶2号方能够明显改善骨癌痛热痛觉，疗效最佳。**P<0.01 vs空白凝胶组，*P<0.05 vs空白凝胶组。参见图2。 

本发明对龙藤通络凝胶2号方的UPLC指纹图谱进行研究，龙藤通络凝胶中的有效成分已用峰值标出。见图3。 

本发明对不同剂量龙藤通络凝胶2号方或空白凝胶对大鼠体质量的影响（n=10）进行研究。大鼠体质量在给药后第0（给药前）、14、28和42天检测，大鼠体质量从第0到42天一直正常增加，三组之间相比均无差异。参见图4。 

本发明对不同剂量龙藤通络凝胶2号方或空白凝胶外用42天对大鼠组织病理的影响（HE染色，放大倍数：400x）进行研究。A: 龙藤通络凝胶2号方, 0.5 g/cm²/day， B: 龙藤通络凝胶2号方, 1 g/cm²/day， C: 空白凝胶；1：脾脏，2：肝脏，3：肾脏，4：心脏，5：皮肤。三组大鼠的病理组织相似，均无组织损伤。参见图5。 

本发明对Walker-256乳腺癌细胞对大鼠胫骨骨质的破坏进行研究。A：胫骨注射癌细胞造模后第0天（造模前），B：胫骨注射癌细胞造模后第21天。肿瘤细胞被注射到大鼠胫骨骨髓腔，放大倍数：400x。参见图6。 

本发明对龙藤通络凝胶2号方对骨癌痛大鼠体重的影响进行研究。在胫骨注射癌细胞造模后第0、5、11、17和21天进行体重测量，在第11到21天，龙藤通络凝胶2号方增加大鼠体重，改善大鼠一般状况。**P <0.01 vs 假手术组; ^##P <0.01 vs 空白凝胶组, n=10。参见图7。 

本发明对龙藤通络凝胶2号方对骨癌痛大鼠机械痛的影响（均数±标准差，n=10）进行研究。造模后第0、5、11、17和21天进行机械痛觉测试，癌细胞能够显著降低骨癌痛大鼠模型侧机械痛觉缩足阈值，与空白凝胶相比，龙藤通络凝胶2号方能够明显改善骨癌痛大鼠机械痛觉，非造模侧（健侧）的机械痛觉缩足阈值没有变化。**P<0.01 vs假手术组; ^#P <0.05, ^##P <0.01 vs空白凝胶组。参见图8。 

本发明对龙藤通络凝胶2号方对骨癌痛大鼠热痛觉过敏的影响（均数±标准差，n=10）进行研究。造模后第0、4、10、16和20天进行热痛觉测试，癌细胞能够显著降低骨癌痛大鼠模型侧缩足潜伏期，与空白凝胶相比，龙藤通络凝胶2号方能够明显改善骨癌痛大鼠热痛觉，非造模侧（健侧）的热痛觉缩足潜伏期没有变化。**P<0.01 vs 假手术组, ^##P <0.01 vs空白凝胶组。参见图9。 

本发明对龙藤通络凝胶2号方对血清Ⅰ型胶原吡啶交联终肽（ICTP）水平的影响（均数±标准差，n=5）进行研究。用ELISA法在造模后第0、5、11、17和21天对大鼠血清ICTP进行检测。与空白凝胶相比，龙藤通络凝胶2号方可以降低血清ICTP水平。**P<0.01 vs 假手术组, ^##P <0.01 vs 空白凝胶组。参见图10。 

本发明对龙藤通络凝胶2号方对血清骨特异性碱性磷酸酶（BAP）水平的作用（均数±标准差，n=5）进行研究。用ELISA法在造模后第0、5、11、17和21天对大鼠血清BAP进行检测。与空白凝胶相比，龙藤通络凝胶2号方可以降低血清BAP水平。**P<0.01 vs 假手术组, ^##P <0.01 vs空白凝胶组。参见图11。 

本发明对大鼠胫骨的抗酒石酸酸性磷酸酶染色和破骨细胞活性进行研究。图 10. A：大鼠胫骨的抗酒石酸酸性磷酸酶染色。胫骨病理组织在胫骨注射3.5×10⁵ Walker 256乳腺癌细胞造模后第0（a, c, e）和21（b, d, f）天取材，a 和 b为假手术组（胫骨注射PBS代替癌细胞），c 和 d 为空白凝胶组，e 和 f 是龙藤通络凝胶2号方组；B: 三组大鼠胫骨的破骨细胞活性。肿瘤细胞导致破骨细胞增多，龙藤通络凝胶2号方能够降低破骨细胞数目。参见图12。 

本发明对大鼠胫骨的碱性磷酸酶染色和成骨细胞活性进行研究。图 11. A：大鼠胫骨的碱性磷酸酶染色。胫骨病理组织在胫骨注射3.5×10⁵ Walker 256乳腺癌细胞造模后第0（a, c, e）和21（b, d, f）天取材，a 和 b为假手术组（PBS代替癌细胞），c 和 d 为空白凝胶组，e 和 f 是龙藤通络凝胶2号方组。B：三组大鼠胫骨的成骨细胞活性。肿瘤细胞导致成骨细胞增多，龙藤通络凝胶2号方能够降低成骨细胞数目。参见图13。 

本发明对龙藤通络凝胶1号方和3号方，以及其它一些处方，都作过类似于2号方那样的上述各种研究，都得到类似于2号方那样的基本结果，这里不一一重复。