十五味乳鹏制剂的检测方法

摘要

本发明涉及十五味乳鹏制剂的检测方法，包括下述检测方法的一种或几种：通过薄层层析检测制剂中川木香、决明子、藏菖蒲，以及检测制剂中乌头碱含量。

说明书

技术领域

本发明属于中药技术领域，具体涉及一种中药制剂的检测方法。

背景技术

十五味乳鹏丸是藏医传统验方，处方由贝噶、宽筋藤、决明子、渣驯膏、 黄葵子、藏菖蒲、巴夏嘎、儿茶、诃子(去核)、安息香、毛诃子、铁棒锤(制)、 木香、余甘子、麝香十五味药材组成。可消炎止痛，干黄水，用于关节红肿疼 痛，发痒，痛风，黄水积聚。

目前使用的十五味乳鹏丸记载于《中华人民共和国卫生部药品标准1995 年版藏药第一册：

藏药名：毕琼久埃日布

拼音名：Shiwuwei Rupeng Wan

书页号：C1-199    标准编号：WS3-BC-0196-95

【处方】贝噶150g、宽筋藤150g、决明子120g、渣驯膏75g、黄葵子120g、 藏菖蒲120g、巴夏嘎110g、儿茶75g、诃子150g、安息香60g、毛诃子150g、 铁棒锤75g、木香150g、麝香1.5g、余甘子150g。

【制法】以上十五味，除渣驯膏、麝香外，其余粉碎成细粉，过筛，加入 人工麝香细粉，混匀，用渣驯膏加适量水泛丸，阴干即得。

【性状】本品为棕褐色水丸；气微香，味苦。

【检查】应符合丸剂项下有关的各项规定(附录8页)。

【功能与主治】消炎止痛，干黄水。用于关节红肿疼痛，发痒，痛风，黄 水积聚。

【用法与用量】一次2～4丸，一日2次。

【规格】每10丸重3g。

【贮藏】密闭，置阴凉干燥处

目前尚未有十五味乳鹏制剂的检测方法，也没有对方中的毒性成分进行含 量检测的方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种十五味乳鹏制剂的检测方法，所述检测方法具 有专属性强、重现性好、操作简便等优点。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

一种十五味乳鹏制剂的检测方法，该制剂原料药组成为：乳香150g、宽筋 藤150g、决明子120g、渣驯膏75g、黄葵子120g、藏菖蒲120g、巴夏嘎110g、 儿茶75g、去核的诃子150g、安息香/苦奎那布60g、毛诃子150g、铁棒锤(制) 75g、木香/川木香150g、麝香/人工麝香1.5g、余甘子150g；该方法包括下述 鉴别和/或检查方法的一种或几种：过薄层层析对制剂中的川木香、决明子、藏 菖蒲进行定性鉴别，以及检查制剂中乌头碱含量。

具体地，川木香的定性鉴别包括：

1a)制备川木香供试品溶液、川木香对照药材溶液、不含川木香的阴性样 品溶液；

2a)按照薄层色谱法《中国药典》2010版一部附录VI B试验，分别吸取步 骤1a)所获得的供试品溶液、对照药材溶液、阴性样品溶液并点样于同一硅胶 G薄层板上；

3a)以环己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯为展开剂，将步骤2a)所获得的薄层板放 置在展开缸中饱和、展开、取出、晾干，喷以香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点 显色清晰，薄层色谱中，在与川木香对照药材色谱相应的位置上，供试品色谱 显相同颜色的斑点；

决明子的定性鉴别包括：

1b)制备决明子供试品溶液、决明子对照药材溶液、不含决明子的阴性样 品溶液；

2b)按照薄层色谱法《中国药典》2010版一部附录VI B试验，分别吸取步 骤1b)所获得的供试品溶液、对照药材溶液、阴性样品溶液并点样于同一硅胶 G薄层板上；

3b)以石油醚-甲酸乙酯-甲酸的上层液为展开剂，将步骤2b)所获得的薄 层板放置在展开缸中饱和、展开、取出、晾干，紫外光灯下检视，薄层色谱中， 在与决明子对照药材色谱相应的位置上，供试品色谱显相同颜色的荧光斑点；

藏菖蒲的定性鉴别包括：

1c)制备藏菖蒲供试品溶液、藏菖蒲对照药材溶液、不含藏菖蒲的阴性样 品溶液；

2c)按照薄层色谱法《中国药典》2010版一部附录VI B试验，分别吸取骤 1c)所获得的供试品溶液、对照药材溶液、阴性样品溶液并点样于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上；

3c)以石油醚-乙酸乙酯为展开剂，将步骤2c)所获得的薄层板放置在展开 缸中饱和、展开、取出、晾干，紫外光灯下检视；薄层色谱中，在与藏菖蒲对 照药材色谱相应的位置上，供试品色谱显相同颜色的暗斑点；

乌头碱含量检查包括：

1d)制备乌头碱供试品溶液、乌头碱对照品溶液；

2d)按照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录VI B试验，分别吸取 步骤1d)所获得的供试品溶液，乌头碱对照品溶液并点样于同一硅胶G薄层板 上；

3d)以环己烷-乙酸乙酯-二乙胺为展开剂，将步骤2d)所获得的薄层板放置 在展开缸中饱和、展开、取出、晾干，喷以稀碘化铋钾试液，薄层色谱中，供 试品色谱在与对照品色谱相应的位置上出现的斑点应小于对照品的斑点或不出 现斑点。

所述川木香、决明子、藏菖蒲以及乌头碱的供试品溶液、对照药材溶液、 阴性样品溶液的制备方法包括：

(1)川木香

取所述十五味乳鹏制剂，研细，加丙酮，超声处理，滤过，滤液浓缩，作 为川木香的供试品溶液；另取川木香对照药材，同法制成川木香对照药材溶液； 按处方比例及制备工艺，配置不含川木香的阴性样品，并按所述供试品溶液的 制备方法制成不含川木香的阴性样品溶液；

