一种化疗药物脉冲缓释植入剂及其制备方法

摘要

本发明提供了一种化疗药物脉冲缓释植入剂及其制备方法。该缓释植入剂由化疗药物活性成分和辅料组成；所述辅料为聚乳酸与羟基乙酸共聚物；所述化疗药物活性成分为吉西他滨、盐酸吉西他滨、阿霉素、5-氟尿嘧啶、顺铂、卡铂和紫杉醇中任一种。本发明提供的制备包括如下步骤：所述化疗药物活性成分与所述辅料在溶剂中混合均匀，去除所述溶剂后，将所述化疗药物活性成分与所述辅料的混合物进行真空干燥；然后将所述混合物依次经粉碎过筛和熔融混炼即得所述缓释植入剂。本发明提供的缓释植入剂的优点是在第一次药物释放控制肿瘤生长一定时期后进行第二次药物释放，有效延长局部有效药物浓度，达到一次给药两次释放的效果，避免第二次药物植入带来的副损伤。

说明书

技术领域

本发明涉及一种化疗药物脉冲缓释植入剂及其制备方法，属于化疗药物缓释剂及其制备领域。

背景技术

目前临床应用较为广泛的是先声药业生产的中人氟安(5-氟尿嘧啶)缓释植入剂，其特点是缓释药物可以植入瘤体或放置于瘤床在肿瘤局部缓慢释放，达到局部高浓度而全身血循环低浓度，在保持长时间局部有效浓度的同时降低血循环药物浓度，因此可以起到增效减毒的作用。在临床实践中已正式其能够延长患者生存期并且毒副作用极小。其缺点是药物只能释放一次，当缓释剂内药物全部释放后需要重新给药。在有些需要开腹才能达到药物植入目的的腹部肿瘤，其应用受到限制。

发明内容

本发明的目的是提供一种化疗药物脉冲缓释植入剂及其制备方法。

本发明提供的化疗药物脉冲缓释植入剂，由化疗药物活性成分和辅料组成；所述辅料为聚乳酸与羟基乙酸共聚物。

上述的缓释植入剂中，所述聚乳酸与羟基乙酸共聚物(PLGA)的数均分子量可为6000-25000，如6000。

上述的缓释植入剂中，所述化疗药物活性成分为吉西他滨、盐酸吉西他滨、阿霉素、5-氟尿嘧啶、顺铂、卡铂和紫杉醇中任一种。

上述的缓释植入剂中，所述化疗药物活性成分与辅料的质量份数比可为(1-3)∶(17-19)；具体可为1∶9、1∶19或3∶17。

上述的缓释植入剂中，所述缓释植入剂可为微球状；所述微球的粒径可为80目-150目；80目-100目、100目-120目或120目-150目。

本发明还提供了上述缓释植入剂的制备方法，包括如下步骤：将所述化疗药物活性成分与所述辅料在溶剂中混合均匀，去除所述溶剂后，将所述化疗药物活性成分与所述辅料的混合物进行真空干燥；然后将所述混合物依次经粉碎过筛和熔融混炼即得所述缓释植入剂。

上述的方法中，所述溶剂可为二氯甲烷或氯仿；所述真空干燥的温度可为35℃-85℃，如35℃；所述真空干燥的时间可为4小时-16小时，如4小时。

上述的方法中，所述熔融混炼的混度可为110℃-130℃；具体可为110℃、120℃或130℃。

上述的方法中，所述方法还包括将所述缓释植入剂进行微球处理的步骤；所述微球处理的温度可为50℃-60℃，具体可为50℃、55℃或60℃；所述微球处理的时间可为5分钟-15分钟，具体可为5分钟、10分钟或15分钟。

本发明提供的化疗药物脉冲缓释植入剂的优点是在第一次药物释放控制肿瘤生长一定时期后进行第二次药物释放，有效延长局部有效药物浓度，达到一次给药两次释放的效果，避免第二次药物植入带来的副损伤。

附图说明

图1为样品A在大鼠体内的释放度与时间的关系。

图2为样品A、F和G的体外释放度与时间的关系。

图3为样品A、H和I的体外释放度与时间的关系。

图4为样品A、J和K的体外释放度与时间的关系。

图5为样品A、L和M的体外释放度与时间的关系。

具体实施方式

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。

下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

下述实施例中的盐酸吉西他滨购自北京华瑞前景科技有限公司，含量为99.94％，有关物质0.02％，炽灼残渣0.01％，重金属≤10ppm。

本发明下述实施例中熔融混炼的ZR-混炼机由合肥工业大学控释药物研究室提供研制。

本发明下述实施例中粉碎用的粉碎机为高速万能粉碎机的型号为FW80，由天津市泰斯特仪器有限公司提供。

本发明下述实施例中微球处理的微球处理器为ZR-微球处理器，由合肥工业大学控释药物研究室提供。

实施例1、盐酸吉西他滨微球的制备

将盐酸吉西他滨粉碎，过200目筛，加入PLGA(数均分子量为6000)二氯甲烷溶液(盐酸吉西他滨和PLGA的质量份数比为1∶9)中，搅拌均匀，挥发溶剂至干，置真空干燥箱中(-0.1Mpa、35℃)干燥4小时，取出粉碎过80目筛，再干燥24小时，取出药料，置已恒温至120℃的熔融混炼设备中混炼，冷却，粉碎，过筛，取100目至120目筛之间的微球，用微球处理器于55℃处理10分钟，即得盐酸吉西他滨微球，标记为样品A。

