初级胆汁酸及次级胆汁酸生成调节剂

摘要

本发明的初级胆汁酸及次级胆汁酸生成调节剂含有α-葡萄糖苷酶活性抑制成分，优选含有来源于选自由五层龙属植物、桑及匙羹藤组成的组中的至少1种植物的成分。

说明书

技术领域

本发明涉及初级胆汁酸及次级胆汁酸生成调节剂。

背景技术

对脂肪的消化吸收起着重要作用的胆汁中含有很多胆汁酸。该胆汁酸 在肝脏中以胆固醇为原料被生物合成，作为初级胆汁酸从肝脏向胆道系统 分泌。初级胆汁酸主要含有胆酸、鹅脱氧胆酸，与甘氨酸或牛磺酸结合而 形成结合型胆汁酸，从胆道向肠内分泌。所分泌的胆汁酸通过作为表面活 性剂起作用从而参与食物性脂类的消化吸收。肠内的大部分胆汁酸从回肠 末端被再吸收后，经由门静脉回收至肝脏，再次被利用。若胆汁酸不足， 则脂类的消化吸收效率降低，产生消化不良及营养源的不足。已知若胆汁 酸的生成降低，则胆固醇的消耗也降低，引起血中胆固醇量的上升。

另一方面，作为胆汁分泌的初级胆汁酸通过一部分肠内细菌转变成次 级胆汁酸。次级胆汁酸包含脱氧胆酸、石胆酸及熊脱氧胆酸等那样的初级 胆汁酸中不含的成分，并且，怀疑有助于大肠癌的发病。

因此，为了降低肠内的次级胆汁酸的量，正在进行具有次级胆汁酸的 生成抑制作用的成分及具有吸附作用的成分等的开发。

由于胆汁酸的生成与胆固醇的消耗有关，所以开发了提高胆汁酸的生 成量来降低血中胆固醇的技术。例如在日本特开2004-051615号公报中公 开了以壳聚糖-乳清酸盐作为有效成分的胆汁酸吸附剂。关于该胆汁酸吸附 剂，记载了壳聚糖-乳清酸盐吸附除去肠道内的胆汁酸而抑制胆汁酸的肠肝 循环，结果促进由胆固醇向胆汁酸的异化作用。

此外，日本特开2001-302529号公报中公开了含有茶提取物的胆汁酸 生成促进剂。关于该胆汁酸生成促进剂，记载了通过儿茶素片剂使血清胆 汁酸浓度提高。

另一方面，关于次级胆汁酸的生成抑制已知有着眼于肠内细菌的技术。 例如，日本专利第3572103号公报中公开了以规定的低聚半乳糖作为有效 成分的次级胆汁酸降低剂，记载了该低聚半乳糖抑制人体的肠内的次级胆 汁酸的生成。此外，在日本特开2006-314219号公报中发现特定的肠内细 菌株具有将胆汁酸摄取到菌体内的性质，并公开了利用该性质来吸附胆汁 酸的方法。

发明内容

发明要解决的问题

然而，提高在生物体中生物合成的胆汁酸即初级胆汁酸的生成、且直 接参与到生物体内的生物合成系统中而提高胆汁酸的生物合成的胆汁酸生 成促进剂是未知的。在日本特开2004-051615号公报中由于使胆汁酸本身 吸附到壳聚糖-乳清酸盐上，所以并不是使在生物体内能够利用的胆汁酸的 量增加。

日本特开2001-302529号公报中，虽然测定了血清胆固醇及血清胆汁 酸量，但由于并非合格地反映胆汁酸的非常封闭的肠肝循环的状态，所以 实质的初级胆汁酸的生成量不一定增加。此外，由于原本血清胆汁酸在急 性肝炎、胆汁淤积或饭后的情况下也上升，所以关于胆汁酸的生成量本身 并不清楚。

进而，尽管初级胆汁酸与次级胆汁酸的生成密切相关，但上述的文献 记载的技术均只考虑了初级胆汁酸及次级胆汁酸中的任一者，直接调节它 们两者的量的技术迄今为止未知。

因此，本发明的目的在于，提供将在生物体内生成的初级胆汁酸和次 级胆汁酸的量调节为对生物体适宜的量的初级胆汁酸及次级胆汁酸生成调 节剂。

用于解决问题的手段

本发明包含以下的方式。

[1]一种初级胆汁酸及次级胆汁酸生成调节剂，其含有α-葡萄糖苷酶活 性抑制成分。

[2]根据[1]所述的初级胆汁酸及次级胆汁酸生成调节剂，其中，所述α- 葡萄糖苷酶活性抑制成分的蔗糖酶50%抑制（IC₅₀）为0.0001μg/ml以上且 800μg/ml以下。