(2)决明子

取所述十五味乳鹏制剂，研细，加甲醇，加热回流，滤过，滤液蒸干，残 渣加2.5mol/L硫酸溶液，超声处理，再加三氯甲烷，加热回流，冷却，移置分 液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液用三氯甲烷提取，加无水硫酸钠适量脱水， 滤过，滤液挥干，残渣加甲醇使溶解，作为决明子的供试品溶液；另取决明子 对照药材，同法制成决明子对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含 决明子的阴性样品，并按所述供试品溶液的制备方法制成不含决明子的阴性样 品溶液；

(3)藏菖蒲

取所述十五味乳鹏制剂，加甲醇，超声，滤过，滤液浓缩，作为藏菖蒲的 供试品溶液；另取藏菖蒲对照药材，同法制成藏菖蒲对照药材溶液；按处方比 例及制备工艺，配置不含藏菖蒲的阴性样品，并按所述供试品溶液的制备方法 制成不含藏菖蒲的阴性样品溶液；

(4)乌头碱

取所述十五味乳鹏制剂，研细，加氨试液，搅匀，放置，加乙醚，振摇， 放置，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇使溶解，作为乌头碱含量检测的供试 品溶液；另取乌头碱对照品适量，加无水乙醇制成溶液，作为乌头碱对照品溶 液。

优选地，所述方法包括以下步骤：

a)川木香的定性鉴别

取所述十五味乳鹏制剂1～3重量份，研细，加丙酮10～30体积份，超声处 理10～30分钟，滤过，滤液浓缩约1～3体积份，作为川木香的供试品溶液；另 取川木香对照药材0.1～0.8重量份，同法制成川木香对照药材溶液；按处方比例 及制备工艺，配置不含川木香的阴性样品，并按所述供试品溶液的制备方法制 成不含川木香的阴性样品溶液；照薄层色谱法《中国药典》2010版一部附录VI B试验，吸取上述三种溶液各0.003～0.007体积份，分别点样于同一硅胶G薄层 板上，以体积比为10～20∶2～8∶0.5～2的环己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯为展开剂，薄 层板置展开缸中饱和0～40min，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液， 热风吹至斑点显色清晰；薄层色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，供试 品色谱显相同颜色的斑点；

b)决明子的定性鉴别

取所述十五味乳鹏制剂1～3重量份，研细，加甲醇10～30体积份，加热回 流20～45分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加2.5mol/L硫酸溶液10～30体积份，超 声处理3～8分钟，再加三氯甲烷10～30体积份，加热回流20～45分钟，冷却， 移置分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液用三氯甲烷提取1～3次，每次5～15体 积份，合并三氯甲烷液，加无水硫酸钠适量脱水，滤过，滤液挥干，残渣加甲 醇1～3体积份使溶解，作为决明子的供试品溶液；另取决明子对照药材0.1～0.8g， 同法制成决明子对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含决明子的阴 性样品，并按所述供试品溶液的制备方法制成不含决明子的阴性样品溶液；照 薄层色谱法《中国药典》2010版一部附录VI B试验，吸取供试品溶液0.005～0.02 体积份、对照药材溶液0.003～0.007体积份和阴性样品溶液0.005～0.02体积份， 分别点样于同一硅胶G薄层板上，以体积比10～20∶2～8∶0.5～2，沸点为60℃～ 90℃石油醚-甲酸乙酯-甲酸的上层液为展开剂，薄层板置展开缸中饱和0～40min， 展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；薄层色谱中，在与对照药材色 谱相应的位置上，供试品色谱显相同颜色的荧光斑点；

c)藏菖蒲的定性鉴别

取所述十五味乳鹏制剂1～3重量份，加甲醇10～30体积份，超声10～30分 钟，滤过，滤液浓缩至约1～3体积份，作为藏菖蒲的供试品溶液；另取藏菖蒲 对照药材0.1～0.8重量份，同法制成藏菖蒲对照药材溶液；按处方比例及制备工 艺，配置不含藏菖蒲的阴性样品，并按所述供试品溶液的制备方法制成不含藏 菖蒲的阴性样品溶液；照薄层色谱法《中国药典》2010版一部附录VI B试验， 吸取供试品溶液0.005～0.02体积份、对照药材溶液0.003～0.007体积份和阴性样 品溶液0.005～0.02体积份，分别点样于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以体积比为 5～15∶0.5～4，沸点为60℃～90℃石油醚-乙酸乙酯为展开剂，薄层板置展开缸中 饱和0～40min，展开，取出，晾干，置254nm紫外光灯下检视；薄层色谱中， 在与对照药材色谱相应的位置上，供试品色谱显相同颜色的暗斑点；

d)乌头碱含量检查

取所述十五味乳鹏制剂3～8重量份，研细，加氨试液0.5～2体积份，搅匀， 放置1～3小时，加乙醚10～20体积份，振摇0.5～2小时，放置18～30小时，滤过， 滤液蒸干，残渣加无水乙醇1～3体积份使溶解，作为乌头碱的供试品溶液；另 取乌头碱对照品适量，加无水乙醇制成每体积份含0.0005～0.002重量份的溶液， 作为乌头碱对照品溶液；照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录VI B试 验，吸取供试品溶液0.005～0.03体积份，乌头碱对照品溶液0.0015～0.015体积 份，分别点样于同一硅胶G薄层板上，以体积比为2～8∶1～3∶0.5～2的环己烷- 乙酸乙酯-二乙胺为展开剂，薄层板置展开缸中饱和0～40min，展开，取出，晾 干，喷以稀碘化铋钾试液；薄层供试品色谱中，供试品色谱在与对照品色谱相 应的位置上出现的斑点应小于对照品的斑点或不出现斑点。