按照上述相同的方法制备了盐酸吉西他滨微球，分别标记为样品B和样品C。

1.1盐酸吉西他滨微球含量、有关物质及体外释放度检测方法

1.1.1含量测定

照高效液相色谱法(中国药典2010年版二部附录VD)测定。

色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以醋酸铵缓冲液(取醋酸铵3.85g加水800ml使溶解，加冰醋酸调pH值至5.7，加水至1000ml-甲醇(90∶10)为流动相，检测波长268nm。理论板数按盐酸吉西他滨峰计算应不低于2000，盐酸吉西他滨峰与胞嘧啶峰的分离度应大于2.0。

测定法：取本品25mg，置乳钵中，加水1～2滴，充分研磨，再加水2ml研磨后，将溶液转移至250ml量瓶中，残渣继续用水约20ml分次研磨，最后分别将乳钵洗净并全部转移至量瓶中，超声5分钟，放冷，用水定容，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液，精密量取20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。另取经105℃干燥至恒重的盐酸吉西他滨对照品适量，同法操作，按外标法以峰面积计算，即得。

1.1.2有关物质

照盐酸吉西他滨含量测定项下色谱条件，取本品，精密称定，置乳钵中，用流动相充分研磨，制成每1ml中含1mg的溶液，作为供试品溶液，精密量取适量，用流动相稀释制成每1ml中含10μg的溶液，作为对照溶液。取对照溶液20μl，注入液相色谱仪，调节仪器灵敏度使主成分峰的峰高约为满量程的25％；再分别精密量取供试品溶液和对照溶液各20μl分别注入液相色谱仪，记录供试品的色谱图至主成分峰保留时间的3倍，供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，各杂质峰面积的和，不得大于对照溶液主成分峰的峰面积。

1.1.3体外释放度检测方法

释放介质：磷酸盐缓冲液(PH7.4)；操作容器：500ml具塞锥形瓶；介质用量：300ml；

模拟温度：37.0±0.5℃；转速：100r/min。

将水浴恒温振荡器恒温至37.0±0.5℃，量取规定量释放介质，分别注入每个操作容器内，并盖上塞子，置水浴恒温振荡器内恒温至37.0±0.5℃，取本品6份，每份100mg，分别投入各个操作容器内(每只操作容器投入一份)，按规定转速、启动回旋振摇，并立即开始计时，在规定取样时间点停机后，取上清液10ml，立即经0.45μm微孔滤膜滤过，并及时补充同温等量溶剂，继续启动回旋振摇。

释放量检测：取上述续滤液，照紫外-可见光分光度法(中国药典2010年版二部附录IV A)中对照品比较法，于268nm波长处检测，算出释放量。

1.2检测药物在微球制作过程中的稳定性及生物学特性

1.2.1检测药物在微球制作过程中的稳定性

检测有关物质考察微球制作过程中的稳定性，结果见表1。

表1盐酸吉西他滨原料药及微球有关物质限度

由表1可知，盐酸吉西他滨原料药按本发明提供的方法制备盐酸吉西他滨微球，盐酸吉西他滨性质稳定。

1.2.2生物学特性

(1)盐酸吉西他滨微球体内释放度

试验药品：盐酸吉西他滨微球(样品A)

药用吐温-80，上海申宇医药化工有限公司

试验动物：Wista大鼠21只。

试验操作：取样品A 4mg(含盐酸吉西他滨0.4mg)置西林瓶内，加注射用水0.5ml，加吐温-80一滴，混匀，使之成为混悬液，注入大鼠右后腿内侧肌内。分别在给药后的24、120、240、360、480、600、720小时各取三只大鼠内微球(手术切开微球注入部位，用蒸馏水洗出微球，收集洗涤液，滤过，收集微球)，测定微球残留药量，计算释放度，结果见表2及图1。

表2样品A大鼠体内释放度-时间关系

由表2和图1可知，吉西他滨微球在大鼠体内释药呈现两次突释现象，第一次在120小时内释药约50％，360小时后开始呈现第二次突释，在720小时内释放完全。

(2)盐酸吉西他滨微球对动物组织的局部刺激

在步骤(1)的盐酸吉西他滨微球大鼠体内释放度试验中，各时间点取样时观察吉西他滨微球对局部组织的刺激，情况见表3。

表3盐酸吉西他滨微球大鼠体内给药各取样点局部刺激现象

由表可知，盐酸吉西他滨微球大鼠右后腿内侧肌内注入24小时时未见明显病理变化，120小时后组织渗透液较多，但未见其他病理变化。因此，盐酸吉西他滨微球该剂量注入大鼠右后腿内侧肌内安全可行。