[3]根据[1]或[2]所述的初级胆汁酸及次级胆汁酸生成调节剂，其中，所 述α-葡萄糖苷酶活性抑制成分来源于选自由五层龙属植物、桑及匙羹藤组 成的组中的至少1种植物。

[4]根据[1]～[3]中任一项所述的初级胆汁酸及次级胆汁酸生成调节剂， 其中，所述α-葡萄糖苷酶活性抑制成分是选自五层龙属植物提取物、桑叶 提取物及匙羹藤粉末中的至少1种。

[5]根据[1]～[4]中任一项所述的初级胆汁酸及次级胆汁酸生成调节剂， 其中，所述α-葡萄糖苷酶活性抑制成分是五层龙属植物提取物。

具体实施方式

本发明的初级胆汁酸及次级胆汁酸生成调节剂是含有α-葡萄糖苷酶活 性抑制成分的初级胆汁酸及次级胆汁酸生成调节剂（以下，有时简称为“胆 汁酸生成调节剂”）。

本发明的胆汁酸生成调节剂由于含有α-葡萄糖苷酶活性抑制成分，所 以促进生物体内的胆汁酸的生物合成而提高初级胆汁酸的生成，另一方面， 虽然初级胆汁酸的生成量上升，但是抑制由初级胆汁酸向次级胆汁酸的生 成，使次级胆汁酸的量减少。其结果是，能够将在生物体内生成的初级胆 汁酸和次级胆汁酸这两者的量调节为对生物体适宜的量。

本发明中所谓“调节为对生物体适宜的量”是指，将本药剂的给药后的 量与给药前相比较时，使初级胆汁酸的生成量增多，同时使次级胆汁酸的 生成量减少，使初级胆汁酸相对于次级胆汁酸的量的比值提高。

另外，本说明书中“工序”的词语不仅是独立的工序，在无法与其它的 工序明显区别的情况下，只要实现本工序的所期望的作用，也包括在本用 语中。

本说明书中采用“～”表示的数值范围表示包含“～”的前后记载的数值 分别作为最小值及最大值的范围。

本发明中，在言及各成分的量的情况下，当各成分存在多个时，只要 没有特别说明为单独，则表示存在的多个成分的合计量。

以下，对本发明进行说明。

本发明中的α-葡萄糖苷酶活性抑制成分只要是抑制位于小肠上皮的α- 葡萄糖苷酶的成分即可。作为例子，除了阿卡波糖（acarbose）、伏格列波 糖（voglibose）、米格列醇（miglitol）、莎拉西诺（salacinol）、卡塔拉诺 （kotalanol）、脱氧野尻霉素、麦角甾苷等以外，也可以是来源于天然植物 的成分。作为来源于植物的α-葡萄糖苷酶活性抑制成分，可列举出来源于 番石榴、豆豉、甘草、小麦、五层龙属植物、桑、玫瑰花、匙羹藤、五加 类（五加、独活、楤木等。以下，相同）、桉树、桂皮、枇杷、罗布麻等植 物的天然成分。它们可以单独使用，也可以将2种以上组合。

作为天然的α-葡萄糖苷酶活性抑制成分的具体的例子，可列举出番石 榴叶多酚、豆豉浸膏、甘草浸膏、小麦白蛋白、五层龙浸膏（五层龙属植 物的粉碎物或提取物）、桑叶浸膏、玫瑰花浸膏、匙羹藤叶粉末、五加类、 桉树、桂皮、枇杷叶、罗布麻等。这些当中，从胆汁酸生成调节能力的观 点出发，优选阿卡波糖、伏格列波糖、脱氧野尻霉素、番石榴叶多酚、五 层龙属植物的粉碎物或提取物、桑叶浸膏、匙羹藤叶粉末、豆豉浸膏。作 为α-葡萄糖苷酶抑制成分，特别优选为来源于五层龙属植物、桑或匙羹藤 的成分。

这些α-葡萄糖苷酶活性抑制成分也可以是化学合成品，但优选以天然 物的粉碎物或提取物的形态使用。另外，在为五层龙属植物的提取物的情 况下，可以是热水提取物，也可以是醇提取物。

它们可以单独使用，也可以将2种以上组合使用。

其中，五层龙属植物主要是在斯里兰卡或印度或东南亚地区野生的卫 矛科的植物，更具体而言，可采用选自网状五层龙（Salacia reticulata）、长 圆果五层龙（S.oblonga）、五层龙（S.prinoides）、中国五层龙（S.chinensis） 中的1种以上的植物。可使用将这些植物粉碎而得到的粉碎物、或从根、 干、叶、花、果实等可食部分提取的浸膏粉末。也可以将1种以上的部位 混合使用。更优选采用从根、干提取的浸膏粉末。