更优选地，所述方法包括以下步骤：

i)川木香的定性鉴别

取所述十五味乳鹏制剂2g，研细，加丙酮20ml，超声处理20分钟，滤过， 滤液浓缩约2ml，作为川木香的供试品溶液；另取川木香对照药材0.5g，同法制 成川木香对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含川木香的阴性样品， 并按所述供试品溶液的制备方法制成不含川木香的阴性样品溶液；照薄层色谱 法《中国药典》2010版一部附录VI B试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点 样于同一硅胶G薄层板上，以体积比为15∶5∶1的环己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯为 展开剂，薄层板置展开缸中饱和20min，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫 酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；薄层色谱中，在与对照药材色谱相应的位置 上，供试品色谱显相同颜色的斑点；

ii)决明子的定性鉴别

取所述十五味乳鹏制剂2g，研细，加甲醇20ml，加热回流30分钟，滤过， 滤液蒸干，残渣加2.5mol/L硫酸溶液20ml，超声处理5分钟，再加三氯甲烷20ml， 加热回流30分钟，冷却，移置分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液用三氯甲烷 提取2次，每次10ml，合并三氯甲烷液，加无水硫酸钠适量脱水，滤过，滤液 挥干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为决明子的供试品溶液；另取决明子对照药 材0.5g，同法制成决明子对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含决 明子的阴性样品，并按所述供试品溶液的制备方法制成不含决明子的阴性样品 溶液；照薄层色谱法《中国药典》2010版一部附录VI B试验，吸取供试品溶液 10μl、对照药材溶液5μl和阴性样品溶液10μl，分别点样于同一硅胶G薄层板上， 以体积比15∶5∶1，沸点为60℃～90℃石油醚-甲酸乙酯-甲酸的上层液为展开 剂，薄层板置展开缸中饱和20min，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下 检视；薄层色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，供试品色谱显相同颜色 的荧光斑点；

iii)藏菖蒲的定性鉴别

取所述十五味乳鹏制剂2g，加甲醇20ml，超声20分钟，滤过，滤液浓缩 至约2ml，作为藏菖蒲的供试品溶液；另取藏菖蒲对照药材0.5g，同法制成藏菖 蒲对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含藏菖蒲的阴性样品，并按 所述供试品溶液的制备方法制成不含藏菖蒲的阴性样品溶液；照薄层色谱法《中 国药典》2010版一部附录VI B试验，吸取供试品溶液5～10μl、对照药材溶液 5μl和阴性样品溶液5～10μl，分别点样于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以体积比为 10∶2，沸点为60℃～90℃石油醚-乙酸乙酯为展开剂，薄层板置展开缸中饱和 20min，展开，取出，晾干，置254nm紫外光灯下检视；薄层色谱中，在与对照 药材色谱相应的位置上，供试品色谱显相同颜色的暗斑点；

iv)乌头碱含量检查

取所述十五味乳鹏制剂5g，研细，加氨试液1ml，搅匀，放置2小时，加 乙醚15ml，振摇1小时，放置24小时，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇2ml 使溶解，作为乌头碱的供试品溶液；另取乌头碱对照品适量，加无水乙醇制成 每1ml含1mg的溶液，作为乌头碱对照品溶液；照薄层色谱法《中国药典》2010 年版一部附录VI B试验，吸取供试品溶液20μl、10μl，乌头碱对照品溶液10μl、 5μl、2.5μl，分别点样于同一硅胶G薄层板上，以体积比为5∶2∶1的环己烷- 乙酸乙酯-二乙胺为展开剂，薄层板置展开缸中饱和20min，展开，取出，晾干， 喷以稀碘化铋钾试液；薄层色谱中，供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上 出现的斑点应小于对照品的斑点或不出现斑点。

上述十五味乳鹏制剂的剂型可以是片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂或散剂。 制备方法为：取所述十五味乳鹏制剂，粉碎成细粉，过筛，混匀，加适量水制 丸，阴干即得；或取所述十五味乳鹏制剂，粉碎成细粉，过筛，混匀，混匀， 按药剂学常规方法，加入常规辅料，制成临床上接受的口服制剂。

本发明针对十五味乳鹏制剂的组成成分，对指标性成分川木香、决明子、 藏菖蒲的存在进行检测，并检测制剂中的毒性成分乌头碱的含量，以达到对制 剂的质量进行控制的目的。本发明的检测方法根据实际检测需要，对现有的检 测方法的检测条件进行了筛选，确定了较佳的十五味乳鹏制剂的检测方法，该 检测方法具有灵敏、重现性好和专属性强的特点。

附图说明

图1是十五味乳鹏制剂中川木香薄层层析检测图；

其中，从左到右样品顺序为：川木香的供试品溶液1、川木香的供试品溶液 2、川木香的供试品溶液3、川木香的供试品溶液4、川木香对照药材溶液、不 含川木香的阴性样品溶液；

其中，展开剂为环己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯(15∶5∶1)，显色剂为5％香草醛 硫酸。

图2是十五味乳鹏制剂中决明子薄层层析检测图；

其中，从左到右样品顺序为：决明子的供试品溶液1、决明子的供试品溶液 2、决明子的供试品溶液3、决明子的供试品溶液4、决明子对照药材溶液、决 明子对照药材溶液、不含决明子的阴性样品溶液；

其中，展开剂为石油醚(60℃～90℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上层 液，紫外光灯(365nm)下检视。

图3是十五味乳鹏制剂中藏菖蒲薄层层析检测图；

其中从左到右样品顺序为：藏菖蒲的供试品溶液1、藏菖蒲的供试品溶液2、 藏菖蒲的供试品溶液3、藏菖蒲的供试品溶液4、藏菖蒲对照药材溶液、藏菖蒲 对照药材溶液、不含藏菖蒲的阴性对照液；