实施例2、盐酸吉西他滨微球的制备

按照与实施例1中相同的方法制备盐酸吉西他滨微球，不同之处在于熔融混炼温度分别为110℃和130℃，制备的微球分别标记为样品D和样品E。

考察盐酸吉西他滨在110℃、120℃、130℃熔融混炼时的稳定性，检测指标为盐酸吉西他滨的有关物质。结果见表4。

表4样品D、A和E的有关物质限度

由表4可知：熔融混炼温度在110℃～130℃，盐酸吉西他滨稳定，优选熔融混炼温度为120℃。

实施例3、盐酸吉西他滨微球的制备

按照与实施例1中相同的方法制备盐酸吉西他滨微球，不同之处在于将微球分别过80～100目和120～150目筛，制备的微球分别标记为样品F和样品G。

检测样品A、F和G的体外释放度，结果见表5及图2。

表5样品A、F和G的体外释放度与时间的关系

由表5和图2可知，微球粒径在80～100目筛、100～120目筛之间，盐酸吉西他滨微球体外释放度能达项目设计要求，考虑临床应用时粒径越小越方便，优选100～120目筛之间的微球。

实施例4、盐酸吉西他滨微球的制备

按照与实施例1中相同的方法制备盐酸吉西他滨微球，不同之处在于微球处理温度分别为50℃和60℃，制备的微球分别标记为样品H和样品I。

检测样品A、H和I的体外释放度，结果见表6及图3。

表6样品H、A和I的体外释放度与时间关系

实施例5、盐酸吉西他滨微球的制备

按照与实施例1中相同的方法制备盐酸吉西他滨微球，不同之处在于微球处理时间分别为5分钟和10分钟，制备的微球分别标记为样品J和样品K。

检测样品A、J和K的体外释放度，结果见表7及图4。

表7样品J、A和K的体外释放度与时间的关系

由表6、表7、图3和图4可知，盐酸吉西他滨初微球最佳处理温度为55℃，处理时间10分钟与15分钟均可，选10分钟为微球处理时间。因此，盐酸吉西他滨初微球处理条件为55℃处理10分钟。

实施例6、盐酸吉西他滨微球的制备

按照与实施例1中相同的方法制备盐酸吉西他滨微球，不同之处在于盐酸吉西他滨与PLGA的质量份数比分别为1∶19和3∶17，制备的微球分别标记为样品L和样品M。

检测样品A、L和M的体外释放度，结果见表9和图5所示。

表9样品L、A和M的体外释放度与时间的关系

由表9可知，微球中含有质量百分含量为10％的盐酸吉西他滨时(即盐酸吉西他滨与PGLA的质量份数比为1∶9)，其体外释放度较好，优选10％含量。

实施例7、盐酸吉西他滨缓释微球的加速释放试验

因PLGA是生物可降解辅料，须冷处保存，所以盐酸吉西他滨微球需冷处保存，根据化学药物稳定性研究技术指导原则及2010版中国药典附录稳定性研究指导原则要求，冷处保存的药品其加速试验条件为温度25℃±2℃、RH60％±10％，因此，在此条件下对样品A进行了加速释放试验考核。

(1)加速释放试验条件：温度25℃±2℃、RH60％±10％。

(2)加速释放试验取样时间：第0、1、2、3个月末取样。

(3)加速释放试验检测考察指标：性状、含量、有关物质、释放度。

(4)加速释放试验结果见表10。

表10样品A的加速释放试验报告

由表10可知，盐酸吉西他滨微球于温度25℃±2℃、湿度RH60％±10％条件下放置3个月，质量稳定。

实施例8、盐酸吉西他滨缓释微球的加速释放试验

根据化学药物稳定性研究技术批导原则及2010版中国药典要求，光照试验条件为：供试品开口放在照度为4500Lx±500Lx的日光灯下，放置10天，于第5天和第10天取样，

根据化学药物稳定性研究技术指导原则及2010版中国药典附录稳定性研究指导原则要求，对样品A进行了光照加速释放试验考核。

(1)光照释放试验条件：供试品开口放在照度为4500Lx±500Lx的日光灯下，放置10天。

(2)光照释放试验取样时间：第0、5、10天取样。

(3)光照释放试验检测考察指标：性状、含量、有关物质、释放度。

(4)光照释放试验结果见表11。

表11样品A的光照释放试验报告

由表11可知，盐酸吉西他滨微球在照度为4500Lx±500Lx的日光灯下，放置10天，质量稳定。