在采用五层龙属植物的提取浸膏粉末的情况下，是将从上述的可食部 分通过溶剂提取得到的提取物干燥而得到的物质。作为提取溶剂，可以从 水、或以甲醇、乙醇为首的醇类、或者水与醇类或丙酮等酮类的混合溶剂 中选择。优选采用水、醇、含水醇。更优选作为提取溶剂采用热水或乙醇 或者含水乙醇。所述含水醇只要使用醇浓度例如为30～90%、优选为40～ 70%的浓度的含水醇即可。干燥方法可列举出喷雾干燥、冷冻干燥等，但 并不限定于这些。

本发明中的α-葡萄糖苷酶抑制成分优选蔗糖酶50%抑制浓度（IC₅₀值） 为0.0001μg/ml以上且800μg/ml以下。此外，蔗糖酶50%抑制浓度更优选 为0.001μg/ml以上且600μg/ml以下，进一步优选为0.001μg/ml以上且 450μg/ml以下。蔗糖酶50%抑制浓度（IC₅₀值）只要通过日本特开 2009-249315号公报的段落[0009]～[0012]中记载的方法来测定即可。例如， 来源于五层龙属植物、桑及匙羹藤等植物的成分的IC₅₀值为450μg/ml以下。

本发明的胆汁酸生成调节剂可以是液状、固体形状、粉末、凝胶状中 的任一形态，也可以采取溶液、片剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、颗粒剂等形 态。

作为α-葡萄糖苷酶活性抑制成分在胆汁酸生成调节剂中的含量，虽然 根据胆汁酸生成调节剂的剂型或给药方式而异，但只要是对胆汁酸生成调 节活性有效的量即可。例如在胆汁酸生成调节剂为溶液形态的情况下，α- 葡萄糖苷酶活性抑制成分的含量可以设定为胆汁酸生成调节剂的总质量的 90质量%～1质量%，优选设定为73质量%～1质量%，在固体形态的情况 下，可以设定为胆汁酸生成调节剂的总质量的90质量%～0.5质量%，优选 设定为80质量%～1质量%，但没有特别限制。作为给药量，虽然根据剂 型等而异，但通常，以1天1次计，作为α-葡萄糖苷酶活性抑制成分，可 以设定为0.5mg～1500mg，优选设定为2mg～800mg，但没有特别限制。

此外，本发明的胆汁酸生成调节剂中，根据其剂型或给药方式，也可 以含有制药上能够容许的载体或公知的其它添加成分。

作为在制成溶液状的情况下优选采用的载体，可列举出水等水性介质。 作为为了制成固体形状而优选采用的添加成分，可以采用结晶纤维素、硬 脂酸镁那样的赋形剂、玉米淀粉、海藻酸那样的膨化剂。此外，作为片剂、 胶囊剂、颗粒剂的被覆剂，可以采用虫胶或砂糖、包膜基材、酵母细胞壁 （Yeast Wrap）等。

本发明中为了改善五层龙属植物的提取浸膏粉末的经时变色，优选含 有制成片剂或硬胶囊的形态时的质量的1%以上的量的碳酸钙或二氧化硅。 可以进一步采用能够作为食品或食品添加剂利用的低吸湿原料、吸湿剂。 作为低吸湿性原料，优选采用纤维素、结晶纤维素、粉末纤维素、微晶纤 维素、乳糖、寡糖、糖醇、海藻糖、硬脂酸镁、硬脂酸钙等。作为吸湿剂， 可采用硅酸盐类、碳酸镁、亚铁氰化物、多糖类等。作为低吸湿性原料， 更优选采用结晶纤维素、微晶纤维素、乳糖。此外，作为成型成粉末、固 形剂或液剂所需要的化合物，可列举出赤藻糖醇、麦芽糖醇、羟丙基纤维 素、高岭土、滑石等。

作为本胆汁酸生成调节剂的给药方式，优选为经口给药，但也可以是 非经口给药、例如经直肠给药或舌下给药。

实施例

以下，通过实施例对本发明进行详细说明。然而，本发明不受它们的 任何限定。另外，只要没有特别说明，“份”为质量基准。

[实施例1]

如下所述基于肝脏中的Cyp7a1的表达量确认了α-葡萄糖苷酶活性抑 制成分促进肝脏中的胆汁酸的生物合成。已知Cyp7a1由于是对作为主要的 胆汁酸合成路径的最初的阶段且作为律速阶段的特定的阶段进行催化的 酶，所以是对胆汁酸的生产最重要的酶。