其中，展开剂为石油醚(60℃～90℃)-乙酸乙酯(10∶2)，紫外光灯(254 nm)下检视。

图4是十五味乳鹏制剂中乌头碱含量检测图；

其中从左到右样品顺序为：乌头碱含量检测的供试品溶液1(点样量10μl)、 乌头碱含量检测的供试品溶液2(点样量10μl)、乌头碱含量检测的供试品溶液 3(点样量10μl)、乌头碱对照品溶液1(点样量5μl)、乌头碱对照品溶液2(点 样量10μl)、乌头碱含量检测的供试品溶液4(点样量20μl)、乌头碱含量检测 的供试品溶液5(点样量20μl)、乌头碱含量检测的供试品溶液6(点样量20μl)、 乌头碱对照品溶液(点样量2.5μl)、乌头碱对照品溶液(点样量2.5μl)；

其中，展开剂为环己烷-乙酸乙酯-二乙胺(5∶2∶1)，显色剂为稀碘化铋 试液；日光下检视。

具体实施方式

下述用于各成分检测的制剂在各检测方法下均简称为“供试品”，应理解为其 指按照各检测方法要求制备的供试品，例如在川木香方法中所述的供试品为“川 木香的供试品”。

【实施例1】十五味乳鹏制剂的制备

将乳香150g、宽筋藤150g、决明子120g、渣驯膏75g、黄葵子120g、藏菖 蒲120g、巴夏嘎110g、儿茶75g、去核的诃子150g、安息香/苦奎那布60g、毛 诃子150g、铁棒锤(制)75g、木香/川木香150g、麝香/人工麝香1.5g、余甘 子150g，除渣驯膏、麝香或人工麝香外，其余粉碎成细粉，过筛，加入麝香或 人工麝香细粉，混匀，用渣驯膏加适量水制丸，阴干即得。或以上十五味，除 麝香或人工麝香外，其余粉碎成细粉，过筛，加入麝香或人工麝香细粉，混匀， 按药剂学常规方法，加入常规辅料，制成临床上接受的口服制剂：颗粒剂、丸 剂、胶囊剂、片剂或散剂。

用法与用量：日服用量为1.2-2.4g生药量，一日2次。

【实施例2】十五味乳鹏制剂中川木香的薄层层析条件的筛选实验

(1)仪器

乳钵、电子秤、具塞锥形瓶、移液管、超声波提取仪、漏斗、滤纸、蒸发 皿、点样器、硅胶G板、层析缸、喷雾瓶、电吹风。

(2)对照药材

川木香对照药材(批号：1091-200001)，购自中国药品生物制品检定所。

(3)试剂

乙醚、环己烷、丙酮、石油醚(60℃～90℃)、甲酸乙酯、甲酸、乙酸乙酯、 二氯甲烷、5％香草醛硫酸。

(4)检验方法：

提取溶剂的选择：分别采用乙醚和丙酮为提取溶剂；

提取方法的选择：分别采用超声处理和加热回流；

展开剂的选择：分别以环己烷-丙酮(10∶3)、石油醚(60℃～90℃)-甲酸 乙酯-甲酸(15∶5∶0.5)、石油醚(60℃～90℃)-乙酸乙酯(9∶1)、环己烷-二 氯甲烷-乙酸乙酯(15∶5∶1)为展开剂。

(5)分别选择以上不同提取溶剂、提取方法和展开剂进行试验，结果如下

在以上条件下反复试验，最终确定优选检测方法，具体如下：

取所述十五味乳鹏制剂2g，研细，加丙酮20ml，超声处理20分钟，滤过， 滤液浓缩约2ml，作为供试品溶液；另取川木香对照药材0.5g，同法制成对照药 材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含川木香的阴性样品，并按所述供试 品溶液的制备方法制成不含川木香的阴性样品溶液。照薄层色谱法《中国药典》 2010版一部附录VI B试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄 层板上，以体积比为15∶5∶1的环己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯为展开剂，薄层板置展 开缸中饱和20min，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，热风吹至斑 点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的 斑点，如图1所示。该方法经多人多次试验操作，重现性好，专属性强，可以 作为十五味乳鹏制剂中川木香的检测方法。

【实施例3】十五味乳鹏制剂中决明子的薄层层析条件的筛选实验

(1)仪器

乳钵、电子秤、具塞锥形瓶、移液管、超声波提取仪、漏斗、滤纸、蒸发 皿、点样器、硅胶G板、层析缸、喷雾瓶、电吹风。

(2)对照药材

决明子对照药材(批号：1211011-200403)，购自中国药品生物制品检定所。

(3)试剂

甲醇、95％乙醇、2.5mol/L硫酸溶液、三氯甲烷、无水硫酸钠、石油醚(60℃～ 90℃)、甲酸乙酯、甲酸。

(4)检验方法：

提取溶剂的选择：分别采用甲醇和95％乙醇为提取溶剂；

提取方法的选择：分别采用浸渍、加热回流、超声提取；

展开剂的选择：分别以石油醚(30～60℃)-丙酮(2∶1)、石油醚(60℃～90℃) -甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上层液为展开剂。

(5)分别选择以上不同提取溶剂、提取方法和展开剂进行试验，结果如下：

在以上条件下反复试验，最终确定了决明子优选检测方法，具体如下：

取所述十五味乳鹏制剂2g，研细，加甲醇20ml，加热回流30分钟，滤过， 滤液蒸干，残渣加2.5mol/L硫酸溶液20ml，超声处理5分钟，再加三氯甲烷20ml， 加热回流30分钟，冷却，移置分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液用三氯甲烷 提取2次，每次10ml，合并三氯甲烷液，加无水硫酸钠适量脱水，滤过，滤液 挥干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取决明子对照药材0.5g， 同法制成对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含决明子的阴性样品， 并按所述供试品溶液的制备方法制成不含决明子的阴性样品溶液。照薄层色谱 法《中国药典》2010版一部附录VI B试验，吸取供试品溶液10μl、对照药材溶 液5μl和阴性样品溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比15∶5∶1， 沸点为60℃～90℃石油醚-甲酸乙酯-甲酸的上层液为展开剂，薄层板置展开缸中 饱和20min，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中， 在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。如图2所示。该方 法经多人多次试验操作，重现性好，专属性强，可以作为十五味乳鹏制剂中决 明子的检测方法。

