V5抗原表位融合性酵母表达载体及构建方法

摘要

本发明涉及一种可与V5抗原表位相融合的酵母表达载体及其构建方法。所说的V5抗原表位相融合的酵母表达载体，是一种含有V5“标签”（tag）酵母表达载体，该“标签”可通过一个柔性短肽Gly-Ile-与下游基因相融合，不会影响下游表达蛋白的生物活性。其构建方法是：以Invitrogen公司的pYestrp2载体作为基本框架，将酵母强启动子GPD插入到pYestrp2载体中，构建成酵母表达载体pGPD，再将5′和3′端具有BamHI和EcoRI黏性末端V5抗原表位DNA，插入到pGPD相应的酶切位点，构建成V5融合性酵母表达载体pGPDV5。pGPDV5可通过柔性短肽与下游基因相融合。由于V5抗体已经商品化，故本发明可以方便、特异性、有效地验证外源性基因的在酵母细胞中的表达，且费用相对较低。