将8周龄的雄的SD大鼠分成各7只的组，分别在通常的条件下喂食 进行了放射线灭菌的固形饲料CRF-1（Oriental Yeast Co.,Ltd.制），同时进 一步将表1中记载的各种有效成分按照分别达到20mg/kg/day的方式混合 到各固形饲料中，用胃管摄取30天。

另外，作为表1中记载的试样中的有效成分，使用以下的成分。将这 些成分分别用注射用水溶解，制成10mg/ml的水溶液后进行给药。

试样B以五层龙属植物提取物作为有效成分。作为五层龙属植物提取 物，五层龙浸膏粉末使用对将网状五层龙（S.reticulata）和长圆果五层龙 （S.oblonga）的根及干的部分粉碎后经由98℃的热水提取工序得到的溶液 进行喷雾干燥制备的物质。

试样C以桑叶提取物作为有效成分。作为桑叶提取物，使用在桑叶干 燥粉末300g中添加1升的25%（v/v）乙醇进行提取后将滤液在减压下脱 溶剂并干燥而制备的物质。

试样D以匙羹藤粉末作为有效成分。匙羹藤粉末使用将匙羹藤叶干燥 并粉末化而制备的物质。

对所使用的含有这3种有效成分的试样调查蔗糖酶IC₅₀，结果确认蔗 糖酶IC₅₀均为450μg/ml以下。

此外，作为已经确认不显示α-葡萄糖苷酶活性抑制活性的其它有效成 分，采用葡萄糖、低聚异麦芽糖、低聚半乳糖、低聚甘露糖、难消化性糊 精及猪油。

低聚异麦芽糖采用林原商事的“PANORUP”，低聚半乳糖采用日新制糖 的“Cupoligo”，桑叶浸膏采用从株式会社CLOTH获得的产品。

此外，难消化性糊精采用Cyclochem公司制的产品。

在30天的各试样的摄取期后，摘取各组的大鼠的肝脏，按照常规方法 提取总mRNA。对所提取的各组的总mRNA通过常规方法进行RT-PCR， 测定肝脏中的Cyp7a1的表达量，以相对于试样A中的表达量的百分率进 行评价。将结果示于表1中。*：P＜0.05

[表1]

*：P＜0.05

如表1所示那样，含有五层龙属植物提取物、桑叶粉末及匙羹藤的试 样B～C中，Cyp7a1的表达量与非给药组相比显著提高。由此可知，五层 龙属植物提取物、桑叶粉末及匙羹藤提高肝脏中的Cyp7a1的表达量而促进 胆汁酸的生物合成。

[实施例2]

接着，作为α-葡萄糖苷酶活性抑制成分，采用五层龙属植物提取物， 如下所述测定粪便中的初级胆汁酸及次级胆汁酸的生成量。

将8周龄的雄的SD大鼠分成各10只的3组，将实施例1中制作的五 层龙属植物提取浸膏按照分别达到0mg/day/kg、20mg/day/kg、40mg/day/kg 的方式混合到各固形饲料中，用胃管摄取10天。非给药组中仅给予注射用 水。

在30天的各试样的给药后，采集1天粪便，供于测定。将采集的粪用 冷冻干燥机干燥并测定干燥重量后，用磨机粉碎，用热乙醇提取，作为测 定用试样。通过采用了3α-羟基类固醇脱氢酶（3α-HDS）固定化酶柱的高 效液相色谱法和荧光分析进行初级胆汁酸量和次级胆汁酸的量的测定。将 结果示于表2中。

[表2]

*：P＜0.05 **：P＜0.01

如表2所示那样，含有五层龙属植物提取物的试样L及试样M中，与 非给药组（试样K）相比，粪便中的初级胆汁酸量增加，并且使粪便中的 次级胆汁酸量大幅减少。得知初级胆汁酸的生成增加率比次级胆汁酸的增 加率大，初级胆汁酸的生成量大幅增加。次级胆汁酸的量与非给药组相比 以20mg/day计，达到约一半以下，即使将五层龙属植物提取物的量加倍， 也比非给药组大幅降低。另外，关于实验中所用大鼠的粪便量，组间未见 到显著差异。

因此，根据本发明，能够直接促进初级胆汁酸的生物合成，同时能够 抑制次级胆汁酸的生成，其结果是，能够将生物体中的初级胆汁酸及次级 胆汁酸的量调节为对生物体适宜的量。

2010年2月25日申请的日本国专利申请第2010-040501号的公开内容 其整体通过参照而纳入到本说明书中。

本说明书中记载的所有文献、专利申请以及技术标准以与具体且分别 记载地将各文献、专利申请以及技术标准通过参照而纳入的情况相同的程 度援引并纳入到本说明书中。