【实施例4】十五味乳鹏制剂中藏菖蒲的薄层层析条件的筛选实验

(1)仪器

乳钵、电子秤、具塞锥形瓶、移液管、超声波提取仪、漏斗、滤纸、蒸发 皿、点样器、硅胶G和GF254薄层板、层析缸、喷雾瓶、电吹风。

(2)对照药材

藏菖蒲对照药材(批号：121084-200502)，购自中国药品生物制品检定所。

(3)试剂

甲醇、乙醚、石油醚(60℃～90℃)、乙酸乙酯、正己烷、甲酸。

(4)检验方法：

提取溶剂的选择：分别采用甲醇和乙醚为提取溶剂；

薄层板的选择：分别采用硅胶G薄层板和硅胶GF254薄层板；

展开剂的选择：分别以石油醚(30～60℃)-乙酸乙酯(10∶2)、正己烷-乙酸乙 酯-甲酸(9∶1∶1)的上层液为展开剂。

(5)分别选择以上不同提取溶剂、薄层板和展开剂进行试验，结果如下：

在以上条件下反复试验，最终确定了藏菖蒲的优选检测方法，具体如下：

取所述十五味乳鹏制剂2g，研细，加甲醇20ml，超声20分钟，滤过，滤 液浓缩至约2ml，作为供试品溶液；另取藏菖蒲对照药材0.5g，同法制成对照药 材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含藏菖蒲的阴性样品，并按所述供试 品溶液的制备方法制成不含藏菖蒲的阴性样品溶液。照薄层色谱法《中国药典》 2010版一部附录VI B试验，吸取供试品溶液5～10μl、对照药材溶液5μl和阴 性样品溶液5～10μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以体积比为10∶2，沸 点为60℃～90℃石油醚-乙酸乙酯为展开剂，薄层板置展开缸中饱和20min，展 开，取出，晾干，置254nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色 谱相应的位置上，显相同颜色的暗斑点。如图3所示。该方法经多人多次试验 操作，重现性好，专属性强，可以作为十五味乳鹏制剂中藏菖蒲的检测方法。

【实施例5】十五味乳鹏制剂中乌头碱含量的薄层层析条件的筛选实验

(1)仪器

乳钵、电子秤、具塞锥形瓶、移液管、超声波提取仪、漏斗、滤纸、蒸发 皿、点样器、硅胶G薄层板、层析缸、喷雾瓶、电吹风。

(2)对照品

乌头碱对照品(批号：320756035164)，购自中国药品生物制品检定所。

(3)试剂

氨试液、乙醚、无水乙醇、环己烷、苯、乙酸乙酯、二乙胺、二氯甲烷、 丙酮、甲醇、稀碘化铋钾、改良碘化铋钾试液。

(4)提取方法

展开剂的选择：分别以苯-乙酸乙酯-乙二胺(14∶4∶1)、环己烷-乙酸乙酯 -乙二胺(14∶4∶1)、环己烷-乙酸乙酯-二乙胺(5∶2∶1)、二氯甲烷-丙酮-甲 醇(6∶1∶1)为展开剂；

显色剂的选择：分别以稀碘化铋钾试液和改良碘化铋钾试液为显色。

(5)分别选择以上不同展开剂和显色剂进行试验，结果如下：

在以上条件下反复试验，最终确定了乌头碱含量的优选检测方法：

取所述十五味乳鹏制剂5g，研细，加氨试液1ml，搅匀，放置2小时，加 乙醚15ml，振摇1小时，放置24小时，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇2ml 使溶解，作为供试品溶液；另取乌头碱对照品适量，加无水乙醇制成每1ml含 1mg的溶液，作为对照品溶液；照《中国药典》2010版一部附录VI B所述薄层 色谱法试验，精密吸取供试品溶液20μl、10μl，乌头碱对照品溶液10μl、5μl、 2.5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯-二乙胺(5∶2∶1) 为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对 照品色谱相应的位置上出现的斑点应小于对照品的斑点或不出现斑点，如图4 所示。该方法经多人多次试验操作，重现性好，专属性强，可以作为十五味乳 鹏制剂中乌头碱的检测方法。

【检测例1】：十五味乳鹏丸的检测

贝噶150g、宽筋藤150g、决明子120g、渣驯膏75g、黄葵子120g、藏菖蒲 120g、巴夏嘎110g、儿茶75g、去核的诃子150g、安息香/苦奎那布60g、毛诃 子150g、铁棒锤(制)75g、木香/川木香150g、麝香/人工麝香1.5g、余甘子 150g；

以上十五味，除渣驯膏、麝香或人工麝香外，其余粉碎成细粉，过筛，加 入麝香或人工麝香细粉，混匀，用渣驯膏加适量水制丸，阴干即得。

A.川木香的薄层鉴别

取所述十五味乳鹏丸2g，研细，加丙酮20ml，超声处理20分钟，滤过， 滤液浓缩约2ml，作为供试品溶液；另取川木香对照药材0.5g，同法制成对照药 材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含川木香的阴性样品，并按所述供试 品溶液的制备方法制成不含川木香的阴性样品溶液。照薄层色谱法《中国药典》 2010版一部附录VI B试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄 层板上，以体积比为15∶5∶1的环己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯为展开剂，薄层板置展 开缸中饱和20min，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，热风吹至斑 点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的 斑点。

B.决明子的薄层鉴别

取所述十五味乳鹏丸2g，研细，加甲醇20ml，加热回流30分钟，滤过， 滤液蒸干，残渣加2.5mol/L硫酸溶液20ml，超声处理5分钟，再加三氯甲烷20ml， 加热回流30分钟，冷却，移置分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液用三氯甲烷 提取2次，每次10ml，合并三氯甲烷液，加无水硫酸钠适量脱水，滤过，滤液 挥干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取决明子对照药材0.5g， 同法制成对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含决明子的阴性样品， 并按所述供试品溶液的制备方法制成不含决明子的阴性样品溶液。照薄层色谱 法《中国药典》2010版一部附录VI B试验，吸取供试品溶液10μl、对照药材溶 液5μl和阴性样品溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比15∶5∶ 1，沸点为60℃～90℃石油醚-甲酸乙酯-甲酸的上层液为展开剂，薄层板置展开 缸中饱和20min，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱 中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

C.藏菖蒲的薄层鉴别

取所述十五味乳鹏丸2g，加甲醇20ml，超声20分钟，滤过，滤液浓缩至 约2ml，作为供试品溶液；另取藏菖蒲对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液； 按处方比例及制备工艺，配置不含藏菖蒲的阴性样品，并按所述供试品溶液的 制备方法制成不含藏菖蒲的阴性样品溶液。照薄层色谱法《中国药典》2010版 一部附录VI B试验，吸取供试品溶液5～10μl、对照药材溶液5μl和阴性样品溶 液5～10μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以体积比为10∶2，沸点为60℃～ 90℃石油醚-乙酸乙酯为展开剂，薄层板置展开缸中饱和20min，展开，取出， 晾干，置254nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位 置上，显相同颜色的暗斑点。

D.乌头碱的含量检查

取所述十五味乳鹏丸5g，研细，加氨试液1ml，搅匀，放置2小时，加乙 醚15ml，振摇1小时，放置24小时，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇2ml 使溶解，作为供试品溶液；另取乌头碱对照品适量，加无水乙醇制成每1ml含 1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录 VI B试验，吸取供试品溶液10μl和乌头碱对照品溶液2.5μl、阴性样品溶液10μl， 分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为5∶2∶1的环己烷-乙酸乙酯-二乙胺 为展开剂，薄层板置展开缸中饱和20min，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾 试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上出现的斑点应小于对照品 的斑点或不出现斑点。

【检测例2】：十五味乳鹏片的检测

贝噶150g、宽筋藤150g、决明子120g、渣驯膏75g、黄葵子120g、藏菖蒲 120g、巴夏嘎110g、儿茶75g、去核的诃子150g、安息香/苦奎那布60g、毛诃 子150g、铁棒锤(制)75g、木香/川木香150g、麝香/人工麝香1.5g、余甘子 150g；

以上十五味，除麝香或人工麝香外，其余粉碎成细粉，过筛，加入麝香或 人工麝香细粉，混匀，按药剂学常规方法，加入常规辅料，制成临床上可接受 的十五味乳鹏片。

A.川木香的薄层鉴别

取上述十五味乳鹏片1g，研细，加丙酮10ml，超声处理10分钟，滤过， 滤液挥至约1ml，作为供试品溶液；另取川木香对照药材0.3g，同法制成对照药 材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含川木香的阴性样品，并按所述供试 品溶液的制备方法制成不含川木香的阴性样品溶液。照薄层色谱法《中国药典》 2010版一部附录VI B试验，吸取上述三种溶液各3μl，分别点于同一硅胶G薄 层板上，以环己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯(12∶3∶0.8)为展开剂，薄层板置展开缸 中饱和10min，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显 色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

B.决明子的薄层鉴别

取上述十五味乳鹏片3g，研细，加甲醇30ml，加热回流45分钟，滤过， 滤液蒸干，残渣加2.5mol/L硫酸溶液30ml，超声处理8分钟，再加三氯甲烷30ml， 加热回流45分钟，冷却，移置分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液用三氯甲烷 提取3次，每次5ml，合并三氯甲烷液，加无水硫酸钠适量脱水，滤过，滤液挥 干，残渣加甲醇3ml使溶解，作为供试品溶液；另取决明子对照药材0.8g，同 法制成对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含决明子的阴性样品， 并按所述供试品溶液的制备方法制成不含决明子的阴性样品溶液。照薄层色谱 法《中国药典》2010版一部附录VI B试验，吸取供试品溶液15μl、对照药材溶 液7μl和阴性样品溶液15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60℃～ 90℃)-甲酸乙酯-甲酸(17∶6∶1.5)的上层液为展开剂，薄层板置展开缸中饱 和30min，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中， 在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，且斑点分离较好， 无拖尾，阴性无明显干扰。C.乌头碱的限量检查

C.乌头碱的含量检查

取上述十五味乳鹏片8g，研细，加氨试液2ml，搅匀，放置3小时，加乙 醚20ml，振摇2小时，放置30小时，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇3ml 使溶解，作为供试品溶液；另取乌头碱对照品适量，加无水乙醇制成每1ml含 1.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附 录VI B试验，精密吸取供试品溶液15μl和乌头碱对照品溶液5μl，分别点于同 一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯-二乙胺(7∶2.4∶1.3)为展开剂，薄层 板置展开缸中饱和30min，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色 谱中，在与对照品色谱相应的位置上出现的斑点应小于对照品的斑点或不出现 斑点。

【检测例3】：十五味乳鹏硬胶囊的检测

贝噶150g、宽筋藤150g、决明子120g、渣驯膏75g、黄葵子120g、藏菖蒲 120g、巴夏嘎110g、儿茶75g、去核的诃子150g、安息香/苦奎那布60g、毛诃 子150g、铁棒锤(制)75g、木香/川木香150g、麝香/人工麝香1.5g、余甘子 150g；

以上十五味，除麝香或人工麝香外，其余粉碎成细粉，过筛，加麝香或入 人工麝香细粉，混匀，按药剂学常规方法，加入常规辅料，制成临床上可接受 的十五味乳鹏硬胶囊。

A.川木香的薄层鉴别

取上述十五味乳鹏硬胶囊内容物2g，研细，加丙酮20ml，超声处理20分 钟，滤过，滤液挥至约2ml，作为供试品溶液；另取川木香对照药材0.5g，同法 制成对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含川木香的阴性样品，并 按所述供试品溶液的制备方法制成不含川木香的阴性样品溶液。照薄层色谱法 《中国药典》2010版一部附录VI B试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于 同一硅胶G薄层板上，以环己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯(15∶5∶1)为展开剂，薄层 板置展开缸中饱和20min，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，热风 吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同 颜色的斑点。

B.藏菖蒲的薄层鉴别

取上述十五味乳鹏硬胶囊内容物1g，加甲醇120ml，超声10分钟，滤过， 滤液浓缩至约1ml，作为供试品溶液；另取藏菖蒲对照药材0.3g，同法制成对照 药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含藏菖蒲的阴性样品，并按所述供 试品溶液的制备方法制成不含藏菖蒲的阴性样品溶液。照薄层色谱法《中国药 典》2010版一部附录VI B试验，吸取供试品溶液5μl、对照药材溶液3μl和阴 性样品溶液5μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以石油醚(60℃～90℃)- 乙酸乙酯(7∶0.8)为展开剂，薄层板置展开缸中饱和10min，展开，取出，晾干， 置紫外光灯(254nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上， 显相同颜色的暗斑点。

C.乌头碱的限量检查

取上述十五味乳鹏硬胶囊3g，研细，加氨试液0.5ml，搅匀，放置1小时， 加乙醚10ml，振摇0.5小时，放置18小时，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇 1ml使溶解，作为供试品溶液；另取乌头碱对照品适量，加无水乙醇制成每1ml 含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部 附录VI B试验，精密吸取供试品溶液5μl和乌头碱对照品溶液1.5μl，分别点于 同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯-二乙胺(3∶1.2∶0.7)为展开剂，薄 层板置展开缸中饱和20min，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液；供试品 色谱中，在与对照品色谱相应的位置上出现的斑点应小于对照品的斑点或不出 现斑点。

【检测例4】：十五味乳鹏颗粒的检测

贝噶150g、宽筋藤150g、决明子120g、渣驯膏75g、黄葵子120g、藏菖蒲 120g、巴夏嘎110g、儿茶75g、去核的诃子150g、安息香/苦奎那布60g、毛诃 子150g、铁棒锤(制)75g、木香/川木香150g、麝香/人工麝香1.5g、余甘子 150g；

以上十五味，除麝香或人工麝香外，其余粉碎成细粉，过筛，加入麝香或 人工麝香细粉，混匀，按药剂学常规方法，加入常规辅料，制成临床上可接受 的十五味乳鹏颗粒。

A.川木香的薄层鉴别

取上述十五味乳鹏颗粒3g，研细，加丙酮30ml，超声处理30分钟，滤过， 滤液挥至约3ml，作为供试品溶液；另取川木香对照药材0.8g，同法制成对照药 材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含川木香的阴性样品，并按所述供试 品溶液的制备方法制成不含川木香的阴性样品溶液。照薄层色谱法《中国药典》 2010版一部附录VI B试验，吸取上述三种溶液各7μl，分别点于同一硅胶G薄 层板上，以环己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯(18∶7∶1.5)为展开剂，薄层板置展开缸 中饱和30min，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显 色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

B.决明子的薄层鉴别

取上述十五味乳鹏颗粒1g，研细，加甲醇10ml，加热回流20分钟，滤过， 滤液蒸干，残渣加2.5mol/L硫酸溶液10ml，超声处理3分钟，再加三氯甲烷10ml， 加热回流20分钟，冷却，移置分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液用三氯甲烷 提取1次，每次15ml，合并三氯甲烷液，加无水硫酸钠适量脱水，滤过，滤液 挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取决明子对照药材0.3g， 同法制成对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含决明子的阴性样品， 并按所述供试品溶液的制备方法制成不含决明子的阴性样品溶液。照薄层色谱 法《中国药典》2010版一部附录VI B试验，吸取供试品溶液5μl、对照药材溶 液3μl和阴性样品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60℃～ 90℃)-甲酸乙酯-甲酸(12∶2∶0.8)的上层液为展开剂，薄层板置展开缸中饱 和10min，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中， 在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，且斑点分离较好， 无拖尾，阴性无明显干扰。

C.藏菖蒲的薄层鉴别

取上述十五味乳鹏颗粒2g，加甲醇20ml，超声20分钟，滤过，滤液浓缩 至约2ml，作为供试品溶液；另取藏菖蒲对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液； 按处方比例及制备工艺，配置不含藏菖蒲的阴性样品，并按所述供试品溶液的 制备方法制成不含藏菖蒲的阴性样品溶液。照薄层色谱法《中国药典》2010版 一部附录VI B试验，吸取供试品溶液10μl、对照药材溶液5μl和阴性样品溶液 10μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以石油醚(60℃～90℃)-乙酸乙酯(10∶2) 为展开剂，薄层板置展开缸中饱和20min，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm) 下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的暗斑 点。

【检测例5】：十五味乳鹏散的检测

贝噶150g、宽筋藤150g、决明子120g、渣驯膏75g、黄葵子120g、藏菖蒲 120g、巴夏嘎110g、儿茶75g、去核的诃子150g、安息香/苦奎那布60g、毛诃 子150g、铁棒锤(制)75g、木香/川木香150g、麝香/人工麝香1.5g、余甘子 150g；

以上十五味，除麝香或人工麝香外，其余粉碎成细粉，过筛，加入麝香或 人工麝香细粉，混匀，按药剂学常规方法，加入常规辅料，制成临床上可接受 的十五味乳鹏散。

A.决明子的薄层鉴别

取上述十五味乳鹏散2g，研细，加甲醇20ml，加热回流30分钟，滤过， 滤液蒸干，残渣加2.5mol/L硫酸溶液20ml，超声处理5分钟，再加三氯甲烷20ml， 加热回流30分钟，冷却，移置分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液用三氯甲烷 提取2次，每次10ml，合并三氯甲烷液，加无水硫酸钠适量脱水，滤过，滤液 挥干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取决明子对照药材0.5g， 同法制成对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含决明子的阴性样品， 并按所述供试品溶液的制备方法制成不含决明子阴性样品溶液。照薄层色谱法 《中国药典》2010版一部附录VI B试验，吸取供试品溶液10μl、对照药材溶液 5μl和阴性样品溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60℃～90 ℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上层液为展开剂，薄层板置展开缸中饱和 20min，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在 与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，且斑点分离较好，无 拖尾，阴性无明显干扰。

B.藏菖蒲的薄层鉴别

取上述十五味乳鹏散1g，加甲醇120ml，超声10分钟，滤过，滤液浓缩至 约1ml，作为供试品溶液；另取藏菖蒲对照药材0.3g，同法制成对照药材溶液； 按处方比例及制备工艺，配置不含藏菖蒲的阴性样品，并按所述供试品溶液的 制备方法制成不含藏菖蒲的阴性样品溶液。照薄层色谱法《中国药典》2010版 一部附录VI B试验，吸取供试品溶液5μl、对照药材溶液3μl和阴性样品溶液5μl， 分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以石油醚(60℃～90℃)-乙酸乙酯(7∶0.8) 为展开剂，薄层板置展开缸中饱和10min，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm) 下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的暗斑 点。

C.乌头碱的限量检查

取上述十五味乳鹏散3g，研细，加氨试液0.5ml，搅匀，放置1小时，加乙 醚10ml，振摇0.5小时，放置18小时，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇lml 使溶解，作为供试品溶液；另取乌头碱对照品适量，加无水乙醇制成每1ml含 0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附 录VI B试验，精密吸取供试品溶液20μl和乌头碱对照品溶液10μl，分别点于同 一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯-二乙胺(3∶1.2∶0.7)为展开剂，薄层 板置展开缸中饱和20min，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色 谱中，在与对照品色谱相应的位置上出现的斑点应小于对照品的斑点或不出现 斑点。

【检测例6】：十五味乳鹏软胶囊的检测

贝噶150g、宽筋藤150g、决明子120g、渣驯膏75g、黄葵子120g、藏菖蒲 120g、巴夏嘎110g、儿茶75g、去核的诃子150g、安息香/苦奎那布60g、毛诃 子150g、铁棒锤(制)75g、木香川木香150g、麝香/人工麝香1.5g、余甘子 150g；

以上十五味，除麝香或人工麝香外，其余粉碎成细粉，过筛，加入麝香或 人工麝香细粉，混匀，按药剂学常规方法，加入常规辅料，制成临床上可接受 的十五味乳鹏软胶囊。

A.川木香的薄层鉴别

取上述十五味乳鹏软胶囊3g，研细，加丙酮30ml，超声处理30分钟，滤 过，滤液挥至约3ml，作为供试品溶液；另取川木香对照药材0.8g，同法制成对 照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含川木香的阴性样品，并按所述 供试品溶液的制备方法制成不含川木香的阴性样品溶液。照薄层色谱法《中国 药典》2010版一部附录VI B试验，吸取上述三种溶液各7μl，分别点于同一硅 胶G薄层板上，以环己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯(18∶7∶1.5)为展开剂，薄层板置 展开缸中饱和30min，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，热风吹至 斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色 的斑点。

B.决明子的薄层鉴别

取上述十五味乳鹏软胶囊1g，研细，加甲醇10ml，加热回流20分钟，滤 过，滤液蒸干，残渣加2.5mol/L硫酸溶液10ml，超声处理3分钟，再加三氯甲 烷10ml，加热回流20分钟，冷却，移置分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液用 三氯甲烷提取1次，每次15ml，合并三氯甲烷液，加无水硫酸钠适量脱水，滤 过，滤液挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取决明子对照药 材0.3g，同法制成对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含决明子的 阴性样品，并按所述供试品溶液的制备方法制成不含决明子的阴性样品溶液。 照薄层色谱法《中国药典》2010版一部附录VI B试验，吸取供试品溶液5μl、 对照药材溶液3μl和阴性样品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油 醚(60℃～90℃)-甲酸乙酯-甲酸(12∶2∶0.8)的上层液为展开剂，薄层板置 展开缸中饱和10min，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试 品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，且斑点 分离较好，无拖尾，阴性无明显干扰。

C.藏菖蒲的薄层鉴别

取上述十五味乳鹏软胶囊2g，加甲醇20ml，超声20分钟，滤过，滤液浓 缩至约2ml，作为供试品溶液；另取藏菖蒲对照药材0.5g，同法制成对照药材溶 液；按处方比例及制备工艺，配置不含藏菖蒲的阴性样品，并按所述供试品溶 液的制备方法制成不含藏菖蒲的阴性样品溶液。照薄层色谱法《中国药典》2010 版一部附录VI B试验，吸取供试品溶液10μl、对照药材溶液5μl和阴性样品溶 液10μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以石油醚(60℃～90℃)-乙酸乙 酯(10∶2)为展开剂，薄层板置展开缸中饱和20min，展开，取出，晾干，置紫 外光灯(254nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显 相同颜色的暗斑点。

D.乌头碱的限量检查

取上述十五味乳鹏软胶囊5g，研细，加氨试液1ml，搅匀，放置2小时， 加乙醚15ml，振摇1小时，放置24小时，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇 2ml使溶解，作为供试品溶液；另取乌头碱对照品适量，加无水乙醇制成每1ml 含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附 录VI B试验，精密吸取供试品溶液10μl和乌头碱对照品溶液2.5μl，分别点于 同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯-二乙胺(5∶2∶1)为展开剂，薄层 板置展开缸中饱和20min，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色 谱中，在与对照品色谱相应的位置上出现的斑点应小于对照品的斑点或不出现 斑点。